ТОШКЕНТ ДАВЛАТ АГРАР УНИВЕРСИТЕТИ ВА АНДИЖОН
ҚИШЛОҚ ХЎЖАЛИГИ ИНСТИТУТИ ҲУЗУРИДАГИ
DSc.27.06.2017.Qx.13.01-РАҚАМЛИ ИЛМИЙ КЕНГАШ
ПАХТА СЕЛЕКЦИЯСИ, УРУҒЧИЛИГИ ВА ЕТИШТИРИШ
АГРОТЕХНОЛОГИЯЛАРИ ИЛМИЙ ТАДҚИҚОТ ИНСТИТУТИ
РАХМАНКУЛОВ МУРОД САИД-АКБАРОВИЧ
СЕЛЕКЦИЯНИНГ ЯНГИ УСУЛЛАРИ АСОСИДА ҒЎЗАНИНГ
G.
HIRSUTUM
L. ТУРИГА МАНСУБ ТЕЗПИШАР, ЮҚОРИ ҲОСИЛЛИ
НАВ ВА ТИЗМАЛАРИНИ ЯРАТИШ
06.01.05 – Селекция ва уруғчилик
ҚИШЛОҚ ХЎЖАЛИГИ ФАНЛАРИ ДОКТОРИ (DSc)
ДИССЕРТАЦИЯСИ АВТОРЕФЕРАТИ
ТОШКЕНТ – 2017
УЎҚ:
633.511:631.52:631.521
Фан доктори (DSc) диссертацияси автореферати мундарижаси
Оглавление автореферата докторской диссертации (DSc)
Content of the abstract of doctoral dissertation (DSc)
Рахманкулов Мурод Саид-Акбарович
Селекциянинг янги усуллари асосида ғўзанинг
G. hirsutum
L. турига мансуб
тезпишар, юқори ҳосилли нав ва тизмаларини яратиш ................. 3
Рахманкулов Мурод Саид-Акбарович
Создание скороспелых, высокопродуктивных сортов и линий хлопчатника
вида
G. hirsutum
L. на основе новых методов селекции …... 25
Rakhmankulov Murod Said-Akbarovich
Developing of early matured, highly productive cotton varieties and lines of the
species G
. hirsutum
L. on the base of new methods of breeding … 47
Эълон қилинган ишлар рўйхати
Список опубликованных работ
List of published works………………………………………………………. 53
ТОШКЕНТ ДАВЛАТ АГРАР УНИВЕРСИТЕТИ ВА АНДИЖОН
ҚИШЛОҚ ХЎЖАЛИГИ ИНСТИТУТИ ҲУЗУРИДАГИ
DSc.27.06.2017.Qx.13.01-РАҚАМЛИ ИЛМИЙ КЕНГАШ
ПАХТА СЕЛЕКЦИЯСИ, УРУҒЧИЛИГИ ВА ЕТИШТИРИШ
АГРОТЕХНОЛОГИЯЛАРИ ИЛМИЙ ТАДҚИҚОТ ИНСТИТУТИ
РАХМАНКУЛОВ МУРОД САИД-АКБАРОВИЧ
СЕЛЕКЦИЯНИНГ ЯНГИ УСУЛЛАРИ АСОСИДА ҒЎЗАНИНГ
G.
HIRSUTUM
L. ТУРИГА МАНСУБ ТЕЗПИШАР, ЮҚОРИ ҲОСИЛЛИ
НАВ ВА ТИЗМАЛАРИНИ ЯРАТИШ
06.01.05 – Селекция ва уруғчилик
ҚИШЛОҚ ХЎЖАЛИГИ ФАНЛАРИ ДОКТОРИ (DSc)
ДИССЕРТАЦИЯСИ АВТОРЕФЕРАТИ
ТОШКЕНТ – 2017
Фан доктори (DSc) диссертацияси мавзуси Ўзбекистон Республикаси Вазирлар
Маҳкамаси ҳузуридаги Олий аттестация комиссиясида B2017.1.DSc/Qx2 рақам билан
рўйхатга олинган.
Докторлик диссертацияси Пахта селекцияси, уруғчилиги ва етиштириш агротехнологиялари
илмий-тадқиқот институтида бажарилган.
Диссертация автореферати икки тилда (ўзбек, рус) Илмий кенгаш веб-саҳифаси
(www.agrar.uz) ва «ZiyoNet» ахборот-таълим портали (www.ziyonet.uz
)
манзилига
жойлаштирилган.
Илмий
Ким Роберт
Григорьевич
маслаҳатчи:
қишлоқ хўжалиги фанлари доктори
Расмий
оппонентлар:
Ризаева Сафия Мамедовна,
биология фанлари доктори, профессор
Эргашов Иброхим Тошкентович
қишлоқ хўжалиги фанлари доктори,
профессор
Массино Игорь Всеволодович,
қишлоқ хўжалиги фанлари доктори,
профессор
Етакчи ташкилот: М.Улуғбек номидаги Ўзбекистон Миллий университети
Диссертация ҳимояси Тошкент давлат аграр университети ва Андижон қишлоқ хўжалик
институти ҳузуридаги DSc.27.06.2017.Qx.13.01 рақамли Илмий кенгашнинг «19» июл 2017 йил
соат 10
00
даги мажлисида бўлиб ўтади. (Манзил: 100140, Тошкент, Университет кўчаси, 2 уй.
ТошДАУ. Тел.: (99871) 260-48-00, факс: (99871) 260-48-00, е-mail: tuag-info@edu.uz).
Докторлик диссертацияси билан Тошкент давлат аграр университетининг Ахборот-ресурс
марказида танишиш мумкин (532680-рақами билан рўйхатга олинган). Манзил: 100140, Тошкент,
Университет кўчаси, 2 уй. Тел.: (99871) 260-50-43, факс: (99871) 260-48-00.
Диссертация автореферати 2017 йил «07» июл куни тарқатилди.
(2017 йил «06» июлдаги 1.1-рақамли реестр баѐнномаси).
Б.А.Сулаймонов
Илмий даражалар берувчи илмий кенгаш раиси,
б.ф.д., профессор
Я.Х.Юлдашов
Илмий даражалар берувчи илмий кенгаш илмий
котиби, қ.х.ф.н.
М.М.Адилов
Илмий даражалар берувчи илмий кенгаш
қошидаги илмий семинар раиси, қ.х.ф.д.
КИРИШ (докторлик диссертацияси аннотацияси)
Диссертация мавзусининг долзарблиги ва зарурати.
Бугунги кунда
пахтачиликни ривожлантиришида серҳосил, тола сифати юқори, тезпишар,
ташқи муҳитнинг ноқулай омилларга бардошли бўлган ғўза навларини
яратишга катта эътибор қаратилмоқда.
Дунѐ миқѐсида пахта етиштиришнинг
жами 75 % 5 та давлатга – Ҳитой, АҚШ, Ҳиндистон, Покистон ва
Ўзбекистонга тўғри келади.
International Cotton Advisory Committee (ICAC)
ҳабар қилишича 2017 йилда дунѐда пахтани етиштириш миқдори 4 % га
ошади ва 23 млн. тоннага, экин майдони эса 1 % кўпаяди ва 31,3 млн.
гектарга етади. Пахта ҳосилдорлигини 4 % га оширилиши ва гектарига 732 кг
бўлиши кутилмоқда
1
.
Мамлакатимизда ғўза ўсимлиги учун вегетация даври қисқа бўлганлиги
сабабли олимларимиз тезпишар ғўза навлари селекцияси бўйича дунѐда
етакчилик қилиб келмоқда. Шу билан бир қаторда, тола сифат
кўрсаткичларининг юқорилиги бўйича Ўзбекистонда етиштирилаѐтган ғўза
навлари дунѐ бозорида ўз ўрни ва юқори мавқега эга. Жумладан, ғўзанинг
“Бухоро-6” ғўза нави Англиянинг Ливерпул биржасида тола сифати бўйича
эталон-андоза сифатида қабул қилинган. Республикамизда охирги йилларда
бир қатор тезпишар, ҳосилдор, тола сифати юқори, касаллик ва
зараркунандаларга бардошли бўлган ғўза навлари яратилди ва ишлаб
чиқаришга жорий этилди. Олимларимиз кўп йиллик изланишлар натижасида
тола чиқимини 28-32 фоиздан 37-40 фоизгача, узунлигини 26-28 мм дан 33-
35 мм гача, битта кўсакдаги пахта вазнини 4-5 граммдан 6,5-9,0 граммгача
оширишга эришдилар
2
.
Дунѐда аҳолини сон жиҳатдан ошиб бориши, экин майдонларини эса
қисқариши сабабли қишлоқ хўжалик экинлар ҳосилдорлигини ва ҳосил
сифатини оширилишига алоҳида аҳамият берилмоқда. Ушбу вазифаларни
амалга оширишда сўнгги илмий ютуқларга асосланган селекциянинг янги
усулларини қўллаб, жумладан, биотехнология, биокимѐвий ва молекуляр
маркерларга асосланган селекция ѐрдамида янги навларни яратиш жараѐни
икки-уч мартагача қисқартирилади.
Ўзбекистон Республикасининг «Селекция ютуқлари тўғрисида»ги ва
«Уруғчилик
тўғрисида»ги
Қонунлари,
Ўзбекистон
Республикаси
Президентининг 2015 йил 29 декабрдаги ПҚ-2460-сон «2016-2020 йилларда
қишлоқ хўжалигини янада ислоҳ қилиш ва ривожлантириш чора-тадбирлари
тўғрисида»ги, 2016 йил 1 февралдаги «Ғўза навларини жойлаштириш ва
пахта ҳосили етиштиришнинг прогноз ҳажмлари тўғрисида»ги қарорлари,
Вазирлар Маҳкамасининг 1996 йил 19 сентябрдаги «Ўзбекистон
Республикаси Ҳукуматининг уруғчилик соҳасидаги сиѐсати тўғрисида»ги
қарори
ҳамда
бошқа
меъѐрий-ҳуқуқий
ҳужжатларда
белгиланган
вазифаларни амалга оширишга ушбу диссертация тадқиқоти муайян
1
http://www.hlopok.info/, https://rns.online/economy/
2
«Пахтачилик маълумотномаси”, 2016.
5
даражада хизмат қилади.
Тадқиқотнинг республика фан ва технологиялар ривожланишининг
устувор йўналишларига мослиги.
Мазкур диссертация тадқиқоти
республика фан ва технологиялар ривожланишининг V. «Қишлоқ хўжалиги,
биотехнология, экология ва атроф-муҳит муҳофазаси» устувор йўналиши
доирасида бажарилган.
Диссертация мавзуси бўйича хорижий илмий-тадқиқотлар шарҳи.
Янги селекцион услубларини қўллаб, ташқи муҳитнинг турли экстремал
омилларига чидамли ғўза навларини яратиш бўйича илмий изланишлар
етакчи ҳорижий илмий марказлар ва олий таълим муассасалари, жумладан,
Agricultural Research for Development - CIRAD (Франция), United States
Department of Agriculture (USDA), Agricultural Research Service (ARS),
University of Texas (АҚШ), Institute for Cotton Research of Chines Academy of
Agricultural Sciences (Хитой), CSIRO-Commonwealth Scientific and Industrial
Research Organization (Австралия), Central Institute for Сotton Research
(Ҳиндистон),
Monsanto Company (АҚШ)
3
,
Қозоғистон пахтачилик илмий
тадқиқот институти (Қозоғистон), Пахта селекцияси, уруғчилиги ва
етиштириш агротехнологиялари илмий-тадқиқот институти (Ўзбекистон)да
олиб борилган.
Ташқи муҳитнинг айрим экстремал омилларга бардошли навлар
селекциясига оид олиб борилган тадқиқотлар натижасида қатор, жумладан,
қуйидаги илмий натижалар олинган: вилт касаллиги билан боғлиқ бир нечта
ДНК маркерлари аниқланган (California University, АҚШ); вилтга чидамли
ғўза навларини яратишда МАСнинг ДНК усуллари қўлланилиб, янги навлар
яратилган (United States Department of Agriculture, Agriculture Research
Service); айрим қимматли-хўжалик белгиларни белгиловчи оқсил маркерлари
аниқланган (Central Institute for Сotton Research); генотипи ўзгартирилган (ген
модифицирланган) ўсимликлар яратилган (
Monsanto Company);
ташқи
муҳитнинг айрим экстремал омилларига чидамли бўлган ғўза навлари
яратилган (Commonwealth Scientific and Industrial Research Organization);
ғўзани тезпишар, тола сифати юқори ва Fusarium вилтига чидамли навлар
яратилган (Agricultural Research for Development, Institute for Cotton Research
of Chines Academy of Agricultural Sciences); ѐввойи ва ярим ѐввойи
намуналардан фойдаланиб ғўза навлари яратилган (Texas A&M University,
Америка Қўшма Штатлари Қишлоқ хўжалик Департаменти).
Дунѐда ғўза селекциясида пахта ҳосилдорлиги ва тола чиқими юқори,
қимматли хўжалик белгиларга эга, турли экстремал омилларга бардошли
бўлган навлар яратиш бўйича қуйидаги устувор йўналишларда тадқиқотлар
олиб борилмоқда: селекциянинг янги, жумладан, биотехнология, ҳужайра
селекцияси, ген муҳандислиги каби усулларини қўллаб янги навларни
яратиш, ҳар хил хромосомаларга эга бўлган ўсимликларни узоқ
3
http://www.cirad.fr/en, https://www.usda.gov/, https://www.ars.usda.gov/, https://www.utexas.edu/,
https://www.caas.cn/en/administration/research_institutes/, https://www.csiro.au/, www.cicr.org.in/,
www.monsanto.com/
6
дурагайлашида номутаносибликни бартараф этиш, навларда қимматли
хўжалик белгиларини белгиловчи маркерларни аниқлаш.
Муаммонинг ўрганилганлик даражаси.
Ўзбекистонда ғўза бўйича
жуда кенг миқѐсдаги селекция ишлари Пахта селекцияси, уруғчилиги ва
етиштириш агротехнологиялари ИТИ, ЎзР ФА Генетика ва ўсимликлар
экспериментал биологияси институти, Геномика ва биоинформатика маркази
ва бошқа шу каби ташкилот ва муассасаларда олиб борилмоқда. Қишлоқ
хўжалик экинлари Давлат реестрига 20 дан ортиқ ғўза навлари киритилган
бўлиб, уларнинг кўпчилиги селекциянинг классик усуллари билан яратилган.
Ноанъанавий усулларни қўллаш эса керакли белгиларга эга бўлган навларни
қисқа муддатларда яратишга имкон беради. Ғўза селекциясида биотехнология
муаммоларига А.А.Абдукаримов ва бошқ., И.Абдурахманов, С.А.Джатаев,
А.Р.Азизходжаев, С.В.Лев ва бошқ., А.Э.Эргашев ва бошқа
кўплаб
олимларнинг ишлари бағишланган.
Ғўзанинг
G. hirsutum
L. турига мансуб
V.dahliae
ва
F.oxysporum
касалликларни қўзғатувчиларига бардошлилиги бўйича Н.Г.Запрометов,
Р.Г.Ким, А.Марупов, В.А.Автономов ва бошқа кўплаб олимларнинг
мақолаларида ҳамда А.Б.Амантурдиев ва Р.Г.Ким монографиясида ѐритилган.
Лекин, турли сабабларга кўра, ғўза ўсимликлари касалланишининг кучайиши
ва патогенларнинг янги ирқларининг пайдо бўлиши селекционерлар олдига
вилтга мажмуавий бардошли, қимматли
хўжалик белгилар мажмуасига эга бўлган янги навларни қисқа муддатларда
яратиш ва амалиѐтга жорий этиш масаласини қўймоқда.
Ушбу муаммони молекуляр ва биокимѐвий маркерларни қўллаб ечиш
мумкинлиги А.П.Ибрагимов, С.Р.Рахманкулов, Д.А.Хашимов, Р.К.Шадманов,
Ш.Юнусханов ва бошқа олимлар изланишларида ѐритилган. Лекин, аксарият
илмий манбалар бошқа экинларда молекуляр ва биокимѐвий маркерларни
ўрганишга бағишланган.
Юқоридагилардан кўриниб турибдики, нафақат республикамизда, балки
чел элда ҳам ушбу муаммо ҳали етарлича ўрганилмаган.
Диссертация мавзусининг диссертация бажарилган илмий-тадқиқот
муассасасининг илмий-тадқиқот ишлари режалари билан боғлиқлиги.
Диссертация тадқиқоти Тошкент давлат аграр университети ва Пахта
селекцияси, уруғчилиги ва етиштириш агротехнологиялари илмий-тадқиқот
институтининг илмий-тадқиқот ишлари режасининг П-17.59-рақамли
«Ғўзанинг қимматли хўжалик белгилари мажмуасига эга бўлган истиқболли
тизмаларини такомиллаштириш ҳамда Давлат нав синовига ва ишлаб
чиқаришда кўпайтиришга бериш» (2003-2005 йй.), АҚШни Қишлоқ хўжалик
Департаментининг Section-416 2S-рақамли «Ғўзанинг 4 та янги тизмаларини
такомиллаштириш ва кўпайтириш ҳамда хлоридли шўрланишга
бардошлилигига баҳо бериш (Л-1, Л-2, Л-3, Л-4)» (2005-2006 йй.), А-11-109-
рақамли «Ғўзанинг илгари яратилган юқори мойли тизмалари асосида юқори
тола чиқими, сифати жаҳон бозори андозалари талабларига жавоб берадиган
янги навини яратиш ва ДНС га топшириш» (2006-2008 йй.), ҚХА-9-045-
7
рақамли «Ғўзанинг шўрга чидамли, серҳосил «Умид» навини ва янги
тизмаларининг (Л-5, Л-6, Л-7, Л-13) навдорлигини яхшилаш ҳамда Давлат
нав синовига тошириш» (2009-2011 йй.), ҚХА-9-049-рақамли «Ғўзанинг
ҳосилдор, тола сифати ва чигит таркибида ѐғ миқдори (20-22 %) юқори,
вилтга бардошли тизмаларини меъѐрига етказиб, Давлат нав синовига
топшириш» (2009-2011 йй.), КХФ-5-029-рақамли «Серҳосил, тезпишар,
вертицеллез ва фузариоз вилтга комплекс бардошли трансгрессив ғўза
навлари ва тизмаларини яратиш услубини биокимѐвий ва молекуляр тестлар
асосида ишлаб чиқиш» (2012-2016 йй.) илмий лойиҳалар доирасида амалга
оширилган.
Тадқиқотнинг мақсади
ғўза каллус ҳужайраларига NaCI лик селектив
озуқалар таъсирини ўрганиш, селекциянинг ноанъанавий усуллар ѐрдамида
амфидиплоидларни олиш, молекуляр тестлардан фойдаланиб нисбатан
гомозигот оила ва тизмаларни аниқлаш ҳамда тезпишар, қимматли-хўжалик
белгилар мажмуасига эга бўлган тизма ва навларни яратишдан иборат.
Тадқиқотнинг вазифалари:
ғўза тўқималаридан каллус ҳужайраларни интенсив ўстириш учун
агарли озуқада фитогормонлар мақбул меъѐрларини танлаш ва
in vitrо
шароитида соматик эмбриоидогенезни олиб бориш;
ғўза каллус ҳужайраларининг ўсиши ва ривожланишига селектив
озуқалардаги хлоридли шўрланишнинг турли миқдорлар таъсирини аниқлаш;
NaCl лик шўрланиш бўйича стресс омилларга ҳужайраларнинг чидамлилик
даражасини аниқлаш;
ғўза амфидиплоидлари ва уларнинг беккросс-авлодларини олиш ҳамда
уларнинг авлодларида қимматли-хўжалик белгилар ҳамда толанинг
технологик кўрсаткичларини аниқлаш;
бир хиллик, тезпишарлик ва вилтга чидамлилик бўйича молекуляр
маркерларни аниқлаш;
Verticillium dahliae
Kleb. ва
Fusarium oxysporum
f. sp
. vasinfectum
(Atk.)
