ЎЗБЕКИСТОН РЕСПУБЛИКАСИ ФАНЛАР АКАДЕМИЯСИ
АКАДЕМИК О.С.СОДИҚОВ НОМИДАГИ БИООРГАНИК КИМЁ
ИНСТИТУТИ
Кўлёзма ҳуқуқида
УДК 577.15.632.7
ХОЛМУРАДОВ БАХТИЁР ҚАРШИБОЕВИЧ
ОЛМА ҚУРТИ
(LASPEYRESIA POMONELLA L.)
ВА МАККАЖЎХОРИ
ПАРВОНАСИ
(PYRAUSTA NUBILALIS Hb.)
НИНГ ЭСТЕРАЗА
ФЕРМЕНТЛАРИ ИНГИБИТОРЛАРИ ВА УЛАРНИНГ СИНЕРГЕТИК
ХУСУСИЯТЛАРИ
02.00.10
–Биоорганик кимё
Биология фанлари номзоди илмий даражасини
олиш учун диссертация
А В Т О Р Е Ф Е Р
А
Т И
Тошкент
- 2011
2
Диссертация
иши
Ўзбекистон Республикаси
Олий
ва
Ўрта
Махсус
таълим
Вазирлиги
Гулистон
давлат
университети
ва
Ўзбекистон
Республикаси
Фанлар Академиясининг
академик
О
.
С
.
Содиқов
номидаги
Биоорганик
кимё
институтида
бажарилган
.
Илмий раҳбар:
биология
фанлари
номзоди
,
доцент
Қўшиев
Ҳабибжон
Ҳожибобоевич
Расмий оппонентлар:
биология
фанлари
доктори
,
профессор
Хамраев Алауддин Шамсиддинович
биология
фанлари
номзоди
Содиқов Эркин Саодатович
Етакчи ташкилот:
Ўсимликларни ҳимоя қилиш илмий
текшириш институти
Диссертация ҳимояси 20
11
йил “
___
”
_________
куни соат
___
да
ЎзР
ФА
академик О.С.Содиқов номидаги Биоорганик кимё институти
қошидаги Д
015.21.01 рақамли Ихтисослашган Кенгаш мажлисида бўлиб
ўтади. Институт манзили
: 100125
, Тошкент шаҳри, Мирзо Улуғбек кўчаси,
83-
уй.
Тел.: (99871)
262-35-
40, факс: (99871) 262
-70-63.
Диссертация иши билан ЎзР
ФА академик
О.С.Содиқов номидаги
Биоорганик кимё институти кутубхонасида танишиш мумкин.
Автореферат 20
11
йил “
____
”____________да тарқатилди.
Ихтисослашган кенгаш
илмий котиби
кимё фанлари номзоди
М.Б.Гафуров
3
ИШНИНГ УМУМИЙ ТАВСИФИ
Мавзунинг долзарблиги.
Ҳашаротлар табиатда ҳайвонот дунёсининг
энг кўп тарқалган вакилларидир. Уларнинг 1500 дан ортиқ турлари фанга
маълум.
Дунё бўйича қишлоқ хўжалиги ўсимликлари ҳосилдорлигининг
33%дан кўпроқ қисми зараркунанда ҳашаротларга кимёвий тарзда қарши
кураш асосида сақланиб қолинади. Лекин зараркунанда ҳашаротларнинг
уларга қарши қўлланиладиган препаратларга нисбатан мослашиб қолиши
кимёвий препаратларнинг қўлланиш миқдорини
оширилишига сабаб
бўлмоқда. Бунинг оқибатида
атроф муҳитнинг
ифлосланиши ва иссиққонли
ҳайвонларнинг заҳарланиши, фойдали турларнинг йўқолиш ҳолатлари
кузатилмоқда.