Snyder et. Hansen
замбуруғларининг вирулент патогенлари билан инокуляция
қилиш орқали ўсимликларнинг бардошлилигини аниқлаш;
селекциянинг янги усулларини қўллаб қимматли-хўжалик белгилар
мажмуасига эга бўлган, тезпишар, вилтга чидамли нав ва тизмаларни яратиш.
Тадқиқотнинг объекти
сифатида америка селекциясининг Coker-312 ва
маҳаллий С-6524, С-4727 навларидан ҳамда беккросс дурагайларидан
фойдаланилди. Амфидиплоидлар ва уларни беккросс авлодлари узоқ, ҳар хил
хромосомалар тўпламига эга бўлган тетраплоид ва диплоид турлар орасида
олинди. Мураккаб беккросс дурагайларни олишда Омад, С-6530, С-8284
навлари ҳамда Т-030, ТS-485, ТS-489, ТS-6592, ТS-6593, ТS-6594, ТS-6595,
ТS-6596, ТS-6598, ТS-484 тизмалари иштирок этди.
Тадқиқотнинг предмети
селекцион манбаларни
in vitro
шароитида
шўрланишга бардошлилигини аниқлаш, ғўза амфидиплоидлар ва уларнинг
беккросс-авлодларини олиш; молекуляр тестлар асосида бошланғич
авлодларда гомозигот, трансгрессив генотипларни аниқлаш; ўсимликларни
8
V.dahliae
Kleb. ва
F.oxysporum
замбуруғларнинг ирқлари билан инокуляция
қилиш асосида навлар, тизмалар, оилалар, дурагайларни вилтга мажмуавий
бардошлилигининг генетик табиатини аниқлашдан иборат.
Тадқиқотнинг усуллари
. Дала ва лаборатория тажрибалари умум қабул
қилинган селекция ишлари ва агротехника услублари, адаптив генотипларни
танлаш Генетика ва ўсимликлар экспериментал биологияси институтининг
Амалий биокимѐ лабораториясида ишлаб чиқилган технология асосида оқсил
ва ферментларни ПААГда электрофоретик таҳлил усуллари, ўсимликлар
касаллинишини ҳисобга олиш ҳар бир касаллик учун умум қабул қилинган
услуби, маълумотларнинг статистик таҳлили Б.А.Доспехов усулидан
фойдаланилган. Тола сифати HVI ускунасида аниқланди.
Тадқиқотнинг илмий янгилиги
қуйидагилардан иборат:
NaCl лик селектив озуқаларда ҳужайра селекцияси олиб борилиб,
лабораторияда
in vitro
шароитида селекцион материални хлоридли
шўрланишга чидамлилигини баҳолашнинг услуби ишлаб чиқилган;
эмбриокультура усули орқали амфидиплоидларни олиш схемаси ишлаб
чиқилган;
ҳар хил хромосомали
G. hirsutum
L.,
G. raimondii
Ulbr.,
G. thurberi
Tod.,
G. anomalum
Waw.,
G. sturtii
F.Muell.,
G. davidsonii
Kell.,
G. harknessii
Brand.
турлар орасида амфидиплоидлар ва уларнинг беккросс авлодлари
G. sturtii
F.Muell.,
G. raimondii
Ulbr.,
G. harknessii
Brand.,
G. aridum
Skov.,
G. triphyllum
Horch. турлар иштирокида яратилган;
молекуляр маркерлар асосида, тезпишар, вилтга бардошли ва генотипик
бир хил бўлган ғўзанинг оила ва тизмалари яратилган;
V.dahliae
ва
F.oxysporum
вилт патогенларининг изолятлари билан
ўсимликларни инокуляция қилиш асосида тезпишар, юқори ҳосилдор, вилт
билан зарарланишга мажмуавий бардошли янги ғўза тизмалари яратилган.
Тадқиқотнинг амалий натижалари
қуйидагилардан иборат: NaCl лик
селектив озуқада ғўза ҳужайралар селекцияси олиб бориш натижасида
лаборатория шароитида селекцион манбаларнинг шўрланишга чидамлигини
аниқлаш услуби ҳамда ҳужайра селекциясини тадқиқ этиш натижасида
олинган, илдизи қорайган ўсимталарни пробиркадан тупроққа ўтказиш усули
ишлаб чиқилган;
тупроққа экишдан олдин 0,05-0,1 фоизли колхицин эритмасида 1-2
соатга ўсимталар илдизларининг ивитиш усулини қўллаш натижасида F
1
108-
Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. raimondii
Ulbr., F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. sturtii
F.Muell гексаплоидли амфидиплоидлар олинган ва ғўзанинг маданий ҳамда
ѐввойи шакллари иштирокида амфидиплоидлар ва уларнинг беккросс
авлодларини олиш услуби ишлаб чиқилган;
амфидиплоидларнинг беккросс авлодлари орасидан ўзида нафақат
юқори вилтга бардошлиликни, балки серҳосил, тезпишар ва тола чиқими
ҳамда сифати бўйича яхши кўрсаткичларни ўзида мужассамлаган энг
қимматли шакллар аниқланиб, тизма ҳолатига етказилган;
молекуляр тестлардан фойдаланиш орқали ғўзанинг гомозигот
9
трансгрессив оила ва тизмалар аниқланган;
ўсимликларни инокуляция қилиш асосида
V.dahliae
Kleb. ва
F.oxysporum
патогенларига бардошли ғўзанинг янги оила ва тизмалари аниқланган ҳамда
селекциянинг янги усулларини қўллаш асосида тезпишар, серҳосил, тола
сифати юқори, вилт патогенларига мажмуавий бардошли, қимматли-хўжалик
белгилар мажмуасига эга бўлган янги нав ва тизмалар яратилган.
Тадқиқот натижаларининг ишончлилиги
дала тажрибаларининг ҳар
йилги
апробациядан
ўтказилганлиги
ва бирламчи ҳужжатларнинг
мавжудлиги; назарий ва амалий натижаларининг бир-бирига мослиги; илмий
тадқиқотлар
натижаларининг
республика,
халқаро
илмий-амалий
анжуманларда муҳокамаси ҳамда Ўзбекистон Республикаси Вазирлар
Маҳкамаси ҳузуридаги Олий Аттестация Комиссияси рўйхатидаги илмий
нашрларда чоп этилиши; дала ва лаборатория тажрибалари натижасида
олинган маълумотлар замонавий компьютер технологиялардан фойдаланган
ҳолда статистик таҳлилдан ўтказилганлиги билан асосланган.
Тадқиқот натижаларининг илмий ва амалий аҳамияти.
Тадқиқот
натижаларининг илмий аҳамияти шўрга чидамли ҳужайра тизмалари
ажратиб олинган ва лаборатория шароитида селекцион манбаларнинг тузга
чидамлилигини аниқлаш услуби ишлаб чиқилганлиги,
in vitrо
шароитида
ғўзанинг етилмаган муртаклар экмаси ѐрдамида олинган, пробиркада
ўстирилган ўсимликларни ерга ўтқазиш усули, ғўза амфидиплоидлари ва
уларнинг беккросс авлодларини олиш схемаси ишлаб чиқилганлиги билан
исботланади.
Тадқиқот натижаларининг амалий аҳамияти биокимѐвий маркерлар
асосида, ғўзанинг тезпишар, вилтга бардошли ва генотипик нисбатан бир хил
оилалар ва тизмалар яратилган, ўрганилган тизмалар, оилалар ва мураккаб
беккросс дурагайларда вилтга бардошлилик, тезпишарлик ва морфобиологик
белгилар бўйича бир хиллик аниқланган, тезпишар,
V.dahliae
ва
F.oxysporum
вилт патогенларига юқори бардошлилигига ҳамда қимматли-хўжалик
белгилар мажмуасига эга бўлган тизмалар яратилган.
Тадқиқот натижаларининг жорий қилиниши.
Ғўза селекцияси ва
уруғчилиги бўйича илмий-тадқиқотлар натижалари асосида:
қимматли-хўжалик белгилар мажмуасига эга бўлган Истиқлол-14,
Истиқлол-13, Манғит-1, Манғит-2, С-2118, С-2119 ғўза навлари яратилган.
Истиқлол-14 ғўза нави 2013 йилдан Андижон вилояти бўйича истиқболли
деб топилган ва 2016 йилдан ушбу вилоятга районлашган ва 680 гектар
майдонга экилган. Ушбу нав 2016 йилда Сурхондарѐ вилояти бўйича Давлат
реестрига истиқболли нав сифатида киритилиб жами 700 га ортиқ майдонга
экилган (Ўзбекистон Республикаси Қишлоқ ва сув хўжалиги вазирлигининг
15.02.2017 й., 02/20-92-сон маълумотномаси). Бунда, Андижон вилоятининг
Хўжаобод ва Улуғнор туманларидаги фермер хўжаликлари томонидан 2016
йилда Истиқлол-14 ғўза навидан ҳар гектаридан ўртача 31,0-34,0 центнердан
ҳосил олиниб, рентабеллик даражаси 16-20 % ташкил қилган; Манғит-1 ғўза
нави 2015 йилда Қорақалпоғистон Республикаси Амударѐ
10
туманида 257 гектар майдонда экилди (Ўзбекистон Республикаси Қишлоқ ва
сув хўжалиги вазирлигининг 15.02.2017 й., 02/20-92-сон маълумотномаси).
Манғит-2 ва С-2119 навлари навдорлигини аниқлаш учун 2017 йилда
грунтназоратига берилади.
Тадқиқот
натижаларининг
апробацияси.
Мазкур
тадқиқот
натижалари 26 та, жумладан 17 та халқаро ва 9 та республика илмий-амалий
анжуманларида муҳокамадан ўтказилган.
Тадқиқот натижаларининг эълон қилинганлиги.
Диссертация
мавзуси бўйича жами 38 та илмий иш, шулардан, Ўзбекистон Республикаси
Олий аттестация комиссиясининг докторлик диссертациялари асосий илмий
натижаларини чоп этиш тавсия этилган илмий нашрларда 11 та мақола,
жумладан 9 таси республика ва 2 таси хорижий журналларда нашр қилинган,
1 та монография чоп этилган ва ғўза навларига 2 та патент олинган.
Диссертациянинг тузилиши ва ҳажми.
Диссертация таркиби кириш,
олтита боб, хулоса, фойдаланилган адабиѐтлар рўйхати ва иловалардан
иборат. Диссертациянинг ҳажми 196 бетни ташкил этган.
ДИССЕРТАЦИЯНИНГ АСОСИЙ МАЗМУНИ
Кириш
қисмида диссертация ишининг долзарблиги ва зарурияти
асосланган,
унинг
мавзуси
Ўзбекистон
Республикаси
фан
ва
технологияларнинг устувор йўналишларига мослиги ѐритилган, мавзу бўйича
халқаро илмий тадқиқотлар шарҳи ва муаммонинг ўрганилганлик даражаси
келтирилган, диссертация изланишларининг илмий тадқиқот ишлар
режалари билан боғлиқлиги кўрсатилган, тадқиқот мақсади ва вазифалари
шакллантирилган, тадқиқот объекти, предмети, усуллари, илмий янгилиги,
амалий натижалар ва уларнинг ишончлилиги, тадқиқот натижаларининг
назарий ва амалий аҳамияти ва уларнинг ишлаб чиқаришга жорий этилиши
келтирилган, ишнинг апробацияси ва натижаларининг чоп этилганлиги
ҳамда диссертациянинг ҳажми ва қисқача таркиби баѐн этилган.
Диссертациянинг
«Селекциянинг янги усуллари бўйича илмий
тадқиқотлар шарҳи»
деб номланган биринчи бобида сомаклонал
ўзгарувчанлик, соматик эмбриогенез, тўқима ва ҳужайралар
in vitro
экмаси,
протопластлар қўшилиш йўли билан соматик ҳужайраларни дурагайлаш,
ўсимлик ҳужайраларига генларни ўтказиш, ҳужайра даражасидаги мутагенез
ва селекция каби биотехнологик усуллар баѐн этилган. Биотехнологиядаги
тараққиѐт кўп ҳолларда донли экинларда эришилгани, ғўзада эса унинг
усуллари
етарли
даражада
ишлаб
чиқилмаганлиги
кўрсатилган.
Селекциянинг усулларидан бири бўлмиш полиплоидиянинг аҳамияти, турли
усуллар билан амфидиплоидларни олиш тўғрисида маълумотлар берилган.
Мавжуд навлар ва намуналар ўз генетик потенциалини деярли тугатишгани
сабабли, селекция жараѐнига янги генотипларни киритиш зарурияти долзарб
муаммо ҳисобланиши таъкидланган. Шу муносабат билан ѐввойи ва рудерал
шаклларни ўрганиш, улардан бошланғич манба сифатида энг
11
истиқболлиларини аниқлаш ва амалий селекцияда қўллаш бўйича чуқур
изланишларни олиб бориш талаб этилиши кўрсатилган. Янги навларни
яратишда ҳамда мавжуд навларнинг нав тозалигини сақлашда маркер
тестларни қўллаш масалалари ѐритиб берилган. Ушбу усул селекциянинг
бошланғич босқичида у ѐки бу белгиларни генетик даражасида аниқлаш
ҳамда селекцион жараѐнини икки-уч бараварга қисқартириш имконини
беришлиги баѐн этилган.
Диссертациянинг
«Тадқиқотларни ўтказиш шароити, объектлари ва
услублари»
деб номланган иккинчи бобида тадқиқотларни ўтказиш
шароити, объекти ва услублари келтирилган бўлиб, унда изланишлар Пахта
селекцияси, уруғчилиги ва етиштириш агротехнологиялари илмий-тадқиқот
институтида бажарилганлиги баѐн этилган. Худуднинг метеорологик
шароитлари кескин континентал иқлимга хос ва булутсиз об-ҳаво билан
таърифланиб, қуѐш нурларининг юқори жадаллиги ва ѐғингарчилик миқдори
камлигини (йиллига ўртача 360 мм, кўпинча куз-қиш-баҳор фаслларида
ѐғади) таъминлайди.
Ҳужайра селекциясини ўтказиш учун изланишлар объекти сифатда
Coker-312 америка ғўза нави ва маҳаллий С-4727 ва С-6524 навлари
танланди. Беккросс дурагайларни олиш учун бошланғич манбалар сифатида
дурагайлашга
G. tomentosum
ѐввоий тури, Acala sj-5 америка нави, Омад,
Наманган-77, С-8284, С-6771, С-6530, С-8288 маҳаллий навлар ҳамда
G.
hirsutum
L. турига мансуб яратилган ғўза тизмалари жалб этилган.
Ҳужайра селекцияси бўйича лаборатория тадқиқотлари ламинар
бокснинг асептик шароитларда ҳамда тебратгичларда факторостат хонада 16
соатлик 2000-3000 люкс ѐруғлигида олиб борилди.
Адаптив генотипларни танлаш ишлари уруғлик материалда, олдиндан
маркерланган белгилар бўйича олиб борилди. Маркерлар сифатида белгини
намоѐн бўлиши билан тўғридан-тўғри ѐки билвосита боғланган айрим
оқсиллар ва фермент системалар хизмат қилди. Таҳлиллар учун чигитларни
микропиляр томонидан олинган муртак (генотип)ларининг жуда оз
миқдорларидан фойдаланилган бўлиб, маркерли ферментларни аниқлаш
учун улар биокимѐвий таҳлиллардан ўтказилди. Биокимѐвий сифатида
ПААГдаги оқсил ва ферментларни электрофоретик таҳлил усуллардан
фойдаланилди.
V.dahliae
Kleb. ва
F.oxysporum
изолятларига чидамлилигини аниқлаш
учун шоналаш фазаси бошида моноспорали суспензия билан ўсимликнинг
илдиз ўзагига инокуляция қилинди. Инокуляциядан кейин ғўзанинг
баргларида касалликнинг намоѐн бўлиши борасида органолептик усулда
кузатувлар олиб борилди.
Диссертациянинг
«Ғўза ҳужайралари селекцияси»
деб номланган
учинчи бобида каллусогенез ва соматик эмбриоидогенез ҳамда NaCl лик
селектив озуқада ўстирилаѐтган ғўза ҳужайраларининг биологияси
келтирилган.
Ғўзада каллусогенез ва соматик эмбриоидогенез
.
12
Каллус ҳужайраларни олиш учун гипокотил қисмидан фойдаланилди ва
у илдиз ўзагидан бошлаб то ўсимликнинг эпикотил қисмигача 5-8 мм
узунликдаги бўлакчаларга бўлинди. Эксплантларни олишда барча ғўза
генотиплари учун бир хил шароитлар яратилди.
Изланишлар шуни кўрсатдики, МС озуқасида цитокинин Дропнинг ҳам
ўзи ҳам ауксинлар билан биргаликда ҳамда 2 мг/л НУК ва 1 мг/л кинетин
фитогормонлари қўшилган вариантда маҳаллий ва америка навларининг
гипокотилидан каллусогенезни индукцияланиши бўйича яхши натижалар
олинди. Озуқада ушбу фитогормонлар концентрациясининг камайиши каллус
ҳужайраларнинг ўсиш тезлигининг сусайтириши аниқланди.
Coker-312 навида соматик эмбриоидогенезни олиш учун суспензион
озуқада ўстиришнинг оралиқлари узунроқ бўлган Trolinder N. схемасидан
фойдаланилди. Coker-312 навининг гипокотил қисми 6-8 мм узунликдаги
бўлакчаларга кесилиб, Б-5 Гамборг бўйича витаминлар ҳамда 2,4-Д, кинетин
ва НУК билан тўлдирилган МС озуқасига экилди. Каллус ҳужайралар
озуқага 0,1 мг/л 2,4-Д ва 0,1 мг/л 2,4-Д + 0,1 мг/л НУК қўшилган
вариантларида яхши индуцирланди.
Соматик эмбриоидларни олиш бўйича субкультуранинг иккинчи
босқичи МС озуқасида экзоген фитогормонлар иштирокисиз олиб борилди.
Бунда каллус ҳужайралар яхши ўсди, турли шаклларга, гуваласимон
тузилишга, оч жигарранг тусга эга бўлди, ўстиришнинг 10-12 кунидан
бошлаб эса илдизча ва уруғкуртак баргларга дифференцирланмаган майда
соматик эмбриоидлар (30-35 %) пайдо бўлди. Дифференциация пайтидан
бошлаб 50 % дан ортиқ соматик эмбриоидларда уруғкуртакга ўхшаш барглар
ва илдизча шаклланиши бошланди.
1-жадвал
Соматик эмбриоидларни морфологик таснифи
Эмбриоид
ларнинг
ривожлани
ш
босқичлари
Оғи
р
лиг
и,
мг
Эмбриоидлар ўлчами
Узунлиги
Эни
Тебра
ниш
че
гарас
и, мм
Ўртач
а, мм
CV
Тебра
ниш
че
гарас
и, мм
Ўртач
а, мм
C
V
1. Глобуляр
2,11 0,55-0,9
7
0,76±0,0
4
17 0,65-0,87 0,74±0,0
4
17
2. Юраксимон
5,43
4
7
20
6
19
3. Лотос
11,12
4
9
22
5
18
4. Ўқ
аъзоларига
дифферен
цирланган
19,70
3
23
9 22
Соматик эмбриоидларнинг мустақиллиги ўрганилганда уларнинг ҳар
хил дифференциацияланиши кузатилди: турли ўлчамларга эга бўлган
13
глобуляр,
юраксимон,
тожсимон
уруғкуртакга
ўхшаш
баргларга
дифференцирланган (“лотос” деб номланган) ва уруғкуртак баргларга ва
илдизчага дифференцирланган.
Изланишларимизда
дифференцирланган
соматик
эмбриоиднинг
узунлиги 2,5 мм дан 4,2 мм гача бўлди. Шунда етилган эмбриоиднинг
оғирлиги ўртача 19,70 мг ни ташкил қилди (1-жадвал).
Торпеда кўринишида илдизча билан дўнгчасимон уруғкуртак баргларни
шакллантирган эмбриоидлар сунъий озуқада ўсишга ўтган. Лотос
босқичидаги эмбриоидлардан олинган ўсимликлар бир ойдан кейин 1,2-1,8
см ўлчамга етган. Ўқ аъзоларига дифференцирланган эмбриоидлар
гормонларсиз озуқада ўсишга осонлик билан ўтган ва 30-35 кун ўстиришдан
кейин тожсимон уруғкуртак баргларда яхши шаклланган барглар билан
ўсимликнинг нормал эпикотил қисми ҳосил бўлди. Бир ой давомида
ўстирилганда ўсимликлар 2,4-4,0 см катталикка етган. Лекин, сунъий озуқада
ўсиш давомида илдизлар аста-секин қорайиб борган. Азизходжаев А.Р.
фикрича бу, эҳтимол ғўза ўсимталарининг илдизларидан номаълум
элементларни
чиқариш
ҳисобига
озуқа
моддаларнинг
таркибий
қисмларининг оксидланиши билан боғлиқ. Изланишлар жараѐнида қорайган
илдизли ўсимликларни пробиркадан ерга ўтказиш услуби ишлаб чиқилди.
NaCl лик селектив озуқада ўстирилаётган ғўза ҳужайраларнинг
биологияси.
NaCl нинг концентрацияси турлича бўлган (0,2 % дан 3,0 % гача)
суспензион озуқада каллус ҳужайралар ўстирилганда ҳужайраларнинг ташқи
кўриниши ҳар хил бўлиб, шўрланиш концентрацияси кўпайган сари
уларнинг миқдори камайиб борган. Ҳужайралар морфологияси ўрганилганда
кўпинча овал шаклидагилар кузатилган (48-57 %). Озуқада NaCl
концентрациясининг
кўпайиши
эса
ҳужайралар
ривожланишини
сусайтиради, оқибатда узунчоқ ҳужайралар сони аста-секин қисқариб,
юмалоқларининг миқдори ошиб боради. Шўрланган озуқаларда, 0,2 % NaCl
лик озуқадан ташқари, энг катта ҳужайралар кузатилмади.
Шунга ўхшаш кўриниш ҳужайралар ўлчами ўрганганилганда ҳам
кузатилди, яъни озуқада шўрнинг концентрацияси кўпайиши уларнинг
ўлчамларига салбий таъсир кўрсатди. Бунда, деярли барча озуқаларда кичик
ўлчамли ҳужайралар сони бошқаларга нисбатан кўпроқ бўлди (3,0 % NaCl
қўшилган озуқадан ташқари). NaCl концентрацияси ортиши билан озуқада
жуда кичик ҳужайралар сони аста-секин кўпайиб борган. Бу ўрта ва катта
ўлчамли ҳужайралар сонининг камайиши ҳисобига содир бўлди. Жуда катта
ҳужайралар фақат 0,4 % гача NaCl қўшилган озуқаларда учраган (1-расм).
Изланишлар озуқада NaCl миқдори 3 % бўлганда ғўза каллус
ҳужайралар билан селекцион ишларни олиб бориш мумкин эмаслигини
кўрсатди. 1,0; 1,4 ва 2,0 % NaCl га бардошли ҳужайраларни
фитогормонларсиз, витаминлар билан бойитилган МС агарли озуқасига
экилганда шўрланган шароитларда ўстирилган ушбу ҳужайралар NaCl сиз
озуқага ўтказилганда ўзининг нормал морфологик ҳолатига қайтиши
14
кузатилди.
1-расм. Турли ўлчамдаги ҳужайралар сони
Диссертациянинг
«Селекциянинг ноанъанавий усуллар ѐрдамида
ғўза амфидиплоидларини олиш»
деб номланган тўртинчи бобида
селекциянинг ноанъанавий усулларида ғўза амфидиплоидларини олиш
масалалари ѐритилган. Изланишлар асосида, 0,05-0,1 % лик колхицин
эритмаси билан 5-6 кун давомида 4-6 мартадан ўсимликлар ўсиш нуқтасини
таъсир
қилиш усули муваффақиятсиз деб топилиб, триплоидли
дурагайларнинг полиплоидланган шохларини олишга эриша олмадик.
Экзоген фитогормонлар ѐрдамида олинган амфидиплоидларнинг чигитлари
сувда ивитилиб, 2 суткадан кейин ўсимталар 0,05-0,1 % лик колхицинли
эритмаларига 12, 24, 30, 36, 48, 56, 68, 76 соатларда ўтказилди, сўнг эса
қоғозли стаканчиклардаги тупроқга экилди ва 5-7 суткага йўғонлашган, калта
гипокотилли ўсимталар олинди.
Ўрганилган вариантлар ичида тупроққа экишдан олдин фақат 0,05-0,1%
лик колхицин эритмасида 1-2 соатга ўсимталар илдизчалари ивитилган
вариантларида олинган ўсимликларни сақлаб қолишга эришилди. Ушбу йўл
билан F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. raimondii
Ulbr., F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G.
sturtii
F.Muell
гексаплоидли
амфидиплоидлар
олинди.
Ушбу
амфидиплоидлар С-6524 ва С-4727 навлари билан беккросс қилинганда
нормал ривожланган кўсакларни сақлаб қолиш учун чанглангандан кейин 2
суткада муртакларга экзоген фитогормонлар ѐрдамида таъсир этилди (2-
жадвал).
Экзоген фитогормонларни қўллаб,
G. hirsutum
L. турига мансуб навлар
билан амфидиплоидларни беккросс қилинганда аксарият чатиштирилган
кўсаклар сақланиб қолиниши аниқланган. Ушбу кўсаклар эса, кўпинча
шаклланган дурагай муртакларга эга. Улар 3-4 мм ўлчамдаги яхши
дифференцирланган ўқли аъзоларга эга. Лекин, эндоспермнинг ривожланиши
кузатилмади, шу сабабли ушбу муртаклар сунъий озуқада
in vitrо
шароитида
15
2-жадвал
Ғўза дурагай муртакларининг дифференциацияланишига
фитогормонларнинг таъсири
Дурагай
комбинация
Вариан
т
Чати
ш
тири
ш
сони,
дона
Сақла
н ган
кўсакл
ар
сони,
дона
Диффере
н
цирланга
н
муртакла
р билан
кўсакла
р сони,
дона
1 та
кўсакдаги
муртаклар
сони, дона
теб
ра
ни
ш
чега
раси
ўртача
С-6524 х F
1
С
6524 х
G.
sturtii
F.Muell.
Назорат 109
4
-
-
-
Тажриба
118
105
95
3-11
5
С-4727 х F
1
С
6524 х
G.
sturtii
F.Muell.
Назорат 130
1
-
-
-
Тажриба 172
147
139
2-9
5
С-6524 х
F
1
108- Ф х
G.
raimondii
Ulbr.
Назорат 107
3
-
-
-
Тажриба 139
87
81
3-7
5
С-4727 х
F
1
108- Ф х
G.
raimondii
Ulbr.
Назорат
94
2
-
-
-
Тажриба
111
90
79
4-8
5
С-6524 х
G.
bickii
Prok.
Назорат
50
-
-
-
-
Тажриба
85
76
-
-
-
С-6524 х
G.
davidsonii
Kell.
Назорат 225
-
-
-
-
Тажриба 195
154
136
1-6
3
С-4727 х
G.
davidsonii
Kell.
Назорат 205
2
-
-
-
Тажриба 218
188
160
1-6
3
С-6524 х
G.
Назорат 110
3
-
-
-
klotzschianu
m
Anderss
Тажриба 151
114
90
2-8
4
С-4727 х
G.
klotzschianu
m
Anderss
Назорат
71
2
-
-
-
Тажриба
90
87
69
2-6
5
С-6524 х
G.
australe
F.Muell
Назорат
79
1
-
-
-
Тажриба
97
78
1
1
1
Изоҳ:
Тажриба – фитогормонлар билан таъсир этилган чангланишдан кейин 2 кунлик
муртаклар; 5 устунда
G. hirsutum
L. х
G. davidsonii
дурагайлашидан олинган тўлиқ
чигитлар.
ўстирилди ва F
1
BC
1
(C-6524 x F
1
108-Ф x
G. sturtii
F.Muell), F
1
BC
1
(C-4727 x
F
1
108-Ф x
G. sturtii
F.Muell), F
1
ВС
1
(С-6524 х F
1
108-Ф х
G. raimondii
Ulbr.)
16
амфидиплоидларининг гуллаган ўсимликлари олинди. Ушбу дурагайларнинг
ўзидан чанглантирилган кўсаклари тўкилиб қолаверган, лекин, С-6524 ва С
4727 навлари билан қайта бекросс қилинганда аксарият мева элементлари
сақланиб қолган.
Изланишлар
жараѐнида,
экзоген
фитогормонлар
иштирокида
амфидиплоидларни
G. hirsutum
L. турига мансуб навлар билан беккросс
қилинганда чатиштирилган кўсакларнинг асосий қисми сақланиб,
шаклланган дурагай муртакларга эга эканлиги аниқланган ҳамда ғўзанинг
амфидиплоидлари ва уларнинг беккросс авлодларини олиш схемаси
яратилиб, триплоидли амфидиплоидни: а) экзоген фитогормонлардан
фойдаланиб; б) етилмаган муртакларни
in vitrо
га экиш орқали; в)
уруғлантирилган уруғкуртакларни
in vitrо
га экиш орқали олиш мумкинлиги
кўрсатилган.
Эмбриокультура усули билан гексаплоид амфидиплоидларни маданий
турларга мансуб навлар билан биринчи марта беккросс қилинганда экзоген
фитогормонлар ўқли аъзоларга дифференцирланган етилмаган муртакларни
ҳосил бўлишига ѐрдам бериши кўрсатилган. Бундай ҳодиса F
14
G. hirsutum
L. x
G. aridum
Skov., F
1
G. hirsutum
L. х
G. raimondii
Ulbr.
,
F
1
G. hirsutum
L. x
G.
sturtii
F.Muell. ва F
1
G. hirsutum
L. x
G. anomalum
Waw., F
12
G. hirsutum
L. x
G.
triphyllum
Horch. амфидиплоидларини беккросс қилишда кузатилди. Ушбу
амфидиплоидларнинг биринчи беккросс авлоди эмбриокультура усули
орқали олинган бўлиб, иккинчи ва учинчи беккросс авлоди эса эркин
чатиштириш йўли билан олинди.
Олиб борилган тадқиқотлар натижасида вилт билан умумий даражада 2
% га касалланган F
1
ВС
4
С-6524 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(108-Ф
х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) ва F
1
ВС
4
Тошкент-6 х F
1
ВС
3
Тошкент-6 х
F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum x G. triphyllum)
дурагай
популяциялари ҳамда вилт билан умумий даражада 3 % га касалланган F
1
ВС
4
Тошкент-6 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(С-6524 х
G. sturtii
)
дурагай популяцияси танлаб олинди.
Тезпишарлик бўйича F
1
BС
4
Б-1 х F
1
BС
3
Тошкент-6 х F
1
BС
2
С-6524 х
F
1
BC
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum x G. triphyllum)
ва F
1
ВС
4
Тошкент-6 х F
1
ВС
3
С
6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
дурагай
комбинациялари ажралиб туриб, вегетация даври 105-112 кунга эга бўлишди.
F
2
BC
3
С-9070 х F
1
ВC
2
С-6524 х F
1
ВC
1
108-Ф х F
1
С-6524 х
G. sturtii
ва
F
2
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
(F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) х С-6524
дурагай комбинацияларида юқори тола чиқими (37,8-39,1 %) ва узунлиги
(34,4-34,5 мм) кузатилган.
Диссертациянинг
«Молекуляр маркерлар асосида ғўзанинг тизма ва
оилаларни тезпишарлик, бир хиллик ва вилтга бардошлиликга
баҳолаш»
деб номланган бешинчи боби ғўзанинг оила ва тизмаларида
асосий қимматли-хўжалик белгилар бўйича молекуляр маркерларни
аниқлашга бағишланган. Генотипларни танлаб олиш уруғлик материал
даражасида, олдиндан маркерланган белгилар бўйича олиб борилди. Чунки,
17
чигитлар
ўсимликлар
ривожланишининг
фиксацияланган
босқичи
ҳисобланади ва бўлажак организмнинг барча белгиларига эга бўлади. Бундан
ташқари, чигитлардаги оқсил ва ферментларнинг сифат тавсифлари ташқи
омилларга боғлиқ эмас.
Маркерлар биологик, 1-чи ва 2-чи йилги селекцион ҳамда кўпайтириш
кўчатзорларида аниқланган. Иккинчи расмдан кўриниб турибдики, биологик
кўчатзорда тезпишарлик, бир хиллик ва вилтга чидамлилик бўйича тегишли
равишда 79,2 %; 66,7 %; 83,3 % маркерлар аниқланган. Биринчи йилги
селекцион кўчатзорда тезпишарлик бўйича ўрганилган барча тизмаларда, бир
хиллик ва вилтга чидамлилик бўйича эса 75,0 % ва 91,7 % маркерлар
аниқланган. Иккинчи йилги селекцион кўчатзорда барча тизмаларда
тезпишарлик ва вилтга чидамлилик бўйича, 88,9 % тизмаларда эса бир
хиллик бўйича маркерлар топилган. Кўпайтириш кўчатзорида маркерлар
мавжудлигини таҳлил қилганимизда ўрганилган тизмаларнинг барчасида
юқорида кўрсатилган белгилар бўйича маркерлар кузатилди (2-расм). Бу эса,
селекция ишларининг даражаси ошиб борган сари қимматли-хўжалик
белгилар бўйича танлашнинг самараси юқори бўлишидан далолат беради.
2-расм. Ўрганилган тизмаларда молекуляр маркерларни мавжудлиги, %
(2015 й.)
Изланишлар натижалари шуни кўрсатдики, биокимѐвий маркерлар
асосида селекцион ишларни олиб бориш селекцион манбанинг генетик бир
хиллигини дастлабки авлодларда аниқлашда ѐрдам беради. Бу эса, селекция
ишларининг ҳажмини камайтиришга ҳамда ғўзанинг янги истиқболли,
18
тезпишар, вилтга бардошли ва қимматли-хўжалик белгилар мажмуасига эга
бўлган оила, тизма ва навларни яратишга имкон беради.
V.dahliae
Kleb. ва
F.oxysporum
замбуруғлар патогенлари билан
ўсимликлар инокуляция қилинганда ўрганилган тизмалар орасида
F.oxysporum
моноспорали изолятига энг бардошли Т-661, Т-554, Т-1460, Т
1306, Т-932/1018, Т-1384, Т-932 ва Т-459 тизмалари ҳамда 3-2013 оиласи
бўлиб, ушбу патоген билан 25,0 % касалланди. Ўрганилган тизмалардан Т
1460 ва Т-149/987
V.dahliae
патогени билан зарарланмаганлиги, Т-1384 ва Т
717 тизмалар эса 25 % гача касалланганлиги аниқланган. Қолган барча
тизмалар ушбу патогенига ўта мойилликни кўрсатишган (3-жадвал).
3-жадвал
Янги вирулент вилт популяцияларга тизмаларнинг чидамлилиги
(2015 й.)
№
Тизмалар
V.dahliae
, %
F.oxysporum
, %
Фенотип
бўйича
Поя
кесими
бўйича
Фенотип
бўйича
Поя
кесими
бўйича
1. 5-2011
75,0
75,0
50,0
50,0
2
.
3-2013
75,0
75,0
25,0
25,0
3
.
Т-888
75,0
75,0
50,0
50,0
4
.
Т-717
25,0
25,0
50,0
50,0
5
.
Т-661
50,0
50,0
25,0
25,0
6
.
Т-89
50,0
50,0
25,0
25,0
7
.
Т-46
75,0
75,0
50,0
50,0
8
.
Т-554
75,0
75,0
25,0
25,0
9
.
Т-1309
50,0
50,0
50,0
50,0
10
.
Т-1460
0,0
0,0
25,0
25,0
11
.
Т-1306
50,0
50,0
25,0
25,0
12
.
Т-932/1018
50,0
50,0
25,0
25,0
13
.
Т-1384
25,0
25,0
25,0
25,0
14
.
Т-2473
50,0
50,0
50,0
50,0
15
.
Т-149/987
0,0
0,0
50,0
50,0
16
.
Т-932
50,0
50,0
25,0
25,0
17
.
Т-459
50,0
50,0
25,0
25,0
Натижаларнинг таҳлили шуни кўрсатдики, ўрганилган барча вилт
патогенларига (
V.dahliae
ва
F.oxysporum
) юқори бардошлилик Т-717, Т-661,
Т-89, Т-1460, Т-1306, Т-932/1018, Т-1384, Т-149/987, Т-932 ва Т-459
тизмаларида аниқланган.
Диссертациянинг
«Тадқиқотларнинг амалий натижалари»
деб
номланган олтинчи бобда илмий-тадқиқот ишларни олиб бориш натижасида
яратилган ғўза нав ва тизмаларининг қимматли-хўжалик белгилари
келтирилган. Жумладан,
G. hirsutum
L. турига мансуб Истиқлол-13,
19
Истиқлол-14, СУ-1001, Манғит-1, Манғит-2, С-2118, С-2119, С-2120 навлари
ва бир қатор истиқболли тизмалар яратилган.
Истиқлол-13 ғўза нави синтетик селекция усули билан (Акала 1517 x С
4896) х (С-5617 х Тошкент-6) дурагай комбинациялари иштирокида ва кўп
мартали якка танлаш қўлланилиб яратилган. Ўсимлик баландлиги 100-115
см, вилт сўлишига бардошли. Тезпишарлиги – 116-121 кун, толаси IV-типга
мансуб, тола чиқиши 37-40 %, узунлиги 33,5-34,0 мм, нисбий узилиш кучи
28-29 гк/текс, ўртача узунлиги 1,17 дюйм, микронейр кўрсаткичи 4,2-4,4. Бир
дона кўсакдаги пахта вазни оғирлиги 5,5-6,0 г., 1000 дона чигит вазни 116-
122 г. Яхши агротехника қўлланилганда 40,0-46,0 ц/га ҳосил беради.
Истиқлол-14 ғўза нави синтетик селекция усули билан (Акала 1517 x С
4896) х (С-5617 х Тошкент-6) мураккаб дурагайлаш ва кўп мартали якка
танлаш усулларини қўллаб яратилган. Ўсимлик баландлиги 100-125 см, вилт
сўлишига бардошли. Тезпишарлиги – 115-117 кун, толаси IV-типга мансуб,
тола чиқими 37-38 %, узунлиги 34-35 мм, нисбий узилиш кучи 28-29 гк/текс,
ўртача узунлиги 1,20 дюйм, микронейр кўрсаткичи 3,9-4,4. Бир дона
кўсакдаги пахта вазни 6,0-6,4 г., 1000 дона чигит вазни 110-115 г. Яхши
агротехника қўлланилганда 45,0 ц/га ҳосил беради.
СУ-1001 ғўза нави синтетик селекция усули билан мураккаб
дурагайлашни қўллаб F
4
(Л-26 х Л-244) дурагай комбинациясидан ва 153
оиладан кўп мартали якка танлаш асосида яратилган. Ўсимлик баландлиги
115-125 см, вилт сўлишига бардошли. Тезпишарлиги – 116-118 кун, толаси
IV-типга мансуб, тола чиқими 38-39 %, узунлиги 34-35 мм, нисбий узилиш
кучи 30-32 гк/текс, ўртача узунлиги 1,15 дюйм, микронейр кўрсаткичи 4,3-
4,5. Бир дона кўсакдаги пахта вазни 5,3-5,5 г., 1000 дона чигит вазни 108-110
г. Яхши агротехника қўлланилганда 44,0-45,0 ц/га ҳосил беради. 2012 йилда
№ NAP 00111-рақамли патент олинган.