Бугунги кунда буни олдини олиш билан боғлиқ ҳолда аниқ илмий
ечимлар қабул қилиш Жаҳон молиявий инқирози оқибатларининг
олдини
олишга муҳим бир туртки бўла олади. Жаҳон молиявий инқирозининг
олди
-
ни олишнинг асосий йўлларидан бири ишлаб чиқаришнинг барқарорлигини
таъминлаш ва уни ривожлантиришдан иборатдир. Бу республикамиз
Президенти И.А.Каримовнинг “Жаҳон молиявий инқирози. Ўзбекистон
шароитида уни бартараф этиш йўллари ва чоралари”
китобида кенг ёритиб
берилгандир. Айниқса, қишлоқ хўжалиги махсулотларини ишлаб чиқаришда
етиштири
-
лаётган ҳосилни зараркунанда ҳашаротлардан сақлаб қолиш, ушбу
соҳа билан боғлиқ ҳолда юзага келиши мумкин бўлган молиявий
инқирознинг олдини
олишда муҳим бир асос бўла олади.
Бу билан боғлиқ холда
ҳашаротларнинг холинэстераза
(ХЭ) ва
карбоксилэстераза (КБЭ)
ферментларининг субстрат
-
ингибитор хоссаларини
ўрганиш ҳам назарий, ҳам амалий жиҳатдан муҳим аҳамиятга эга. Чунки ХЭ
фосфорорганик бирикмалар
(
ФОБ
)
ва карбаматларнинг инсектицидлик
таъсир нишони бўлса, КБЭ ва шу каби метаболитик ферментлар инсектицид
-
ларни парчалаб, таъсир этиш миқдорини камайтиради. Эстераза фермент
-
ларининг бундай хусусиятлари зараркунанда ҳашаротларга қарши
танлаб
таъсир этувчи инсектицидларни яратишга асос бўлиши мумкин.
Муаммонинг ўрганилганлик даражаси.
Ҳашаротларнинг эстераза
ферментларини субстрат
-
ингибитор усуллари асосида ўрганиш турли
даврларда амалга оширилган кўпгина тадқиқот ишлари натижаларида ўз
ифодасини топган (J.E
.Casida, F.Matsumura, R.L. Metcalf,
М.
Habibulla,
А.П.Бресткин, Е.В.Розенгарт, А.А.Абдуваҳобов, И.Л.Брик, С.А.Рославцева,
Д.Н.Далимов
,
З.Тилябаев ва бошқалар). Охирги
20-25
йилда
тавсия этилган
препаратларга 16 хил қишлоқ хўжалиги ўсимликларининг 46 тур
зараркунанда ҳашаротларидан 41 тури фосфорорганик препаратларга, 20
тури пиретроидларга мослашиб қолиш ҳолатлари аниқланилган.
Ҳашаротларнинг мослашиш механизмини ўрганиш Miyazawa Mitsuo,
С.А.Рославцева, Е.В.Розенгарт,
С.Н.Моралёв, Г.Ф.Махаева, З.Тилябаев,
Д.Н.Далимов ва шу каби бошқа
тадқиқотчиларнинг
изланишларида ўз ифода
-
сини топган. Лекин зараркунанда ҳашаротларга қарши танлаб таъсир этувчи
4
препарат яратиш билан боғлиқ муаммолар
ҳали тўла ўз ечимини топганича
йўқ. Бу эса зараркунадаларнинг эстераза ферментлари ҳамда улар фаоллигига
таъсир этувчи ингбиторларнинг синергетик хусусиятларини чуқурроқ
ўрганишни тақозо этади
.
Диссертация ишининг ИТИ режалари билан боғлиқлиги.
Мазкур
д
иссертация
иши
Ўзбекистон Республикаси Фан ва Техника
Давлат қўмитасининг 2000/07 рақамли “Ҳашаротларнинг мослашиш
механизмини ўрганиш”
мавзуси доирасидаги Давлат буюртмаси
(2000-2002)
ҳамда Гулистон давлат университетининг “Умумий биология”
кафедраси
қошидаги Экспериментал биология лабораториясининг “Ўсимликларнинг
ўсиш ривожланишида биотик ва абиотик омиллар таъсирини физиологик
фаол моддалар ёрдамида
идора этиш”
ҳамда ЎзР ФА Биоорганик кимё
институти физиологик фаол моддаларнинг нозик
органик синтези
(
ФФМНОС
)
лабораториясининг “Синтез новых инсектоакарицидов на
основе природных соединений и их использование для выяснения механизма
резистентости членистоногих”
(2001-20
04) мавзулари асосида
бажарилди.