Манғит-1 ғўза нави аналитик селекция усули билан Умид нави
популяциясидан Қорақалпоғистон Республикаси, Амударѐ тумани шароитида
кўп мартали якка танлаш асосида яратилган. Ўсимлик баландлиги 100-110
см, тупроқ шўрланишига ва вилт сўлишига бардошли. Тезпишарлиги – 115-
117 кун, толаси V-типга мансуб, тола чиқими 36-38 %, узунлиги 33-34 мм,
нисбий узилиш кучи 33,4 гк/текс, ўртача узунлиги 1,10 дюйм, микронейр
кўрсаткичи 4,4-4,5. Бир дона кўсакдаги пахта вазни 5,7-6,0 г., 1000 дона чигит
вазни 112-116 г. Яхши агротехника қўлланилганда 37,0-39,0 ц/га ҳосил
беради. Ҳозирги кунда ДНС тармоқларида синалмоқда.
Манғит-2 ғўза нави аналитик селекция усули билан Истиклол-14 нави
популяциясидан кўп мартали якка танлаш асосида яратилган. Ўсимлик
баландлиги 100-125 см, тупроқ шўрланишига ва вилт сўлишига бардошли.
Тезпишарлиги – 117-120 кун, толаси IV-типга мансуб, тола чиқими 37,0-37,5
%, узунлиги 34,5-35,0 мм, нисбий узилиш кучи 27,7-28,2 гк/текс, ўртача
узунлиги 1,24 дюйм, микронейр кўрсаткичи 4,3. Бир дона кўсакдаги пахта
вазни 5,7 г., 1000 дона чигит вазни 111-114 г. Яхши агротехника
қўлланилганда 37,5-42,0 ц/га ҳосил беради.
20
С-2118 ғўза нави аналитик селекция усули Истиклол-14 нави
популяциясидан кўп мартали якка танлаш асосида яратилган. Ўсимлик
баландлиги 120-125 см, вилт сўлишига бардошли. Тезпишарлиги – 119-120
кун, толаси IV-типга мансуб, тола чиқими 33,0-35,0 %, узунлиги 36,0-37,0 мм,
микронейр кўрсаткичи 4,1. Бир дона кўсакдаги пахта вазни 6,0 г., 1000 дона
чигит вазни 123-124 г. Яхши агротехника қўлланилганда 35,0-37,0 ц/га ҳосил
беради.
С-2119 ғўза нави аналитик селекция усули билан Истиклол нави
популяциясидан кўп мартали якка танлаш асосида яратилган. Ўсимлик
баландлиги 100-125 см, вилт сўлишига бардошли. Тезпишарлиги – 120-121
кун, толаси IV-типга мансуб, тола чиқими 39,0-40,0 %, узунлиги 33,5-34,0 мм,
нисбий узилиш кучи 32,2 гк/текс, ўртача узунлиги 1,23 дюйм, микронейр
кўрсаткичи 4,4-4,5. Бир дона кўсакдаги пахта вазни 5,6 г., 1000 дона чигит
вазни 118-120 г. Яхши агротехника қўлланилганда 38,0-40,0 ц/га ҳосил
беради.
ХУЛОСАЛАР
1. Ўрганилган ғўза навларининг гипокотилидан ўстирилган каллус
ҳужайралари ауксинларнинг концентрацияси паст бўлган Мурасиге-Скуга
озуқасида яхши индукцияланиши ва уларнинг кейинги субкультурасини
фитогормонларсиз
олиб
бориш
кераклиги
аниқланган.
Соматик
эмбриоидогенезни унга қодир бўлган Coker-312 навида фақат суспензион
озуқа шароитларда икки марта олиб бориладиган субкультурада, кейинчалик
фитогормонларсиз морфоген агарли озуқага ўтказиш билан эришиш мумкин.
Сунъий озуқада эса соматик эмбриоидлар тожсимон уруғпалла барг ва
“лотос” босқичида, уларнинг тузилишида яхши ривожланган ўтказувчи
тўқималар кузатилганда автоном ривожланишига ўтади.
2. Озуқада NaCl нинг 1,0 % гача бўлган шўрли шароитда ғўза
гипокотилидан каллусогенезни индукцияланиши мумкинлиги кўрсатилган.
NaCl концентрациясининг кейинги ошиши гипокотиль тўқималаридан
каллусогенезни сусайтиради. Суспензион шароитларда эса ғўза каллус
ҳужайралар NaCl нинг нисбатан юқори концентрацияларига (2,0 % гача)
бардош бера олади. Суспензион озуқада NaCl концентрациясининг юқори
бўлишига (1,4-2,0 %) қарамасдан ўзининг нормал морфологик тузилиши ва
бўлинишига қобилиятини сақлаган айрим ҳужайралар учраб турди.
3. Ўстириш усулларидан бири – суспензияли, шўрланишнинг анча
юқори концентрацияларига бардошли бўлган ғўза ҳужайраларини танлаб
олиш ва тизмаларни яратиш мумкинлиги таъкидланган. Бардошли ҳужайра
тизмаларини морфоген агарли озуқага ўтказилганда эса, улар ўзининг
аввалги морфологик тузилишини тиклай олади, лекин узоқ давом этадиган
субкультурада ушбу ҳужайралар морфоген ривожланишига ўтмайди.
4. Ғўза амфидиплоидлари ва уларнинг беккросс авлодларини олиш
схемаси ишлаб чиқилди, бунинг ѐрдамида триплоидли амфидиплоидни: а)
экзоген фитогормонлардан фойдаланиб; б) етилмаган муртакларни
in vitrо
га
21
экиш орқали; в) уруғлантирилган уруғкуртакларни
in vitrо
га экиш орқали
олиш мумкинлиги кўрсатилган.
5. Гексаплоид амфидиплоидларни маданий турларга мансуб навлар
билан биринчи беккросс қилинганда экзоген фитогормонлар ўқли аъзоларга
дифференцирланган етилмаган муртакларни ҳосил бўлишига имкон бериши
кўрсатилган. Бундай ҳодиса F
14
G. hirsutum
L. x
G. aridum
Skov., F
1
G. hirsutum
L. х
G. raimondii
Ulbr., F
1
G. hirsutum
L. x
G. sturtii
F.Muell. и F
1
G. hirsutum
L. x
G. anomalum
Waw., F
12
G. hirsutum
L. x
G. triphyllum
Horch.
амфидиплоидларни беккросс қилишда кузатилган. Уларнинг биринчи
беккросс авлоди эмбриокультура усули орқали, иккинчи ва учинчи беккросс
авлоди эса, эркин чатиштириш йўли билан олинди.
6. F
1
ВС
4
С-6524 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(108-Ф х
F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) ва F
1
ВС
4
Тошкент-6 х F
1
ВС
3
Тошкент-6 х F
1
ВС
2
С
6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum x G. triphyllum)
дурагай популяциялари
вилт билан умумий даражада 2 % га касалланганлиги ҳамда F
1
ВС
4
Тошкент-6
х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(С-6524 х
G. sturtii
) дурагай
популяцияси 3 % га касалланганлиги аниқланди. Кучли даражада
касалланиш кузатилмади. F
1
BС
4
Б-1 х F
1
BС
3
Тошкент-6 х F
1
BС
2
С-6524 х
F
1
BC
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum x G. triphyllum)
ва F
1
ВС
4
Тошкент-6 х F
1
ВС
3
С
6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
дурагай
популяцияларида юқори тезпишарлик кузатилиб, вегетация даври 105-112
кун давом этди. Юқори тола чиқими (37,8-39,1 %) ва узунлиги 34,4-34,5 мм
га эга бўлган F
2
BC
3
С-9070 х F
1
ВC
2
С-6524 х F
1
ВC
1
108-Ф х F
1
С-6524 х
G.
sturtii
ва F
2
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
(F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) х С
6524 дурагай комбинациялари ажратилди.
7. Амфидиплоидларнинг беккросс авлодларини ўрганиш асосида ўзида
нафақат вилтга бардошлилигини, балки юқори ҳосилдорлик, тезпишарлик ва
тола чиқими ҳамда сифати яхши бўлган энг қимматли шаклларни ажратиб
олиш имконини бериб, улар тизма даражасигача етказилди.
8. Биологик кўчатзорда бир хиллик бўйича мураккаб дурагайлар юқори
гетерозиготалилик билан тавсифланади, шу билан бирга морфохўжалик
белгиларнинг фенотипик намоѐн бўлиши бўйича бошқа оилалар нисбатан
бир хиллигини кўрсатишган. Биринчи ва иккинчи йилги селекцион
кўчатзорларда, Т-517 тизмадан ташқари, барча ўрганилган тизмалар
тезпишарлик ва вилтга чидамлилик бўйича маркер генларга эга.
Морфобиологик белгиларнинг бир хиллиги бўйича Т-17, Т-89,Т-517 ва Т 1642
тизмаларида маркерлар аниқланмади, шунга қарамасдан морфобиологик
кўрсаткичлар бўйича улар нисбатан юқори текислигини кўрсатишган. Бу,
эҳтимол, яширин дискрет ҳолатида бўлиб фенотипик намоѐн бўлмайдиган
айрим белгиларнинг элиминацияси билан боғлиқ.
9. Тезпишарлик бўйича ўрганилган дурагай оилалар, асосан, тезпишар
ота-она шакллар ва нисбатан кечпишар тизма ва навлар оралиқдаги ўринни
эгаллаганлиги кўрсатилган. Таъкидлаш керакки, тезпишарлик бўйича
трансгрессив оилалар олинмади, шу билан бирга вегетация даври нисбатан
22
кечпишар ота-оналарга кўра узоқроқ бўлган оилалар мавжуд. 10.
V.dahliae
вирулент изоляти билан ўсимликларни инокуляция қилиш асосида
тизмаларнинг вилтга чидамлилиги ҳар хил ген тизимлари билан назорат
қилинади ва вертициллиум замбуруғнинг ўсимлик организмига киритилганда
касалликнинг ташқи аломатлари юзага чиқмайди ѐки баргларда у кучсиз
фенотипик намоѐн бўлиб, юқори сезувчанлик реакцияси; дала ѐки горизонтал
чидамлилик; толерант чидамлиликга ажратилади. 11. Август охирига келиб
фақат Т-1460 и Т-149/987 тизмалари
V.dahliae
Kleb. патогени билан
касалланмаганлиги, Т-1384 ва Т-717 тизмалари эса 25 % зарарланганлиги
аниқланган. Қолган ўрганилган барча тизмалар ушбу патогенга мойиллиги
кучли бўлди.
F.oxysporum
моноспорали изолятига энг бардошли 3-2013
оиласи ҳамда Т-661, Т-554, Т-1460, Т-1306, Т-932/1018, Т 1384, Т-932 ва
Т-459 тизмалари ажратилган.
V.dahliae
ва
F.oxysporum
вилт замбуруғларига
юқори мажмуавий бардошлилик Т-717, Т-661, Т-89, Т-1460, Т-1306,
Т-932/1018, Т-1384, Т-149/987, Т-932 ва Т-459 тизмаларида аниқланган.
12. Лаборатория тажрибаларида 17 ўрганилган тизмалардан 7 таси,
жумладан Т-89, Т-1384, Т-888, Т-661, Т-46, Т-5/2011, Т-3/2013 ўрганилган
вилт патогенларига юқори бардошли бўлди.
13.
G. hirsutum
L. турига мансуб навлар учун соматик эмбриоидогенез
усулларини ишлаб чиқишда каллус ҳужайраларни 2,4-Д (0,1 мг/л) қўшилган
МС озуқасида ўстириш лозим. Хлоридли шўрланишга чидамли
G. hirsutum
L.
га мансуб ҳужайра тизмаларини олишда ҳужайра селекциясини суспензион
озуқага 1,0; 1,5 ва 2,0 % NaCl қўшилганда бошлаш мумкин.
14. Тупроқга ўтказишдан олдин 0,05-0,1% ли колхицин эритмасида 1-2
соатга ўсимталарнинг илдизлари ивитилганда хромосомалар сони икки карра
ошган ўсимликларни (бизнинг тажрибамизда – гексаплоидлар) олиш
мумкинлиги кўрсатилган. Ушбу усул билан F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G.
raimondii
Ulbr., F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. sturtii
F.Muell гексаплоидли
амфидиплоидлар олинган.
15. Селекцион иш биокимѐвий ва молекуляр маркерлар асосида олиб
борилса селекцион манбанинг бошланғич авлодларида генетик текислигини
аниқлашга имкон яратилади ва генотипик томондан бир хил оила ва
тизмаларни самаралироқ танлашга ѐрдам беради. Шу усул билан селекцион
иш ҳажмини камайтириш ҳамда ғўзанинг янги истиқболли, тезпишар, вилтга
чидамли ва қимматли-хўжалик белгилар мажмуасига эга бўлган оила, тизма
ва навларининг яратиш муддатларини қисқартиришга имкон беради.
16. Кейинги изланишларда
V.dahliae
ва
F.oxysporum
комплекс вилт
патогенларига бардошли ғўза навларини яратишда Т-717, Т-661, Т-89, Т 1460,
Т-1306, Т-932/1018, Т-1384, Т-149/987, Т-932 ва Т-459 каби вилтга юқори
бардошли тизмалар билан, ўсимликлар патогенезида хилма-хилликни
инобатга олган ҳолда, селекцион ишларни олиб бориш тавсия этилади.
17. Изланишларни олиб бориш давомида яратилган Т-375, Т-278 ва Т
2743 тизмаларни Давлат нав синаш комиссияси қошидаги грунтназоратига
23
топшириш, ҳамда районлашган Истиқлол-14 ғўза навининг экин майдонини
кенгайтириш, Манғит-1 ва С-2118 яратилган янги навларини эса
кенгайтирилган ишлаб чиқариш синовини олиб бориш тавсия қилинади.
24
НАУЧНЫЙ СОВЕТ DSc.27.06.2017.Qx.13.01 ПРИ ТАШКЕНТСКОМ
ГОСУДАРСТВЕННОМ АГРАРНОМ УНИВЕРСИТЕТЕ И
АНДИЖАНСКОМ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ ИНСТИТУТЕ
НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ СЕЛЕКЦИИ,
СЕМЕНОВОДСТВА И АГРОТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ
ХЛОПКА
РАХМАНКУЛОВ МУРОД САИД-АКБАРОВИЧ
СОЗДАНИЕ СКОРОСПЕЛЫХ, ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ СОРТОВ
И ЛИНИЙ ХЛОПЧАТНИКА ВИДА
G. HIRSUTUM
L. НА ОСНОВЕ
НОВЫХ МЕТОДОВ СЕЛЕКЦИИ
06.01.05 – Селекция и семеноводство
АВТОРЕФЕРАТ ДИССЕРТАЦИИ ДОКТОРА
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК (DSc)
ТАШКЕНТ – 2017
Тема докторской диссертации (DSc) зарегистрирована в Высшей аттестационной
комиссии при Кабинете Министров Республики Узбекистан за № B2017.1.DSc/Qx2
Докторская диссертация выполнена в Научно-исследовательском институте селекции,
семеноводства и агротехнологии выращивания хлопка.
Автореферат диссертации на двух языках (узбекский, русский) размещѐн на веб-странице по
адресу www.agrar.uz и на Информационно-образовательном портале «ZiyoNet» по адресу
www.ziyonet.uz.
Научный
Ким Роберт
Григорьевич
консультант:
доктор сельскохозяйственных наук
Официальные оппоненты:
Ризаева Сафия Мамедовна,
доктор биологических наук,
профессор
Эргашов Иброхим Тошкентович,
доктор сельскохозяйственных наук,
профессор
Массино Игорь Всеволодович,
доктор сельскохозяйственных наук,
профессор
Ведущая организация: Национальный университет Узбекистана им. М.Улугбека.
Защита состоится «19» июля 2017 года в 10
00
часов на заседании Научного совета
DSc.27.06.2017.Qx.13.01 при Ташкентском государственном аграрном университете и
Андижанском сельскохозяйственном институте. ТашГАУ. (Адрес: 100140, г. Ташкент, ул.
Университетская, 2. Тел.: (99871) 260-48-00, факс: 260-38-60, е-mail: tuag-info@edu.uz).
С докторской диссертацией (DSc) можно ознакомиться в Информационно-ресурсном центре
Ташкентского государственного аграрного университета (зарегистрирована за № 532680). 100140,
г. Ташкент, ул. Университетская, 2. Тел.: (99871) 260-50-43, факс: (99871) 260-48-00.
Автореферат диссертации разослан «07» июля 2017 года.
(реестр протокола рассылки № 1.1 от «06» июля 2017 года).
Б.А.Сулаймонов
Председатель научного совета по присуждению
ученых степеней, д.б.н., профессор
Я.Х.Юлдашов
Ученый секретарь научного совета по
присуждению ученых степеней, к.с/х.н.
М.М.Адилов
Председатель научного семинара при научном
совете по присуждению ученых степеней, д.с/х.н.
ВВЕДЕНИЕ (аннотация докторской диссертации)
Актуальность
и
востребованность
темы
диссертации.
На
сегодняшний день, в развитии хлопководства, уделяется большое внимание
созданию высокоурожайных, с высоким качеством волокна, скороспелых,
толерантных к неблагоприятным факторам окружающей среды сортов
хлопчатника. В мире 75 % объѐма производства хлопка приходится на 5
стран – Китай, США, Индия, Пакистан и Узбекистан. По информации
International Cotton Advisory Committee (ICAC) в 2017 году объѐм
производства хлопка увеличится на 4 % и достигнет 23 млн. тонн, а посевные
площади – на 1 % и составят 31,3 млн. гектар. Ожидается также повышение
урожайности хлопка-сырца на 4 % и будет равна 732 кг с гектара
1
.
В нашей стране вегетационный период для хлопчатника относительно
короткий, поэтому наши учѐные занимают ведущие позиции в мире по
созданию скороспелых сортов хлопчатника. Вместе с тем, по высоким
показателям качества волокна, возделываемые в Узбекистане сорта
хлопчатника, высоко котируются на мировом рынке. В частности, на
Ливерпульской бирже сорт хлопчатника «Бухара-6» признан в качестве
эталона по качеству волокна. В последние годы в республике были выведены
и внедрены в производство ряд скороспелых, урожайных, обладающих
высоким качеством волокна, толерантных к болезням и вредителям сортов
хлопчатника. Учѐные нашей страны, в результате многолетних исследований,
добились повышения выхода волокна с 28-32 % до 37-40 %, длины волокна с
26-28 мм до 33-35 мм, массы сырца одной коробочки с 4-5 грамм до 6,5-9,0
грамм
2
.
В связи с увеличением численности населения, а также уменьшением
посевных площадей в мире огромная роль отводится повышению
урожайности и качества получаемой продукции сельскохозяйственных
культур. Решение этих задач возможно применением новых методов
селекции, основанных на последних достижениях науки, в частности,
биотехнологии, селекции на основе биохимических и молекулярных
маркерах, с помощью которых процесс создания новых сортов сокращается в
два-три раза.
Данное диссертационное исследование, в определенной степени, служит
выполнению задач, предусмотренных Законами Республики Узбекистан «О
селекционных достижениях» и «О семеноводстве», а также намеченных
Постановлениями Президента Республики Узбекистан № ПП-2460 от 29
декабря 2015 года «О мерах по дальнейшему реформированию и развитию
сельского хозяйства на период 2016-2020 годов», «О размещении сортов
хлопчатника и прогнозных объѐмах производства урожая хлопка»,
постановлением Кабинета Министров Республики Узбекистан «О политике
правительства Республики Узбекистан в области семеноводства» от 19
сентября 1996 года, а также других нормативно-правовых документах.
Соответствие исследования приоритетным направлениям развития
1
http://www.hlopok.info/, https://rns.online/economy/
2
«Пахтачилик маълумотномаси”, 2016.
27
науки и технологий республики.
Данное диссертационное исследование
выполнено в соответствии с приоритетным направлением развития науки и
технологий республики Узбекистан – V. «Сельское хозяйство, биотехнология,
экология и защита окружающей среды».
Обзор зарубежных научных исследований по теме диссертации.
Научные исследования в области создания сортов, устойчивых к
экстремальным факторам окружающей среды, с использованием новых
методов селекции проводятся в ведущих международных научных центрах и
высших образовательных учреждениях мира, в том числе, Agricultural
Research for Development - CIRAD (Франция), United States Department of
Agriculture (USDA), Agricultural Research Service (ARS), University of Texas
(США), Institute for Cotton Research of Chines Academy of Agricultural Sciences
(Китай), CSIRO-Commonwealth Scientific and Industrial Research Organization
(Австралия), Central Institute for Сotton Research (Индия),
Monsanto Company
(США)
3
, Научно-исследовательский институт хлопководства Казахстана
(Казахстан),
Научно-исследовательский институт селекции, семеноводства и
агротехнологии выращивания хлопка
(Узбекистан).
В результате проведѐнных исследований в области селекции
толерантных к некоторым экстремальным факторам сортов были получены
ряд результатов, в том числе: определены ДНК-маркеры, связанные с вилтом
(California University, АҚШ); использованием методов ДНК МАС созданы
новые сорта, устойчивые к вилту (United States Department of Agriculture,
Agriculture Research Service); определены белковые маркеры, определяющие
некоторые хозяйственно-ценные признаки (Central Institute for Сotton
Research);
созданы
растения
с
изменѐнным
генотипом
(генмодифицированные) (
Monsanto Company); созданы сорта хлопчатника,
устойчивые
к некоторым экстремальным факторам окружающей среды
(Commonwealth Scientific and Industrial Research Organization);
созданы
скороспелые, с высоким качеством волокна сорта хлопчатника, устойчивые
к
вилту Fusarium (Agricultural Research for Development, Institute for Cotton
Research of Chines Academy of Agricultural Sciences);
созданы сорта
хлопчатника, с использованием диких и полудиких образцов
(Texas A&M
University, Америка Қўшма Штатлари Қишлоқ хўжалик Департаменти).
В мире по созданию сортов хлопчатника с высокой урожайностью и
качеством
волокна,
обладающих
комплексом
хозяйственно-ценных
признаков, толерантных к различным экстремальным факторам проводятся
следующие исследования по ряду приоритетных направлений, в том числе:
создание сортов с применением таких новых методов селекции как
биотехнология, клеточная селекция, генная инженерия; преодоление
несовместимости при отдалѐнной гибридизации растений с различным
числом хромосом; определение маркеров, отвечающих за хозяйственно
ценные признаки сортов.
Степень изученности проблемы.
В Узбекистане ведѐтся огромная
3
http://www.cirad.fr/en, https://www.usda.gov/, https://www.ars.usda.gov/, https://www.utexas.edu/,
https://www.caas.cn/en/administration/research_institutes/, https://www.csiro.au/, www.cicr.org.in/,
www.monsanto.com/
28
селекционная работа по хлопчатнику в таких организациях и учреждениях,
как НИИ селекции, семеноводства и агротехнологии выращивания хлопка,
Институте генетики и экспериментальной биологии растений АН РУз,
Центре геномики и биоинформатики и др. В государственный реестр с/х
культур включено более 20 сортов хлопчатника, большинство из которых
были выведены классическими методами селекции. Применение же
нетрадиционных методов позволяет в короткий срок получать сорта с
нужными признаками. Так, проблемам биотехнологии в селекции
хлопчатника посвящены работы таких ученых как А.А.Абдукаримова и др.,
И.Абдурахманова, С.А.Джатаева, А.Р.Азизходжаева, С.В.Лев и др., А.-
К.Э.Эргашева и многих других исследователей.
Вопросы толерантности хлопчатника вида
G. hirsutum
L. к возбудителям
болезней
V.dahliae
и
F.oxysporum
отражены в многочисленных статьях
Н.Г.Запрометова, Р.Г.Ким, А.Марупова, В.А.Автономова, а также в
монографии А.Б.Амантурдиева и Р.Г.Ким. Однако, в силу различных причин,
появление новых рас патогенов и усиление заболеваемости хлопчатника
ставит перед селекционерами задачу ускоренного выведения и внедрения в
производство новых сортов, обладающих коплексом хозяйственно-ценных
признаков с высокой комплексной толерантностью к вилту.
Эту задачу можно решить применением молекулярных и биохимических
маркерных тестов, которые освещены в исследованиях А.П.Ибрагимова,
С.Р.Рахманкулова, Д.А.Хашимова, Р.К.Шадманова, Ш.Юнусханова и других.
Однако подавляющее большинство литературных источников посвящено
изучению молекулярных и биохимических маркеров на других культурах.
Исходя из вышесказанного видно, что данная проблема как у нас в
республике, так и за рубежом изучена недостаточно.
Связь
диссертационного
исследования
с
планами
научно
исследовательских работ научно-исследовательского учреждения, где
выполнена диссертация.
Диссертационное исследование выполнено в
соответствии с планом научно-исследовательских работ Ташкентского
государственного аграрного университета и Научно-исследовательского
института селекции, семеноводства и агротехнологии выращивания хлопка
по проектам П-17.59 «Доработать перспективные линии хлопчатника,
сочетающие комплекс хозяйственно-ценных признаков, передать на
государственное сортоиспытание и производственное размножение» (2003-
2005 гг.), Департамента сельского хозяйства США Section-416 2S
«Размножение и доработка 4 новых линий хлопчатника и оценка их по
устойчивости к хлоридному засолению (Л-1, Л-2, Л-3, Л-4)» (2005-2006 гг.),
А-11-109 «На основе ранее созданных высокомасличных линий хлопчатника
создание нового сорта с высоким выходом и качеством волокна, отвечающим
стандартам мирового рынка и передача в ГСИ» (2006-2008 гг.), ҚХА-9-045
«Доработка и размножение сорта «Умид», а также новых перспективных
солеустойчивых линий хлопчатника (Л-5, Л-6, Л-7, Л-13) и передача в ГСИ»
(2009-2011 гг.), ҚХА-9-049 «Доработка урожайных, с высоким выходом
волокна и количеством масла в семенах (20-22 %), вилтоустойчивых линий
хлопчатника и передача в Государственное сортоиспытание» (2009-2011 гг.),
29
КХФ-5-029 «Разработать методику создания трансгрессивных, скороспелых,
вилтоустойчивых и устойчивых к сельскохозяйственным болезням сортов и
линий хлопчатника на основе биохимических и молекулярных тестов с
комплексом агрохозяйственных признаков» (2012-2016 гг.).
Целью исследования
является изучение действия селективных сред с
NaCI на каллусные клетки, получение амфидиплоидов нетрадиционными
методами селекции, выявление относительно гомозиготных семей и линий с
использованием молекулярных тестов, а также создание сортов, обладающих
скороспелостью и комплексом хозяйственно-ценных признаков.
Задачи исследования
:
подбор оптимальных доз фитогормонов в агаризованной питательной
среде для интенсивного выделения каллусов из тканей хлопчатника и
изучения соматического эмбриоидогенеза
in vitrо
;
определение влияния селективных сред с различной степенью
хлоридного засоления на рост и развитие каллусных клеток хлопчатника;
определение степени устойчивости клеток к стресс-факторам по засолению
NaCl;
получение амфидиплоидов хлопчатника и их беккросс-потомства, а
также изучение хозяйственно-ценных признаков и технологических
показателей волокна у беккросс-поколений амфидиплоидов;
определение молекулярных маркеров по однородности, скороспелости и
толерантности к вилту;
изучение толерантности к вилту новых линий хлопчатника при
инокуляции растения-хозяина более вирулентными патогенами грибов
Verticillium dahliae
Kleb. и
Fusarium oxysporum
f. sp
. vasinfectum
(Atk.) Snyder
et. Hansen
;
создание скороспелых, толерантных к вилту сортов и линий
хлопчатника с применением новых методов селекции, обладающих
комплексом хозяйственно-ценных признаков.
Объектом исследования
служили сорт хлопчатника американской
селекции Coker-312 и отечественные сорта С-6524, С-4727, а также беккросс
гибриды.
Амфидиплоиды
были
получены
между
отдаленными
разнохромосомными тетраплоидными и диплоидными видами. Для
получения сложных беккросс гибридов использовались сорта Омад, С-6530,
С-8284, а также линии Л-030, ЛS-485, ЛS-489, ЛS-6592, ЛS-6593, ЛS-6594,
ЛS-6595, ЛS-6596, ЛS-6598, ЛS-484.
Предмет исследования:
определение толерантности селекционного
материала к засолению в условиях
in vitro
, получение амфидиплоидов
хлопчатника
и
их
беккросс-потомства;
выявление
гомозиготных
трансгрессивных генотипов в ранних поколениях на основе молекулярных
тестов; изучение комплексной генетической природы толерантности к вилту
сортов, линий, семей, гибридов при инокуляции растения-хозяина более
вирулентными расами грибов
V.dahliae
Kleb. и
F.oxysporum
.
Методы исследования
. Полевые и лабораторные эксперименты
проводились на основе общепринятых методик селекционных работ, отбор
адаптивных генотипов вели по технологии, разработанной в лаборатории
30
Прикладной биохимии института Генетики и экспериментальной биологии
растений, методом электрофоретического анализа белков и ферментов в
ПААГ, учет заболевших растений вели согласно методике, общепринятой для
каждой болезни, статистическую обработку данных проводили по
Б.А.Доспехову. Качество волокна определяли на HVI.
Научная новизна диссертационного исследования:
проведена клеточная селекция на каллусных клетках в селективных
средах с NaCl и разработана методика лабораторной оценки селекционного
материала по устойчивости к хлоридному засолению в условиях
in vitro
;
методом эмбриокультуры была разработана схема получения
амфидиплоидов;
получены амфидиплоиды между отдаленными разнохромосомными
видами
G. hirsutum
L.,
G. raimondii
Ulbr.,
G. thurberi
Tod.,
G. anomalum
Waw.,
G. sturtii
F.Muell.,
G. davidsonii
Kell.,
G. harknessii
Brand. и их
беккросспоколения с участием видов
G. sturtii
F.Muell.,
G. raimondii
Ulbr.,
G.
harknessii
Brand.,
G. aridum
Skov.,
G. triphyllum
Horch.;
на основе молекулярных маркеров, были созданы скороспелые,
толерантные к вилту и генотипически однородные семьи и линии
хлопчатника;
на основе инокуляции растения-хозяина моноспоровыми изолятами
V.dahliae
и
F.oxysporum
, созданы новые линии хлопчатника, обладающие
высокой скороспелостью, урожайностью, комплексной толерантностью к
вилтовому заражению.
Практические результаты исследования:
в результате проведения клеточной селекции хлопчатника на
селективных средах с NaCl была разработана методика определения
солеустойчивости селекционного материала в лабораторных условиях, а
также методика пересадки растеньиц с почерневшими корнями, полученных
в результате проведения клеточной селекции, из пробирки в грунт;
применением метода замачивания корешков проростков растений на 1-2
ч. в 0,05-0,1%-ных растворах колхицина до посадки в грунт были получены
гексаплоидные амфидиплоиды F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. raimondii
Ulbr.,
F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. sturtii
F.Muell. и разработана методика
получения амфидиплоидов и их беккросс-потомства с участием культурных и
диких форм хлопчатника;
среди беккросс поколений амфидиплоидов были выявлены наиболее
ценные формы, сочетающие в себе не только повышенную толерантность к
вилту, но и высокую урожайность со скороспелостью и хорошими
показателями выхода и качества волокна, которые были доведены до
линейного состояния;
выявлены относительно гомозиготные трансгрессивные семьи и линии
хлопчатника, с использованием молекулярных тестов;
определена толерантность новых семей и линий хлопчатника к
V.dahliae
Kleb. и
F.oxysporum
применением инокуляции растения-хозяина, а также на
основе новых методов селекционной работы были созданы новые сорта и
линии, обладающие высокой скороспелостью, урожайностью, качеством
31
волокна, толерантностью к комплексным вилтовым патогенам, с комплексом
хозяйственно-ценных признаков.
Достоверность результатов исследования
подтверждена проводимыми
ежегодными апробациями состояния полевых посевов и наличием первичной
документации; соответствия полученных теоретических и практических
результатов; обсуждением результатов научных
исследований на
республиканских, международных научно-практических конференциях, а
также публикациями в рецензированных научных журналах Высшей
Аттестационной
Комиссии
при
Кабинете
Министров
Республики
Узбекистан; проведением статистического анализа всех цифровых данных,
полученных в результате полевых и лабораторных исследований с
использованием современных компьютерных технологий
Научная и практическая значимость результатов исследования.
Научная значимость результатов диссертационного исследования состоит в
выделении солеустойчивых клеточных линий и разработки методики
определения солеустойчивости селекционного материала в лабораторных
условиях; разработке способа пересадки в грунт пробирочных растений,
полученных с помощью культуры недозрелых зародышей хлопчатника
in
vitrо
, а также схемы получения амфидиплоидов хлопчатника и их
беккросс-поколения;
Практическая значимость результатов исследования заключается в
создании скороспелых, толерантных к вилту и генотипически относительно
однородных семей и линий хлопчатника на основе биохимических маркеров;
определении однородности по толерантности к вилту, скороспелости и
выравненности по морфобиологическим признакам у изученных семей,
линий и сложных беккросс гибридов; создании скороспелых, высоко
толерантных к
V.dahliae
ва
F.oxysporum
линий, обладающих комплексом
хозяйственно-ценных признаков.
Внедрение результатов исследования.
На основе проведѐнных
исследований по селекции и семеноводству хлопчатника:
созданы сорта хлопчатника Истиклол-14, Истиклол-13, Мангит-1,
Мангит-2, С-2118, С-2119 с комплексом хозяйственно-ценных признаков.
Сорт Истиклол-14 признан перспективным с 2013 года и районирован с 2016
года по Андижанской области и высевался на площади 680 га. Включен в
Государственный реестр с 2016 года в качестве перспективного по
Сурхандарьинской области и высевался на общей площади более 700 га
(Справка Министерства сельского и водного хозяйства Республики
Узбекистан от 15.02.2017 г., № 02/20-92). В 2016 году фермерскими
хозяйствами Хужаабадского и Улугнарского районов Андижанской области у
сорта Истиклол-14 была получена средняя урожайность 31,0-34,0 ц/га, а
рентабельность составила 16-20 %;
сорт Мангит-1 в 2015 году высевался в Амударьинском районе
Республики Каракалпакстан на общей площади 257 га (Справка
Министерства сельского и водного хозяйства Республики Узбекистан от
15.02.2017 г., № 02/20-92). Сорта Мангит-2 и С-2119 в 2017 году будут
переданы для испытания в грунтконтроль.
32
Апробация
результатов
исследования.
Результаты
данного
исследования были обсуждены на 26, в том числе, 17 международных и 9
республиканских научно-практических конференциях.
Опубликованность результатов исследования.
По теме диссертации
опубликовано 38 научных работ, в том числе 11 журнальных статей, из них 9
– в республиканских и 2 в зарубежных журналар, рекомендованных Высшей
аттестационной комиссией Республики Узбекистан для публикации
основных научных результатов докторских диссертаций, выпущена 1
монография, получено 3 патента и 1 свидетельство на сорта хлопчатника.
Структура и объем диссертации.
Диссертация состоит из введения,
шести глав, заключения, списка использованной литературы, приложений.
Объѐм диссертации составляет 196 страниц.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ
Во введении
обоснованы актуальность и востребованность темы
диссертации,
освещено
соответствие
исследований
приоритетным
направлениям развития науки и технологий Республики Узбекистан,
представлен обзор международных научных исследований по теме
диссертации
и
степень
изученности
проблемы,
показана
связь
диссертационного исследования с планами научно-исследовательских работ,
сформулированы цели и задачи исследований, приводятся объект, предмет и
методы исследований, научная новизна, практические результаты и их
достоверность, теоретическая и практическая значимость результатов
исследований и их внедрение в производство, даны апробация работы,
опубликованность результатов, а также краткая структура и объем
диссертации.
В первой главе диссертации
«Обзор научных исследований по новым
методам селекции»
описываются методы биотехнологии, такие как
сомаклональная изменчивость, соматический эмбриогенез, культура
in vitro
тканей и клеток, гибридизация соматических клеток путем слияния
протопластов, перенос генов в клетки растений, мутагенез и селекция на
клеточном уровне. Показано, что прогресс в биотехнологии в большинстве
случаев достигнут для злаковых растений, а у хлопчатника еѐ методы
разработаны не на достаточном уровне. Даются сведения о значении
полиплоидии, как одного из метода селекции, получению амфидиплоидов
различными методами. Показано, что необходимость включения в
селекционный процесс новых генотипов является актуальным вопросом,
поскольку существующие сорта и образцы практически исчерпали свой
генетический потенциал. В связи с чем, требуется проведение глубоких
экспериментальных исследований по изучению диких и рудеральных форм,
выявления из них наиболее перспективных в качестве исходного материала и
применения в практической селекции. Раскрываются вопросы по
применению маркерных тестов при выведении новых, а также сохранения
сортовой чистоты существующих сортов. Показано, что данный метод
позволяет на ранних этапах селекции определить наличие тех или иных
33
признаков на генетическом уровне, а также сократить селекционный процесс
вдвое-втрое.
Во второй главе диссертации
«Условия, объекты и методика
исследований»
приводятся место и условия проведения экспериментов,
исходный материал и методика проведения исследований, где показано, что
исследования проводились в Научно-исследовательском институте селекции,
семеноводства и агротехнологии выращивания хлопка. Метеорологические
условия района типичны для резко континентального климата и
характеризуются
безоблачной
погодой,
обеспечивающей
высокую
интенсивность солнечного света и незначительное количество атмосферных
осадков, которых в среднем за год выпадает около 360 мм, преимущественно
в осенне-зимне-весенние периоды.
Для проведения клеточной селекции объектом исследований был выбран
американский сорт хлопчатника Coker-312 и сорта отечественной селекции
С-4727 и С-6524. Для получения беккросс гибридов в гибридизацию, в
качестве исходных форм, были включены дикий вид
G. tomentosum
, сорт
американской селекции Acala sj-5, отечественные сорта Омад, Наманган-77,
С-8284, С-6771, С-6530, С-8288, а также созданные линии хлопчатника вида
G. hirsutum
L.
Лабораторные опыты по клеточной селекции проводились в
асептических условиях ламинар бокса, а также в факторостатном помещении
на качалках при 16-ти часовом освещении интенсивностью 2000-3000 люкс.
Отбор адаптивных генотипов вели на уровне семенного материала по
заранее смаркированным признакам. Маркерами служили отдельные белки и
ферментные системы прямо или опосредованно связанные с проявлением
признака. Для анализа использовалось микроколичество зародышей семян
(генотипов)
с
микропилярной
области,
которые
подвергались
биохимическому анализу для выявления в них маркерных ферментов. В
качестве биохимических использовались методы электрофоретического
анализа белков и ферментов в ПААГ.
Для определения устойчивости к изолятам
V.dahliae
Kleb. и
F.oxysporum
проводили инокуляцию моноспоровой суспензией у корневой шейки
растений в фазе начала бутонизации. После инокуляции проводились
наблюдения за внешним проявлением симптомов болезни на листьях
хлопчатника органолептическим методом.
В третьей главе диссертации
«Клеточная селекция хлопчатника»
приведены результаты исследований по каллусогенезу и соматическому
эмбриоидогенезу, а также биологии культивируемых клеток хлопчатника на
селективных средах с NaCl.