Тадқиқотнинг мақсади.
Ҳашаротларнинг уларга қарши ишлатила
-
диган инсектицидларга мослашиш механизмини ўрганиш билан боғлиқ ҳолда
олма қурти
ва маккажўхори парвонасининг
ХЭ ва КБЭ хоссаларини ўрганиш
ва
ингибиторларнинг синергетик хусусиятларини аниқлаш
.
Тадқиқотнинг вазифалари
:
-
тадқиқотлар учун танланган ҳашаротлар организми тўқималарида мав
-
жуд эстераза ферментлари
фаоллигини
субстрат
-
ингибитор
усули
ёрдамида
аниқлаш;
-
кимёвий препаратлар таъсирига кўниккан ва сезувчан
ҳашаротлар
организмида мавжуд метаболитик ферментлар фаоллиги ҳамда
улар
орасидаги фарқларни ўрганиш;
-
ҳашаротларнинг онтогенетик ривожланиши босқичларида улар
организмида мавжуд ХЭ ва КБЭларнинг фаоллик динамикасини
ўрганиш;
-
турли
кимёвий тузилишга эга бўлган ингибиторларнинг ҳашаротлар
ХЭ ва КБЭ фаоллигига таъсир этиш даражаларини ўрганиш ҳамда
таҳлил
этиш;
-
ҳашаротларнинг КБЭларига қарши юқори даражада таъсир этувчи
ингибиторларнинг токсикологик ва синергетик хусусиятларини
аниқлаш.
Тадқиқотнинг
объекти ва
предмети.
Ушбу ишда маккажўхори
парвонаси
(Pyrausta nubilalis Hb.)
ва олма қурти
(Laspeyresia pomonella L.)
ҳашаротлари
ҳамда уларнинг
ХЭ ва КБЭ ферментлари тадқиқот объекти
бўлиб хизмат қилди
.
Тадқиқотлар учун танланган ҳашаротларнинг эстераза ферментлари
фаоллигини
субстрат
-
ингибитор
усули
ёрдамида
ўрганиш диссертация
ишининг асосий предмети бўлиб хизмат қилди.
Тадқиқот усуллари.
Тадқиқот жараёнида ҳашаротлар тўқималаридан
гомогенатлар тайёрлаш, ферментлар фаоллиги ва хоссаларини ўрганишда
5
субстрат
-
ингибитор, электрофоретик, колориметрик ва Карновский усул
-
ларидан фойдаланилди. Шунингдек, ингибиторлар фаоллигини
ўрганишда
токсикология ва синергетик хоссаларини ўрганиш усуллари қўлланилди.
Ҳимояга олиб чиқилаётган асосий ҳолатлар
:
-
ҳашаротларнинг онтогенетик ривожланиши билан боғлиқ ҳолда улар
организмида мавжуд ХЭ ва КБЭларнинг фаоллик динамикаси;
-
кимёвий препаратлар таъсирига кўниккан ва сезувчан
ҳашаротлар
организмида мавжуд КБЭ фаоллиги ва улар орасидаги фарқлар;
-
турли кимёвий тузилишга эга бўлган ингибиторларнинг ҳашаротлар
ХЭ ва КБЭ фаоллигига таъсири даражалари;
-
ҳашаротларнинг КБЭ ферментларига қарши юқори даражада таъсир
этувчи ингибиторларнинг токсикологик ва синергетик хусусиятлари.
Тадқиқотнинг
илмий янгилиги
.
Тадқиқотлар учун танланган
маккажўхори парвонаси
(Pyrausta nubilalis Hb.)
ва олма қурти
(Laspeyresia
pomonella L.)
зараркунанда ҳашаротларининг кимёвий препаратлар таъсирига
кўниккан ва сезувчан
популяцияси вакилларининг
бутун онтогенетик
ривожланиш босқичларида тўқималаридаги ХЭ ва КБЭ хусусиятлари хамда
уларнинг фаоллик динамикаси илк маротаба ўрганилди
.