Каллусогенез и соматический эмбриоидогенез у хлопчатника
. Для
получения каллусной массы использовался гипокотиль, который разрезали на
кусочки длиной 5-8 мм, начиная с корневой шейки до эпикотилярной части
растения. Для всех генотипов хлопчатника были предприняты одинаковые
условия получения эксплантантов. Исследованиями показано, что
присутствие цитокинина Дроп как в отдельности, так и в сочетании с
ауксинами, а также вариант фитогормонов 2
34
мг/л НУК и 1 мг/л кинетин в питательной среде МС даѐт хорошие результаты
по индукции каллусогенеза из гипокотиля отечественных сортов и сортов
американской селекции. Понижение концентрации этих фитогормоновв
среде приводит к замедлению роста каллусных клеток.
Для получения соматического эмбриоидогенеза у сорта Coker-312
использовали схему Trolinder N. с более длительными интервалами
культивирования в суспензионной среде. Гипокотилярную часть сорта Coker
312 разрезали на сегменты длиной 6-8 мм и высевали на среду МС с
витаминами Б-5 Гамборга, дополненную 2,4-Д, кинетин и НУК. Каллусные
клетки хорошо индуцировались в среде с добавлением 0,1 мг/л 2,4-Д и в
варианте с 0,1 мг/л 2,4-Д + 0,1 мг/л НУК.
Второй этап субкультивирования для получения соматических
эмбриоидов проводился на среде МС без участия экзогенных фитогормонов,
где каллусные клетки хорошо росли, имели различную форму,
комкообразную структуру, бледно-коричневый цвет, а с 10-12-дня
культивирования образовывались маленькие соматические эмбриоиды (около
30-35 %), не дифференцированные на корешок и семядольные листья. Более
чем у 50 % соматических эмбриоидов с момента дифференциации начинали
формироваться семядольноподобные листья и корешок.
При изучении автономности соматических эмбриоидов наблюдалась их
различная
дифференциация:
глобулярные,
сердечковидные,
дифференцированные на гребешкообразные семядольноподобные листья,
которые назвали «лотос» и дифференцированные на семядольные листья и
корешок, которые имели различные размеры.
В наших исследованиях длина дифференцированного соматического
эмбриоида составляла от 2,5 до 4,2 мм. При этом масса зрелого эмбриоида
была в среднем 19,70 мг (табл. 1).
Таблица 1
Морфологическая характеристика соматических эмбриоидов.
Стадии
эмбриоидов
Мас
са,
мг
Размеры эмбриоидов
Длина
Ширина
Преде
л
колеб
а ний
Сред
нее, мм
CV
Преде
л
колеб
а
ний
Сред
нее, мм
C
V
1. Глобулярная 2,11 0,55-0,9
7
0,76±0,04 17 0,65-0,87 0,74±0,04 17
2.
Сердечковид
ная
5,43 1,20-1,7
4
1,62±0,07 20 0,91-1,24 1,14±0,06 19
3. Лотос
11,12 1,70-2,3
4
2,10±0,09 22 0,93-1,29 1,13±0,05 18
4.
Дифференци
рованная на
осевые органы
19,70 2,50-4,2
0
3,10±0,01 23 1,62-2,12 1,94±0,09 22
Эмбриоиды, сформировавшие бугоркообразные семядольные листья с
корешком в виде торпеды на искусственных питательных средах переходили
35
к росту. Полученные из эмбриоидов в стадии «лотоса» растения через месяц
культивирования имели размер 1,2-1,8 см. В безгормональной среде
эмбриоиды, дифференцированные на осевые органы легко переходили к
росту и через 30-35 дней культивирования на гребешкообразных
семядольных листьях начинала образовываться нормальная эпикотилярная
часть растения с хорошо сформированными листьями. В течение месяца
культивирования растения достигают размера 2,4-4,0 см. Однако, по мере
роста на искусственной питательной среде корни постепенно чернеют. По
мнению Азизходжаева А.Р. это, возможно, связано с окислением элементов
питательного вещества за счѐт выделения неизвестных веществ из корней
растеньиц хлопчатника. В процессе исследований была разработана
методика пересадки этих растеньиц с почерневшими корнями из пробирки в
грунт.
Биология культивируемых клеток хлопчатника на селективных средах с
NaCl
.
При культивировании каллусных клеток на суспензионной среде с
различной концентрацией NaCl (от 0,2 % до 3,0 %) клетки имели разную
морфологию и, по мере увеличения концентрации, уменьшалось их
количество. Так, при изучении морфологии клеток чаще всего встречаются
овальные клетки (48-57 %). Повышение же концентрации соли в среде
ингибирует развитие клеток, за счет этого количество удлиненных клеток
постепенно уменьшается, а доля округлых увеличивается. В засоленных
средах гигантских клеток не встречается, за исключением среды с 0,2 %
NaCl.
Рис. 1. Число клеток различных размеров.
Похожая картина наблюдается и при исследовании размеров клеток,
которые также были различны по мере увеличения концентрации соли. Так,
мелкие клетки преобладают над остальными практически во всех средах
(кроме среды с 3,0 % NaCl). Количество самых мелких постепенно
увеличивается по мере повышения концентрации NaCl. Это происходит за
счѐт уменьшения доли средних и больших клеток. Самые большие клетки
36
встречаются только в средах до 0,4 % NaCl (рис. 1).
Исследования показали, что при 3 % концентрации NaCl в среде
невозможно вести селекционную работу с каллусными клетками
хлопчатника. Устойчивые к 1,0; 1,4 и 2,0 % NaCl клетки высаживали на
агаровую среду МС с витаминами без фитогормонов. Наблюдения показали,
что клетки, выращенные в солевых условиях, при пересадке их в среду без
NaCl возвращаются в своѐ нормальное морфологическое состояние.
В четвертой главе диссертации
«Получение амфидиплоидов
хлопчатника нетрадиционными методами селекции»
рассматривались
вопросы получения амфидиплоидов хлопчатника нетрадиционными
методами селекции. Исследования показали, что метод обработки точки
роста растений 0,05-0,1% растворами колхицина в течение 5-6 дней по 4-6
раз
оказался
безуспешным
–
нам
не
удалось
получить
полиплоидизированные ветви у триплоидных гибридов. Семена, полученные
с помощью экзогенных фитогормонов, замачивались в воде и через двое
суток проростки переносили в 0,05-0,1% растворы колхицина на 12, 24, 30,
36, 48, 56, 68, 76 ч. после чего высевали в бумажные стаканчики с почвой. На
5-7-е сутки получали всходы с утолщенными, короткими гипокотилями.
Среди изученных вариантов удалось сохранить лишь те растения,
которые были получены из проростков, корешки которых до посадки в грунт
замачивались на 1-2 ч. в 0,05-0,1%-ных растворах колхицина. Таким
способом были получены гексаплоидные амфидиплоиды F
1
108-Ф (
G.
hirsutum
L.) х
G. raimondii
Ulbr., F
1
108-Ф (
G. hirsutum
L.) х
G. sturtii
F.Muell.
При беккроссировании этих амфидиплоидов с сортами С-6524 и С-4727, для
сохранения нормально развитых коробочек, на вторые сутки после опыления,
завязи обрабатывали экзогенными фитогормонами (табл. 2).
Установлено, что при беккроссировании амфидиплоидов с сортами вида
G. hirsutum
L. с использованием экзогенных фитогормонов сохраняется
большая часть скрещенных коробочек, которые, в основном, имеют
сформированные гибридные зародыши. Последние имеют хорошо
дифференцированные осевые органы размером 3-4 мм. Однако развития
эндосперма не наблюдается, в связи с чем данные зародыши культивировали
на питательной среде
in vitrо
, и получили цветущие растения F
1
BC
1
(C-6524 x
F
1
108-Ф x
G. sturtii
F.Muell), F
1
BC
1
(C-4727 x F
1
108-Ф x
G. sturtii
F.Muell),
F
1
ВС
1
(С-6524 х F
1
108-Ф х
G. raimondii
Ulbr.). Самоопыленные коробочки
этих гибридов опадали, но при вторичном беккроссировании их с сортами С
6524 и С-4727 значительная часть плодоэлементов сохранялась.
В результате проведения исследований установлено, что при
беккроссировании амфидиплоидов с сортами вида
G. hirsutum
L. с
использованием экзогенных фитогормонов сохраняется большая часть
скрещенных коробочек, которые, в основном, имеют сформированные
гибридные зародыши, а также была разработана схема получения
амфидиплоидов хлопчатника и их беккросс-потомства, при помощи которой
триплоидный амфидиплоид можно получить: а) использованием экзогенных
фитогормонов; б) через культуру
in vitro
недозрелых зародышей; в) через
культуру
in vitro
оплодотворенных семяпочек.
37
Таблица 2
Действие фитогормонов на дифференциацию гибридных
зародышей хлопчатника
Гибридная
комбинация
Вариант
Кол
во
скре
щива
ний,
шт.
Кол-во
сохрани
в шихся
коробо
чек, шт.
Кол-во
коробочек
с
дифферен
цирован
ными
заро
дышами,
шт.
Кол-во
зародышей в
1
коробочке,ш
т.
пре
дел
коле
баний
сред
нее
С-6524 х F
1
С
6524 х
G.
Контро
ль
109
118
4
105
-
95
-
3-11
-
5
sturtii
F.Muell
Опыт
С-4727 х F
1
С
6524 х
G.
sturtii
F.Muell
Контро
ль
Опыт
130
172
1
147
-
139
-
2-9
-
5
С-6524 х
F
1
108- Ф х
G.
raimondii
Ulbr.
Контро
ль
Опыт
107
139
3
87
-
81
-
3-7
-
5
С-4727 х
F
1
108- Ф х
G.
raimondii
Ulbr.
Контро
ль
Опыт
94
111
2
90
-
79
-
4-8
-
5
С-6524 х
G.
bickii
Prok.
Контро
ль
Опыт
50
85
-
76
-
-
-
-
-
-
С-6524 х
G.
davidsonii
Kell.
Контро
ль
Опыт
225
195
-
154
-
136
-
1-6
-
3
С-4727 х
G.
davidsonii
Kell.
Контро
ль
Опыт
205
218
2
188
-
160
-
1-6
-
3
С-6524 х
G.
klotzs-chianu
m
Anderss
Контро
ль
Опыт
110
151
3
114
-
90
-
2-8
-
4
С-4727 х
G.
klotzs-chianu
m
Anderss
Контро
ль
Опыт
71
90
2
87
-
69
-
2-6
-
5
С-6524 х
G.
australe
F.Muell.
Контро
ль
Опыт
79
97
1
78
-
1
-
1
-
1
Примечание:
Опыт – обработанные фитогормонами двухдневные после опыления
завязи; в графе 5 при гибридизации
G. hirsutum
L. х
G. davidsonii
Kell. указано количество
полноценных семян.
Показано,
что
при
первом
беккроссировании
гексаплоидных
амфидиплоидов методом эмбриокультуры с сортами культурных видов
экзогенные фитогормоны способствуют образованию дифференцированных
на осевые органы недозрелых зародышей. Такое явление было отмечено при
беккроссировании амфидиплоидов F
14
G. hirsutum
L. x
G. aridum
Skov., F
1
G.
38
hirsutum
L. х
G. raimondii
Ulbr., F
1
G. hirsutum
L. x
G. sturtii
F.Muell. и F
1
G.
hirsutum
L. x
G. anomalum
Waw., F
12
G. hirsutum
L. x
G. triphyllum
Horch.
Первое беккросс-поколение данных амфидиплоидов было получено методом
эмбриокультуры, а второе и третье беккросс-поколение было получено при
свободном скрещивании.
В результате проведенных исследований были отобраны гибридные
популяции F
1
ВС
4
С-6524 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(108-Ф х
F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) и F
1
ВС
4
Ташкент-6 х F
1
ВС
3
Ташкент-6 х F
1
ВС
2
С
6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum
x
G. triphyllum)
, которые заболевали в
общей степени на 2 % и гибридная популяция F
1
ВС
4
Ташкент-6 х F
1
ВС
3
С 6524
х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(С-6524 х
G. sturtii
), которая заболевала в общей
степени на 3 %.
По скороспелости выделялись такие гибридные комбинации как F
1
BС
4
Б
1 х
F
1
BС
3
Ташкент-6 х F
1
BС
2
С-6524 х F
1
BC
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum
x
G.
triphyllum)
и F
1
ВС
4
Ташкент-6 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х
F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
с вегетационным периодом 105-112 дней.
У гибридных комбинаций F
2
BC
3
С-9070 х F
1
ВC
2
С-6524 х F
1
ВC
1
108-Ф х
F
1
С-6524 х
G. sturtii
и F
2
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
(F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) х С-6524 наблюдался высокий выход волокна (37,8-39,1 %) с
длиной 34,4-34,5 мм.
Пятая глава диссертации
«Оценка линий и семей хлопчатника на
скороспелость,
однородность
и
вилтоустойчивость
на
основе
молекулярных маркеров»
посвящена определению молекулярных маркеров
по основным хозяйственно-ценным признакам у линий и семей хлопчатника.
Отбор генотипов вели на уровне семенного материала по заранее
смаркированным признакам, поскольку семена являются фиксированной
стадией развития растений и обладают всеми признаками будущего
организма. Кроме того, качественная характеристика белков и ферментов в
семенах не зависит от факторов окружения.
Маркеры определялись в биологическом питомнике, селекционном
питомнике 1 и 2 года и питомнике размножения. Из рисунка 2 видно, что в
биологическом питомнике количество маркеров по скороспелости,
однородности и толерантности к вилту составляет 79,2 %; 66,7 %; 83,3 %
соответственно.
В
селекционном
питомнике 1-года маркеры по
скороспелости были обнаружены у всех линий, а по однородности и
толерантности к вилту 75,0 % и 91,7 %. В селекционном питомнике 2-года у
всех линий имелись маркеры по скороспелости и толерантности к вилту, а по
однородности – 88,9 %. Анализ наличия маркеров в питомнике размножения
показал, что все линии имели маркеры по изученным признакам (рис. 2). Это
говорит о том, что по мере увеличения селекционного уровня повышается
эффективность отбора по хозяйственно-ценным признакам.
Результаты исследований показали, что проведение селекционной работы на
основе биохимических маркеров позволяет определить генетическую
выравненность селекционного материала на более ранних поколениях, что
даст возможность уменьшить объем селекционной работы, а также сократить
сроки выведения новых перспективных семей, линий и
39
Рис. 2. Наличие молекулярных маркеров у изученных семей и линий, в
% (2015 г.)
Таблица 3
Толерантность линий к новым вирулентным вилтовым
популяциям (2015 г.)
№
Линии
V.dahliae
F.oxysporum
По фено
типу
По срезу
стебля
По фено
типу
По срезу
стебля
1. 5-2011
75,0
75,0
50,0
50,0
2.
3-2013
75,0
75,0
25,0
25,0
3.
Л-888
75,0
75,0
50,0
50,0
4.
Л-717
25,0
25,0
50,0
50,0
5.
Л-661
50,0
50,0
25,0
25,0
6.
Л-89
50,0
50,0
25,0
25,0
7.
Л-46
75,0
75,0
50,0
50,0
8. Л-554
75,0
75,0
25,0
25,0
9.
Л-1309
50,0
50,0
50,0
50,0
10. Л-1460
0,0
0,0
25,0
25,0
11. Л-1306
50,0
50,0
25,0
25,0
12. Л-932/1018
50,0
50,0
25,0
25,0
13. Л-1384
25,0
25,0
25,0
25,0
14. Л-2473
50,0
50,0
50,0
50,0
15. Л-149/987
0,0
0,0
50,0
50,0
16. Л-932
50,0
50,0
25,0
25,0
17. Л-459
50,0
50,0
25,0
25,0
40
сортов хлопчатника, обладающих высокой скороспелостью, толерантностью
к вилту и комплексом хозяйственно-ценных признаков.
Инокуляция растения-хозяина патогенами грибов
V.dahliae
Kleb. и
F.oxysporum
показала, что среди изученных линий хлопчатника наиболее
толерантными к моноспоровому изоляту
F.oxysporum
оказались семья 3- 2013,
а также линии Л-661, Л-554, Л-1460, Л-1306, Л-932/1018, Л-1384, Л-932 и
Л-459, которые поражались данным патогеном на 25,0 %. Установлено, что
линии Л-1460 и Л-149/987 не поражались патогеном
V.dahliae
, а линии Л
1384 и Л-717 заболевали на 25%. Остальные все изучаемые линии оказались
сильно восприимчивыми к данному патогену (табл. 3).
Анализ результатов показал, что высокая толерантность ко всем
изученным патогенным вилтовым грибам (
V.dahliae
и
F.oxysporum
) была
обнаружена у линий Л-717, Л-661, Л-89, Л-1460, Л-1306, Л-932/1018, Л-1384,
Л-149/987, Л-932 и Л-459.
В шестой главе
«Практические результаты исследований»
приведены
хозяйственно-ценные признаки созданных сортов и линий хлопчатника,
которые были созданы в результате проведения научно-исследовательских
работ. В частности, были выведены сорта вида
G. hirsutum
L. Истиклол-13,
Истиклол-14, СУ-1001, Мангит-1, Мангит-2, С-2118, С-2119 и ряд
перспективных линий хлопчатника.
Сорт хлопчатника Истиклол-13 выведен методом синтетической
селекции с применением сложной гибридизации гибридных комбинаций
(Акала-1517 x С-4896) х (С-5617 х Ташкент-6) и многократного
индивидуального отбора. Высота растения 100-115 см, устойчив к
вертициллезному увяданию. Скороспелость – 116-121 дней, волокно IV-типа,
выход 37-40 %, длина 33,5-34,0 мм, удельная разрывная нагрузка 28-29
гс/текс, средняя длина 1,17 дюйм, показатель микронейра 4,2-4,4. Масса
сырца одной коробочки 5,5-6,0 г., масса 1000 штук семян 116-122 г. При
хорошей агротехнике даѐт урожай 40,0-46,0 ц/га.
Сорт Истиклол-14 выведен методом синтетической селекции с
применением сложной гибридизации и многократного индивидуального
отбора: (Акала 1517 x С-4896) х (С-5617 х Ташкент-6). Высота растения 100-
125 см, устойчив к вертициллезному увяданию. Скороспелость – 115-117
дней, волокно IV-типа, выход 37-38 %, длина 34-35 мм, удельная разрывная
нагрузка 28-29 гс/текс, средняя длина 1,20 дюйм, показатель микронейра 3,9-
4,4. Масса сырца одной коробочки 6,0-6,4 г., масса 1000 штук семян 110-115
г. При хорошей агротехнике даѐт урожай 45,0 ц/га. С 2013 года признан
перспективным, а с 2015 года был районирован по Андижанской области. С
2015 года признан перспективным по Сурхандарьинской области. В 2015
году высевался в Андижанской области на общей площади 283 гектара.
Сорт СУ-1001 выведен методом синтетической селекции с применением
сложной гибридизации из гибридной комбинации F
4
(Л-26 х Л-244) и
41
многократного индивидуального отбора из семьи 153. Высота растения 115-
125 см, устойчив к вертициллезному увяданию. Скороспелость – 116-118
дней, волокно IV-типа, выход 38-39 %, длина 34-35 мм, удельная разрывная
нагрузка 30-32 гс/текс, средняя длина 1,15 дюйм, показатель микронейра 4,3-
4,5. Масса сырца одной коробочки 5,3-5,5 г., масса 1000 штук семян 108-110
г. При хорошей агротехнике даѐт урожай 44,0-45,0 ц/га. В 2012 году был
получен патент № NAP 00111.
Сорт Мангит-1 выведен методом аналитической селекции с
применением многократного индивидуального отбора из популяции сорта
Умид в условиях Амударьинского района Республики Каракалпакстан.
Высота растения 100-110 см, устойчив к почвенному засолению и
вертициллезному увяданию. Скороспелость – 115-117 дней, волокно V-типа,
выход 36-38 %, длина 33-34 мм, удельная разрывная нагрузка 33,4 гс/текс,
средняя длина 1,10 дюйм, показатель микронейра 4,4-4,5. Масса сырца одной
коробочки 5,7-6,0 г., масса 1000 штук семян 112-116 г. При хорошей
агротехнике даѐт урожай 37,0-39,0 ц/га. На данный момент находится на
испытании в системе ГСИ.
Сорт Мангит-2 выведен методом аналитической селекции с
применением многократного индивидуального отбора из популяции сорта
Истиклол-14. Высота растения 100-125 см, устойчив к почвенному
засолению и вертициллезному увяданию. Скороспелость – 117-120 дней,
волокно IV-типа, выход 37,0-37,5 %, длина 34,5-35,0 мм, удельная разрывная
нагрузка 27,7-28,2 гс/текс, средняя длина 1,24 дюйм, показатель микронейра
4,3. Масса сырца одной коробочки 5,7 г., масса 1000 штук семян 111-114 г.
При хорошей агротехнике даѐт урожай 37,5-42,0 ц/га.
Сорт С-2118 выведен методом аналитической селекции с применением
многократного индивидуального отбора из популяции сорта Истиклол-14.
Высота растения 120-125 см, устойчив к вертициллезному увяданию.
Скороспелость – 119-120 дней, волокно IV-типа, выход 33,0-35,0 %, длина
36,0-37,0 мм, показатель микронейра 4,1. Масса сырца одной коробочки 6,0
г., масса 1000 штук семян 123-124 г. При хорошей агротехнике даѐт урожай
35,0-37,0 ц/га.
Сорт С-2119 выведен методом аналитической селекции с применением
многократного индивидуального отбора из популяции сорта Истиклол.
Высота растения 100-125 см, устойчив к вертициллезному увяданию.
Скороспелость – 120-121 дней. Волокно IV-типа, выход 39,0-40,0 %, длина
33,5-34,0 мм, удельная разрывная нагрузка 32,2 гс/текс, средняя длина 1,23
дюйм, показатель микронейра 4,4-4,5. Масса сырца одной коробочки 5,6 г.,
масса 1000 штук семян 118-120 г. При хорошей агротехнике даѐт урожай
38,0-40,0 ц/га.
42
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
На основе проведенных исследований по докторской диссертации на
тему «Создание скороспелых, высокопродуктивных сортов и линий
хлопчатника вида
G. hirsutum
L. на основе новых методов селекции»
представлены следующие выводы:
1. Установлено, что у всех изученных сортов каллусные клетки,
выращенные из гипокотиля хлопчатника, хорошо индуцируются на среде
Мурасиге-Скуга с содержанием низких концентраций ауксинов, дальнейшее
же их субкультивирование необходимо проводить без фитогормонов.
Соматический эмбриоидогенез удаѐтся получить на каллусных клетках
эмбриогенноспособного сорта Coker-312 только в условиях суспензионной
среды при двухкратном субкультивировании с дальнейшим переводом клеток
на агаризованную морфогенную среду без фитогормонов, а соматические
эмбриоиды на искусственной питательной среде переходят к автономному
развитию со стадии «лотос», когда в их структуре наблюдаются хорошо
развитые проводящие ткани.
2. Показано, что в условиях засоления до 1,0 % NaCl наблюдается
индукция каллусогенеза из гипокотиля хлопчатника, дальнейшее же
повышение концентрации NaCl ингибирует каллусогенез. В суспензионных
условиях
каллусные
клетки
хлопчатника
способны
выдерживать
концентрацию NaCl до 2,0 %. Несмотря на это в суспензионной среде (1,4-2,0
%)
встречаются
отдельные
клетки,
сохранившие
нормальную
морфологическую структуру и способность к делению.
3. Отмечено, что из способов культивирования – суспензионный даѐт
возможность отселектировать клетки, устойчивые к значительно высоким
концентрациям засоления и получения клеточных линий хлопчатника, а при
пересадке устойчивых клеточных линий на морфогенную агаровую среду,
последние способны восстановить свою прежнюю морфологическую
структуру, однако, при длительном субкультивировании они не переходят к
морфогенному развитию.
4. Была разработана схема получения амфидиплоидов хлопчатника и их
беккросс-потомства, при помощи которой триплоидный амфидиплоид можно
получить: а) использованием экзогенных фитогормонов; б) через культуру
in
vitro
недозрелых зародышей; в) через культуру
in vitro
оплодотворенных
семяпочек.
5. Показано, что при первом беккроссировании гексаплоидных
амфидиплоидов с сортами культурных видов экзогенные фитогормоны
способствуют образованию дифференцированных на осевые органы
недозрелых зародышей. Такое явление было отмечено при беккроссировании
амфидиплоидов F
14
G. hirsutum
L. x
G. aridum
Skov., F
1
G. hirsutum
L. х
G.
raimondii
Ulbr., F
1
G. hirsutum
L. x
G. sturtii
F.Muell
.
и F
1
G. hirsutum
L. x
G.
43
anomalum
Waw., F
12
G. hirsutum
L. x
G. triphyllum
Horch. Первое беккросс
поколение данных амфидиплоидов было получено методом эмбриокультуры,
а второе и третье беккросс-поколение – при свободном скрещивании.
6. Выявлено, что высокая устойчивость к вилту наблюдалась у
гибридных популяций F
1
ВС
4
С-6524 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) и F
1
ВС
4
Ташкент-6 х F
1
ВС
3
Ташкент-6 х
F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum
x
G. triphyllum)
, которые
заболевали в общей степени на 2 % и у гибридной популяции F
1
ВС
4
Ташкент 6
х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(С-6524 х
G. sturtii
), которая
заболевала в общей степени на 3 %. В сильной степени поражения
обнаружено не было. Отмечена высокая скороспелость у гибридных
популяций F
1
BС
4
Б-1 х F
1
BС
3
Ташкент-6 х F
1
BС
2
С-6524 х F
1
BC
1
108-Ф х F
12
(
G.
hirsutum
x
G. triphyllum)
и F
1
ВС
4
Ташкент-6 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х
F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
, вегетационный период которых
длился 105-112 дней. Выделены гибридные комбинации F
2
BC
3
С-9070 х
F
1
ВC
2
С-6524 х F
1
ВC
1
108-Ф х F
1
С-6524 х
G. sturtii
и F
2
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
(F
1
ВС
1
108-Ф х F
14
Deltapine-80
х
G. aridum
) х С-6524, с высоким выходом
37,8-39,1 % и длиной волокна 34,4-34,5 мм.
7. Изучение беккросс поколений амфидиплоидов позволило выявить
наиболее ценные формы, сочетающие в себе не только повышенную
вилтоустойчивость, но и высокую урожайность со скороспелостью и
хорошими показателями выхода и качества волокна, которые были доведены
до линейного состояния.
8. Установлено, что в биологическом питомнике по однородности
сложные гибриды характеризуются высокой гетерозиготностью. Хотя по
фенотипическому проявлению хозяйственных признаков другие семьи
показали относительную однородность. В селекционном питомнике 1 и 2
года все изученные линии имеют маркерные гены по скороспелости и
вилтоустойчивости, за исключением линии Л-517. По однородности
морфобиологических признаков не имеют маркеров линии Л-17, Л-89, Л-517
и Л-1642, хотя по морфобиологическим показателям они показывают
относительно высокую выравненность. Это, по-видимому, связано с
элиминацией некоторых признаков, которые находятся в скрытом дискретном
состоянии и не дают фенотипического проявления.
9. Отмечено, что изученные гибридные семьи по скороспелости, в
основном, занимают промежуточное положение между скороспелыми
родительскими формами и относительно позднеспелыми линиями и сортами.
Следует отметить, что трансгрессивных семей по скороспелости не
получено, хотя имеются позднеспелые семьи, у которых вегетационный
период более продолжительный, чем у относительно позднеспелых
родителей.
10. Выявлено, что вилтоустойчивость линий при инокуляции растения-
44
хозяина вирулентным изолятом гриба
V.dahliae
контролируется разными
системами генов, и подразделяются на реакцию сверхчувствительности;
полевую или горизонтальную устойчивость; толерантную устойчивость, у
которых при внедрении в организм растения-хозяина гриба вертициллиум не
проявляется
внешних
симптомов
болезни
или
имеется
слабое
фенотипическое проявление на листьях, что не влияет на урожайность и
качество волокна.
11. Установлено, что к концу августа только линии Л-1460 и Л-149/987
не поражались патогеном
V.dahliae
, а линии Л-1384 и Л-717 заболевали на 25
%. Остальные все изучаемые линии оказались сильно восприимчивыми к
данному патогену. Наиболее толерантными к моноспоровому изоляту
F.oxysporum
оказались семья 3-2013, а также линии Л-661, Л-554, Л-1460, Л
1306, Л-932/1018, Л-1384, Л-932 и Л-459. Определена высокая толерантность
к изученным патогенным вилтовым грибам –
V.dahliae
и
F.oxysporum,
у
линий Л-717, Л-661, Л-89, Л-1460, Л-1306, Л-932/1018, Л-1384, Л-149/987, Л
932 и Л-459.
12. В лабораторных опытах, среди 17 изученных линий хлопчатника
выявлено, что 7 линий, в частности, Л-89, Л-1384, Л-888, Л-661, Л-46, Л-5-
2011, Л-3-2013 являются высоко толерантными к изученным вилтовым
патогенам.
13. При разработке методов соматического эмбриоидогенеза для сортов
вида
G. hirsutum
L. каллусные клетки необходимо индуцировать в среде МС с
2,4-Д (0,1 мг/л). Для получения клеточных линий
G. hirsutum
L., устойчивых
к хлоридному засолению, клеточную селекцию в суспензионной среде можно
начинать с 1,0; 1,5 и 2,0 % NaCl.
14. Для получения растений с удвоенным числом хромосом
предлагается до посадки в грунт замачивать корешки проростков растений на
1-2 ч. в 0,05-0,1%-ных растворах колхицина. Таким способом нами были
получены гексаплоидные амфидиплоиды F
1
108-Ф(
G. hirsutum
L.) х
G.
raimondii
Ulbr., F
1
108-Ф(
G. hirsutum
L.) х
G. sturtii
F.Muell.
15. Селекционную работу необходимо проводить на основе
биохимических и молекулярных маркеров, что позволит определить
генетическую выравненность селекционного материала в более ранних
поколениях и будет способствовать более эффективному отбору
генотипически выравненных семей и линий. Этим самым появится
возможность уменьшения объема селекционной работы, а также сокращения
сроков выведения новых перспективных семей, линий и сортов хлопчатника,
обладающих высокой скороспелостью, вилтоустойчивостью и комплексом
хозяйственно-ценных признаков.
16. В дальнейших исследованиях предлагаем селекционерам проводить
исследования по выведению устойчивых к комплексным вилтовым патогенам
V.dahliae
и
F.oxysporum
сортов хлопчатника с учетом их
45
неоднородности в патогенезе растений, с такими высоко толерантными
линиями как Л-717, Л-661, Л-89, Л-1460, Л-1306, Л-932/1018, Л-1384, Л
149/987, Л-932 и Л-459.
17. Созданные в результате проведения исследований линии Л-375, Л
278 и Л-2743 рекомендуется передать для испытаний в Грунтконтроль при
Государственной сортоиспытательной комиссии, а также увеличить посевные
площади районированного сорта Истиклол-14, а выведенные сорта Мангит-1
и С-2118 рекомендуем испытать в более широких производственных
масштабах.
46
SCIENTIFIC COUNCIL AWARDING OF THE SCIENTIFIC DEGREES
DSc.27.06.2017.Qx.13.01
AT THE TASHKENT STATE AGRARIAN
UNIVERSITY AND ANDIJAN AGRICULTURAL INSTITUTE
SCIENTIFIC-RESEARCH INSTITUTE OF BREEDING, SEEDING AND
AGRICULTURE OF COTTON GROWING
RAKHMANKULOV MUROD SAID-AKBAROVICH
DEVELOPING OF EARLY MATURED, HIGHLY PRODUCTIVE
COTTON VARIETIES AND LINES OF THE SPECIES
G. HIRSUTUM
L.
ОN THE BASE OF NEW METHODS OF BREEDING
06.01.05 - Selection and seed-growing
DISSERTATION ABSTRACT OF DOCTORAL DISSERTATION (DSc)
ON AGRICULTURAL SCIENCES
TASHKENT – 2017
47
The theme of doctoral dissertation (DSc) was registered at the Supreme Attestation
Commission at the Cabinet of Ministers of the Republic of Uzbekistan under number
B2017.1.DSc/Qx2
The doctoral dissertation has been prepared at the Research Institute of Breeding, Seed
Growing and Agricultural Technology of Cotton Growing.
The abstract of the dissertation is posted in two languages (Uzbek, Russian) on the website
www.agrar.uz and an the webside of “ZiyoNet” Information and educational portal
www.ziyonet.uz.
Scientific consultant:
Kim Robert
Grigoryevich,
doctor of agricultural sciences
Official opponents:
Rizaeva Safiya Mamedovna,
Doctor of biological sciences, professor
Ergashov Ibrokhim Toshkenovich,
doctor of agricultural sciences, professor
Massino Igor Vsevolodovich,
doctor of agricultural sciences, professor
Leading organization:
National University of Uzbekistan named after M. Ulugbek
The defense will take place “19” july 2017 at 10
00
at the meeting of Scientific council No.
DSc.27.06.2017.Qx.13.01 at
the Tashkent state agrarian university and Andijan agricultural
institute
(Address: 100140, Tashkent, Universitetskaya street, 2. Phone: (99871) 260-48-00, fax:
260-38-60, e-mail: tuag-info@edu.uz).
The doctoral dissertation can be reviewed at the Information Resourse Centre of the
Tashkent state agrarian university
(is registered under No. 532680). Address: 100140, Tashkent,
Universitetskaya street, 2. Phone: (99871) 260-50-43, fax: (99871) 260-48-00.
Abstract of dissertation sent out on “07” july 2017 y.
(mailing report No. 1.1 on “06” july 2017 y.).
B.A.Sulaymonov
Chairman of the scientific council awarding
scientific degrees, doctor of agricultural
sciences, professor
Y.X.Yuldashov
Scientific secretary of the scientific council
awarding scientific degrees, candidate of
agricultural sciences
M.M.Adilov
Chairman of the academic seminar under the
scientific council awarding scientific degrees,
doctor of agricultural sciences
INTRODUCTION (abstract of DSc thesis)
The urgency and relevance of the dissertation topic.
To date, in the
development of cotton growing, great attention has been paid to the developing
high-yield, high-quality fiber, early-ripening cotton varieties tolerant to
unfavorable environmental factors. In the world, 75% of cotton production is in 5
countries – China, USA, India, Pakistan and Uzbekistan. According to the
International Cotton Advisory Committee (ICAC) in 2017, cotton production will
increase by 4% to 23 million tons, and sown areas – by 1% to 31,3 million
hectares. It is also expected to increase the yield of raw cotton by 4% and will be
732 kg per hectare.
The aim of the research work
is to study the effect of selective media with
NaCI on callus cells, the production of amphidiploids by non-traditional selection
methods, the detection of relatively homozygous families and lines using
molecular tests, and the developing of varieties with early maturity and a set of
high volume economically valuable traits.
The tasks of research:
Selection of optimal doses of phytohormones in an agarized nutrient medium
for intensive isolation of callus from cotton tissues and study of somatic
embryoidogenesis
in vitro
; determination of the effect of selective media with
different degrees of chloride salinity on the growth and development of callus cells
of cotton; determination of the degree of resistance of cells to stress factors on
salinity of NaCl; obtaining cotton amphidiploids and their backcross progeny, as
well as studying economically valuable characteristics and technological
parameters of fiber in backcross generations of amphidiploids; determination of
molecular markers for homogeneity, early maturity and tolerance to wilt; the study
of tolerance to wilt of new cotton lines when inoculating the host plant with more
virulent pathogens of fungi
Verticillium dahliae
Kleb. и
Fusarium oxysporum
f. sp
.
vasinfectum
(Atk.) Snyder et. Hansen
; the developing of early-ripening, cotton
tolerant varieties and lines of cotton with the application of new selection methods
with a set of economically valuable traits.
The object of the research work
was the cotton variety of the American
selection Coker-312 and local varieties C-6524, C-4727, and also backcross
hybrids. Amphidiploids were obtained between distant heterochromic tetraploid
and diploid species. To produce complex backcross hybrids, we used variety Omad,
C-6530, C-8284, and lines L-030, LS-485, LS-489, LS-6592, LS-6593, LS
6594, LS-6595, LS- 6596, LS-6598, LS-484.
Scientific novelty of the research work
is as follows: cell selection was
carried out on callus cells in selective media with NaCl and a method for
laboratory evaluation of the selection material for resistance to chloride
salinization
in vitro
was developed; by the method of embryo culture a scheme for
obtaining amphidiploids was developed; amphidiploids were obtained between
distant heterochromosome species
G. hirsutum
L.,
G. raimondii
Ulbr.,
G. thurberi
Tod.,
G. anomalum
Waw.,
G. sturtii
F.Muell.,
G. davidsonii
Kell.,
G. harknessii
Brand. and their backcrossing with the participation of species
G. sturtii
F.Muell.,
G. raimondii
Ulbr.,
G. harknessii
Brand.,
G. aridum
Skov.,
G. triphyllum
Horch.;
49
on the base of molecular markers, early-maturing, genetically tolerant families and
lines of cotton were tolerated to the wilt and genotypically homogeneous; on the
basis of inoculation of the host plant with monosporous isolates
V.dahliae
and
F.oxysporum
, new cotton lines were developed, which possess high early maturity,
yield, complex tolerance to wilt infection.
The outline of the thesis.
Based on the conducted research on the doctoral
thesis on the theme «Creation of early ripening, highly productive varieties and
lines of the cotton of the species
G. hirsutum
L. on the basis of new methods of
selection» the following conclusions are presented:
It is established that in all studied varieties callus cells grown from the cotton
hypocotyl are well induced on the Murashige-Skuga medium with a low
concentration of auxins, further subcultivation must be carried out without
phytohormones. Somatic embryoidogenesis can be obtained on callus cells of
embryogenic variety Coker-312 only under conditions of a suspension medium
with two-fold subcultivation with further transfer of cells to an agarized
morphogenic environment without phytohormones, and somatic embryoids on an
artificial nutrient medium go to autonomous development from the lotus stage,
Their structure shows well-developed conductive tissues. It is shown that in
conditions of salinity up to 1,0% NaCl, induction of callusogenesis from the cotton
hypocotyl is observed, further increase in the NaCl concentration inhibits
callusogenesis. Under suspension conditions, cotton callus cells are able to
withstand a NaCl concentration of up to 2,0%. Despite this, in the suspension
medium (1,4-2,0%) there are separate cells that retain a normal morphological
structure and the ability to divide. It is noted that from the cultivation methods - the
suspension method makes it possible to select cells that are resistant to
significantly high salinity and cotton cell lines, and when transplanting resistant
cell lines onto a morphogenic agar medium, the latter are able to restore their
former morphological structure, however, with prolonged subculture, they do not
go to morphogenic development.
A scheme was developed for obtaining amphidiploids of cotton and their
backcross progeny, by means of which a triploid amphidiploid can be obtained: a)
using exogenous phytohormones; b) through in vitro culture of immature embryos;
c) through in vitro culture of fertilized ovules. It is shown that during the first
backcrossing of hexaploid amphidiploids with cultivar species, exogenous
phytohormones contribute to the formation of immature embryos differentiated
into axial organs. This phenomenon was noted in backcrossing of amphidiploids
F
14
G. hirsutum
L. x
G. aridum
Skov., F
1
G. hirsutum
L. x
G. raimondii
Ulbr., F
1
G.
hirsutum
L. x
G. sturtii
F.Muell. and F
1
G. hirsutum
L. x
G. anomalum
Waw., F
12
G.
hirsutum
L. x
G. triphyllum
Horch. The first backcross-generation of these
amphidiploids was obtained by embryo culture, and the second and third backcross
generations - by free crossing. It was found that the high resistance to wilt was
observed in hybrid populations F
1
ВС4С-6524 х F
1
ВС3С-6524 х F
1
ВС2С-6524 х
F
1
ВС
1
(108-Ф х F
14
Deltapine-80 х
G. aridum
) and F
1
ВС
4
Tashkent-6 х
F
1
ВС
3
Tashkent-6 х F
1
ВС
2
С-6524 x F
1
ВС
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum
x
G.
triphyllum)
, which fell in the general degree by 2% and in the hybrid population
F
1
BC
4
Tashkent- F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
(С-6524 х
G. sturtii
),
50
which fell in the general degree by 3%. In a strong degree, no lesions were found.
The high early ripeness in the hybrid populations F
1
BС
4
B-1 х F
1
BС
3
Tashkent-6 х
F
1
BС
2
С-6524 х F
1
BC
1
108-Ф х F
12
(
G. hirsutum
x
G. triphyllum
) and
F
1
ВС
4
Ташкент-6 х F
1
ВС
3
С-6524 х F
1
ВС
2
С-6524 х F
1
ВС
1
108-Ф x F
14
Deltapine
80 x
G. aridum
, the vegetative period of which lasted 105-112 days. Hybrid
combinations F
2
BC
3
C-9070 x F
1
BC
2
C-6524 x F
1
BC
1
108-F x F
1
C-6524 x
G. sturtii
and F
2
BC
3
C-6524 x F
1
BC
2
(F
1
BC
1
108-F x F
14
Deltapine-80 x
G. aridum
) x C-6524
were isolated with a high yield of 37,8-39,1%, and a fiber length of 34,4-34,5 mm.
The study of the backcrossing of the generations of amphidiploids made it possible
to identify the most valuable forms, combining not only increased viticulture, but
also high productivity with early maturity and good fiber yield and quality
indicators, which were brought to a linear state.
It has been established that in a biological nursery by homogeneity complex
hybrids are characterized by high heterozygosity. Although the phenotypic
manifestation of economic characteristics, other families showed relative
homogeneity. In the breeding nursery 1
st
and 2
nd
years, all the lines studied have
marker genes for earlyness and fork resistance, except for the L-517 line. Due to
the homogeneity of the morphobiological features, the L-17, L-89, L-517 and L
1642 line markers do not have markers, although they show a relatively high level
of morphology. This, apparently, is associated with the elimination of certain
features that are in a latent discrete state and do not give a phenotypic
manifestation. It is noted that the studied hybrid families in early maturity, in
general, occupy an intermediate position between early maturing parental forms
and relatively late-ripening lines and varieties. It should be noted that there are no
transgressive families for precociousness, although there are late-ripening families
with a longer vegetation period than relatively late-maturing parents. It was found
that the vitreous stability of the lines when the host plant is inoculated with a
virulent
V. dahliae
fungus isolate is controlled by different systems of genes, and is
subdivided into a hypersensitivity reaction; field or horizontal stability; tolerant
resistance, which when introduced into the div of the host plant fungus
Verticillium
does not manifest external symptoms of the disease or there is a weak
phenotypic manifestation on the leaves, which does not affect the yield and fiber
quality. It was found that by the end of August, only the L-1460 and L-149/987
lines were not affected by the pathogen
V.dahliae
, while the L-1384 and L-717
lines were 25% diseased. The rest of all the lines studied were highly susceptible to
this pathogen. The family of 3-2013, as well as L-661, L-554, L-1460, L-1306, L
932/1018, L-1384, L-932 and L-459 were the most tolerant to the monospaced
isolate of
F.oxysporum
. A high tolerance to the studied pathogenic wilt fungi,
V.dahliae
and
F.oxysporum
, was identified in the lines L-717, L-661, L-89, L 1460,
L-1306, L-932/1018, L-1384, L -149/987, L-932 and L-459. In laboratory
experiments, among the 17 cotton lines studied, it was revealed that 7 lines, in
particular, L-89, L-1384, L-888, L-661, L-46, L-5-2011, L-3-2013 are highly
tolerant to the studied wilt pathogens.
When developing methods for somatic embryoidogenesis for varieties of the
species
G. hirsutum
L., callus cells need to be induced in MS medium with 2,4-D
(0,1 mg / l). To obtain
G. hirsutum
L. cell lines resistant to chloride salinity, cell
51
selection in a suspension medium can begin with 1,0; 1,5 and 2,0% NaCl. To
obtain plants with a doubled number of chromosomes, it is proposed to soak the
rootlets of plant seedlings 1-2 hours in 0,05-0,1% solutions of colchicine before
planting in the soil. In this way we obtained hexafloid amphidiploids F
1
108-F (
G.
hirsutum
L.) x
G. raimondii
Ulbr., F
1
108-F (
G. hirsutum
L.) x
G. sturtii
F.Muell.
Breeding work should be carried out on the base of biochemical and molecular
markers, which will allow to determine genetic equalization of breeding material in
earlier generations and will facilitate more efficient selection of genotypically
aligned families and lines. This will make it possible to reduce the amount of
selection work, as well as shorten the time for the withdrawal of new promising
families, cotton lines and varieties with high early maturity, viticultural stability
and a set of economically valuable traits. In further studies, we suggest to breeders
to carry out studies on breeding varieties of cotton resistant to complex wilt
pathogens
V.dahliae
and
F.oxysporum
, taking into account heterogeneity in the
pathogenesis of plants, with such highly tolerant lines as L-717, L-661, L-89, L -
1460, L-1306, L-932/1018, L-1384, L-149/987, L-932 and L-459. The lines L-375,
L-278 and L-2743 created as a result of the research are recommended to be
transferred for testing to field testing at the State Variety Testing Commission, and
also to increase the cultivated areas of the Istiqlol-14, and the cultivated Mangit-1
and C-2118 varieties are recommended to test on a wider production scale.
52
ЭЪЛОН ҚИЛИНГАН ИШЛАР РЎЙХАТИ
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
LIST OF PUBLISHED WORKS
I бўлим (I часть, I part)
1. Рахмонкулов С., Азизходжаев А., Даминова Д.М., Рахманкулов М.С.
Нетрадиционные методы в селекции хлопчатника (монография). Т., “Фан”,
2009. 240 с.
2. Рахманкулов М.С. Индуцирование каллусных клеток хлопчатника из
гипокотилей стеблей. Ўзбекистон биология журнали. № 1, «Фан», Т., 1999,
69-70 б. (06.00.00; № 3).
3. Азизходжаев А., Рахманкулов М.С. Автономность соматических
зародышей хлопчатника. «Вестник Россельхозакадемии». М., 2001, № 2, С.
36-37. (06.00.00; № 12).
4. Рахманкулов М.С., Норматов Б., Рахмонкулов С., Сунатов Б. Янги ғўза
тизмаларининг баъзи хусусиятларини ўрганиш. Ўзбекистон аграр фани
хабарномаси. № 4, 2004. 7-10 б. (06.00.00; № 7).
5. Рахмонкулов С., Рахманкулов М.С., Жалолов Х. “Истиқлол-14” ғўза
нави. “Ўзбекистон қишлоқ хўжалиги” Ж., Т., № 12, 2014, 19-20 б. (06.00.00;
№ 4).
6. Рахманкулов М.С. Изучение формирования соматических эмбриоидов
из солеустойчивых клеточных линий хлопчатника. «Аграрная наука» Ж., М.,
№ 7, 2015, С. 26-28. (06.00.00; № 1).
7. Рахманкулов М.С., Ким Р.Г., Мирахмедов М.С., Ким М.Р., Янькина А.,
Марупов А., Турамуратова Г., Мамбетназаров А. Изучение устойчивости
линий хлопчатника при инокуляции растения-хозяина новым вирулентным
патогеном гриба
F.oxysporum
. “Агроилм” Ж., Т., № 4, 2015, 16-17 б. (06.00.00;
№ 1).
8. Рахманкулов М.С., Рахмонкулов С., Тешаев Ш.Ж., Юлдашев А.Р.,
Ниятуллаев Ф.А. Новый сорт средневолокнистого хлопчатника Мангит-1,
созданный в условиях Республики Каракалпакстан. Вестник Каракалпакского
отделения Академии наук Республики Узбекистан. Нукус, 2016, № 1. С. 69-
71. (06.00.00; № 9).
9. Рахмонкулов С., Рахманкулов М.С., Юлдашев Р.Ю., Юлдашев А.Р.,
Жалолов Х.Х. Янги ўрта толали «Манғит-2» ғўза навининг хўжалик ва сифат
кўрсаткичлари. Вестник Каракалпакского отделения
Академии наук
Республики Узбекистан. Нукус, 2016, № 1. С. 71-74. (06.00.00; № 9).
10. Бабаев Я.А., Марупов А., Мирахмедов М.С., Рахманкулов М.С.
Тезпишар ва вилтга чидамли ғўза навлари селекцияси. “Агроилм” Ж., Т., №
4, 2016, 9-10 б. (06.00.00; № 1).
11. Рахманкулов М.С., Ким Р.Г., Шадманова А., Ахмедов Д.А., Исраилов
М., Бакирова А. Маркер ассоциированная селекция
.
“Агроилм” Ж., Т., № 6,
2016, С. 15-16. (06.00.00; № 1).
12. Рахманкулов М.С., Ким Р.Г., Шадманова А.Р., Бакирова А. Селекция
53
на скороспелость, вилтоустойчивость и однородность с использованием
маркерных тестов. Ўзбекистон аграр фани хабарномаси. № 3, 2016. 22-25 б.
(06.00.00; № 7).
II бўлим (II часть, II part)
13. Рахманкулов М.С. Ғўза ҳужайраларининг NaCl-лик селекцион
озуқада ўсиши. ЎзР Давлат тили ҳақидаги қонунининг 5 йиллигига
бағишланган ѐш олимларнинг биринчи илмий анжумани. Т., 1994, 51-52 б.
14. Рахманкулов М.С., Даминова Д. NaCl-лик селектив озуқани ғўза
ҳужайраларини ўсиши ва морфологиясига таъсири. Ғўза генетикаси,
селекцияси ва агротехникасининг муаммолари. Сб. науч. трудов. Т., 1995, С.
47-50.
15. Рахманкулов М.С. Зависимость индукции каллусных клеток
хлопчатника от концентрации фитогормонов в питательной среде. Қ/х
самарадорлигини ошириш – давр талаби. ЎзДЖТИ босмахонаси. Т., 1998, 97-
100 б.
16. Рахманкулов М.С. Биология культивируемых клеток хлопчатника
на селективных средах с NaCl. «Туркестан и этапы становления науки и
образования в Средней Азии и Казахстане». Труды Межд. научно-практ.
конф., Алматы, 2000, С. 85-86.
17. Рахманкулов М.С., Даминова Д., Рахмонкулов С. Влияние
селективных сред с хлоридным засолением на морфологию и биологию
каллусных клеток
G. hirsutum
. «Ғўза генетикаси, селекцияси, уруғчилиги ва
бедачилик масалалари тўплами». Илм. Мақ. Тўпл. Т., ЎзҒСУИТИ, 2002. С.
150-154.
18. Азизходжаев А., Даминова Д., Рахманкулов М.С. К проблеме
соматического
эмбриогенеза
и
клеточной
селекции
хлопчатника.
«Теоретические и практические основы и перспективы развития селекции и
семеноводства хлопчатника». Межд. науч.-прак. кон. Т., УзНИИССХ, 2002. С.
25-26.
19. Даминова Д.М., Рахманкулов М.С. Клеточная селекция
хлопчатника. «Состояние селекции и семеноводства хлопчатника и
перспективы еѐ развития» Халқ. илм.-амал. конф. матер. Т., 2006, 76-77 б.
20. Рахманкулов М.С. Соматический эмбриоидогенез хлопчатника.
«Состояние селекции и семеноводства хлопчатника и перспективы еѐ
развития» Халқ. илм.-амал. конф. матер. Т., 2006, 132-134 б.
21. Рахманкулов М.С. Каллусогенез и соматический эмбриоидогенез у
хлопчатника. «Состояние селекции и семеноводства хлопчатника и
перспективы еѐ развития» Халқ. илм.-амал. конф. матер. Т., 2006, 134-135 б.
22. Даминова Д.М., Рахманкулов М.С. Методы получения межвидовых
гибридов хлопчатника. «Современное состояние селекции и семеноводства
хлопчатника, проблемы и пути их решения» Халқ. илм.-амал. конф. матер. Т.,
2007, 29-31 б.
23. Рахманкулов М.С., Рахмонкулов С., Даминова Д.М. Ways of
developing plants in interspecific hibridization of cotton. «Cotton Science» konf.,
54
China, 2008, Vol. 20 Supplement, p. 52.
24. Рахманкулов М.С. Получение соматического эмбриоидогенеза у
хлопчатника. «Вавиловские чтения – 2008». Материалы межд. науч.-практ.
конф., посвящ. 95-летию Саратовского госагроуниверситета, 26-27 ноября
2008 г., Саратов, ИЦ «Наука», 2008, С. 35-36.
25. Рахмонкулов С., Азизходжаев А., Даминова Д., Рахманкулов М.С.
Культивирование
in vitro
недозрелых зародышей хлопчатника. «Вавиловские
чтения – 2008». Материалы межд. науч.-практ. конф., посвящ. 95-летию
Саратовского госагроуниверситета, 26-27 ноября 2008 г., Саратов, ИЦ
«Наука», 2008, С. 36-38.
26. Даминова Д.М., Рахмонкулов С., Рахманкулов М.С. Хозяйственно
ценные признаки и технологические свойства волокна у линий хлопчатника,
полученных на основе межвидовой гибридизации. “Ғўза, беда селекцияси ва
уруғчилиги” илмий ишлар тўплами (Г.С.Зайцев таваллудининг 120 йиллиги,
А.Д.Дадабоев, Л.Г.Арутюнова ва Г.Я.Губановлар таваллудининг 100
йиллигига бағишланади). Т., “Фан”, 2009, 105-111 б.
27. Рахмонкулов С., Даминова Д.М., Рахманкулов М.С., Жалолов Х.
Ўрта толали Истиқлол-14 ғўза навининг морфохўжалик ва сифат
кўрсаткичлари. “Ғўза, беда селекцияси ва уруғчилигини ривожланти ришнинг
назарий ҳамда амалий асослари” Республика илмий-амалий конф.тўплами №
30, Т., “Фан”, 2010, 182-185 б.
28. Кимсанбаев О.Х., Автономов В.А., Хужанов Ш., Хусанов Х.,
Амантурдиев Ш., Рахманкулов М.С. Новый сорт СУ-1001 хлопчатника вида
G. hirsutum
L. “Достижения генетики и селекции признаков скороспелости и
устойчивости сельскохозяйственных растений к биотическим факторам
среды”. Республиканская научно-практ. конф., посвящ. 100-летию акад.
С.С.Садыкова, Т., 2011, 53-55 б.
29. Рахманкулов С., Азизходжаев А., Даминова Д., Рахманкулов М.С.
Итоги исследований по биотехнологии хлопчатника, проводимые в
Узбекском научно-исследовательском институте селекции и семеноводства
хлопчатника. “Турли экстремал шароитларга бардошли ғўза ва беданинг янги
навларини яратишда генетик-селекцион услублардан фойдаланиш”. Респ.
илм-амал. конф. материаллари тўплами, Т., 2012 й. 15-16 ноябр, 41-46 б.
30. Ким Р.Г., Марупов А., Рахманкулов М.С., Мирахмедов М.С., Ким
М.Р., Турамуратова Г., Мамбетназаров А., Янькина А.А. Устойчивость новых
линий хлопчатника вида
G. hirsutum
L. при инокуляции растения-хозяина
вирулентным патогеном
F.oxysporum
. Труды XV Российско-корейской
научно-технической конференции. Екатеринбург, 2014, С. 43-46.
31. Ким Р.Г., Рахманкулов М.С., Мирахмедов М.С., Шадманова А.Р.,
Ким М.Р., Янькина А.А. Молекулярные маркеры в селекции хлопчатника.
Труды
XV
Российско-корейской
научно-технической
конференции.
Екатеринбург, 2014, С. 50-53.
32. Ким Р.Г., Рахманкулов М.С., Мирахмедов М.С., Ким М.Р., Янькина
А.А. Изучение сложных беккросс-гибридов F
4
на вилтоустойчивость и
основные хозяйственно-ценные признаки. “XXI аср фан ва технология
соҳасидаги устувор йўналишлар” VII Халқаро илмий конференция мақолалар
55
тўплами, Т., 2014, Т. 1, 298-302 б.
33. Ким Р.Г., Марупов А., Рахманкулов М.С., Мирахмедов М.С., Ким
М.Р., Турамуратова Г., Мамбетназаров А., Янькина А.А. Устойчивость новых
линий хлопчатника при инокуляции растения-хозяина новым вирулентным
изолятом гриба
Verticillium dahlia
Kleb. “XXI аср фан ва технология
соҳасидаги устувор йўналишлар” VII Халқаро илмий конференция мақолалар
тўплами, Т., 2014, Т. 1, 303-309 б.
34. Ким Р.Г., Шадманова А.Р., Рахманкулов М.С., Мирахмедов М.С.,
Ким М.Р., Янькина А.А. Эффективность использования маркерных тестов в
создании новых сортов и линий хлопчатника. “XXI аср фан ва технология
соҳасидаги устувор йўналишлар” VII Халқаро илмий конференция мақолалар
тўплами, Т., 2014, Т. 1, 346-350 б.
35. Рахманкулов М.С., Ким Р.Г., Шадманова А.Р., Ким М.Р., Янькина
А.А. Наличие маркеров по скороспелости и однородности новых линий вида
G. hirsutum
L
.
“Ўзбекистон пахтачилигини ривожлантириш истиқболлари”
Респ. илм-амал. анжуман матер., Т., 2014, 78-80 б.
36. Рахманкулов М.С., Ким Р.Г., Шадманова А.Р., Ахмедов Д., Исраилов
М., Ким М.Р., Бакирова А.А. Создание вилтоустойчивых сортов хлопчатника
вида
G. hirsutum
L. на основе молекулярных маркеров. «Конференция по
науке и технологиям СНГ-Корея 2015», посвящена 25-й годовщине
дипломатических отношений между Россией и Республикой Корея. М., 2015,
С. 50-53.
37. Ким Р.Г., Рахманкулов М.С., Марупов А., Ахмедов Д., Исраилов М.,
Ким М.Р., Мамарахимов Б.И., Бакирова А.А. Устойчивость новых линий
хлопчатника при инокуляции растений вирулентными патогенами
V.dahliae
,
F.oxysporum
и
F.verticillioides
. «Конференция по науке и технологиям СНГ
Корея 2015», посвящена 25-й годовщине дипломатических отношений между
Россией и Республикой Корея. М., 2015, С. 408-411.
38. Рахманкулов М.С., Ким Р.Г., Барнаева С.М. Скороспелость новых
линий хлопчатника вида
G. hirsutum
L., обладающих комплексом
хозяйственно-ценных признаков. «Современное экологическое состояние
природной
среды
и
научно-практические
аспекты
рационального
природопользования» I-международная научно-практическая Интернет
конференция. Астрахань, 2016, С. 2703-2708.
56
«Ўзбекистон қишлоқ хўжалиги» журналида таҳрирдан ўтказилди.
Босишга рухсат этилди: 06.07.2017 й.
Бичими 60х84
1
/
16
. Шартли босма табоғи 3,75
Буюртма рақами № 17
Адади: 100.
МЧЖ «Fan va ta’lim poligraf» босмахонасида чоп
этилди 100170, Тошкент шаҳар, Дўрмон йўли кўчаси,
24-уй
57