Ҳашаротларнинг
кўниккан популяцияларида КБЭ фаоллиги улар
организми
учун ёт модда
ҳисобланган инсектицидлар фаоллигига қарама
-
қарши тарзда ўзгариши
аниқланди
.
Ҳашаротлар танасидаги ХЭ ва КБЭ фаоллиги ва уларнинг
хусусиятлари ҳашаротларнинг тури, тўқимаси ва органлари ҳамда уларнинг
қандай шароитда учрашига кўра фарқ қилиши аниқланди.
О,О
-
диэтил–
S
–
пиперидинобутин
-2-
илтиофосфатнинг малатион билан 0,0004:0,005% нисбатда
юқори синергетик хусусиятини намаён қилганлиги аниқланди ва улар асосида
синергетик аралашма яратилди
(
Патент олиш учун талабнома қайд этиш рақами:
№ IAP
20110374)
Тадқиқот натижаларининг илмий ва амалий аҳамияти.
Ўтказилган
тадқиқотлар натижалари
зараркунанда ҳашаротларга
қарши танлаб таъсир
этувчи физиологик фаол моддаларни яратиш ва метаболитик ферментлар
фаоллигини бошқариш учун илмий асосланган ишланмалар яратишда асос
бўлиб хизмат қилиши мумкин.
Яратилган синергетик аралашмадан
зараркунанда ҳашаротларга қарши курашда фойдаланиш асосида кимёвий
препаратларнинг қўлланиш миқдорини камайтириш мумкин.
Тадқиқот натижаларини татбиқ этиш.
Малатионнинг
0,005%
ли,
БД
-
54 нинг
0,0004%
ли эритмаларидан
1:1 нисбатда тайёрланган аралашмалари олма
қурти ҳашаротига қарши қўлланилганда зараркунанданинг 100% нобуд бўлиши
кузатилдики, бундан ишлаб чиқаришда фойдаланиш юқори иқтисодий самара
беради.
Мазкур диссертация иш натижаларидан Гулистон давлат
университетида биокимё, биоорганик кимё
,
ўсимликларни ҳимоя қилиш,
энтомология ва энзимология фанлари махсус курсларини ўқитишда
фойдаланилмоқда
.
6
Ишнинг муҳокамаси
.
Ушбу диссертация
иши
бўйича олиб борилган
тадқиқотлар натижалари “
4
th
International Symposium on the Chemistry of
Natural Compounds (SCNC-2001)
”
(6-8 June 2001, Turkey),
“Биологик фаол
полимерлар синтези, хусусиятлари ва қўлланиши”
мавзусида ёш
олимларнинг Республика миқёсида ўтказилган илмий анжуманида (Тошкент
22 май 2003 йил), “
5
th
International Symposium on the Chemistry of Natural
Compounds
”
(May 20-23, 2003, Tashkent, Uzbekistan
), Гулистон давлат
университетининг анъанавий анжуманларида (Гулистон, 2002
-2011),
“Перспективы развития биологических технологий и безопасность”
Международная конференция
(14-
17 октября
, 2003
г. Ташкент, Узбекистан),
“Кимёнинг долзарб муаммолари”
мавзусидаги анжуманда (Гулистон 200
5
йил 12
-
13 май) маъруза қилиниб
,
анжуманлар материалларида чоп этилган.
Тадқиқот натижаларининг эълон қилинганлиги.
Диссертация
иши
бўйича олинган асосий натижалар жами илмий журналларда
8
та мақола,
Республика ва халқаро миқёсда ўтказилган
илмий
анжуман ҳамда
симпозиумлар материалларида
6
та маъруза
матни тарзда чоп этилган ҳамда
ЎзР Фан ва техника маркази қўмитасининг “Ҳашаротларнинг мослашиш
механизмини ўрганиш”
мавзуси доирасидаги Давлат буюртмаси
(2000-2002)
фундаментал тадқиқотлар бўйича 2000/07 рақамли грант ҳисоботларида
келтирилган.
Диссертация ишининг тузилиши ва ҳажми.
Диссертация жами 1
18
бетдан иборат бўлиб, 1
4
та расм,
20
та жадвалларни ўз ичига олган кириш,
адабиётлар шарҳи, тажриба қисм, олинган натижаларнинг
муҳокама қисми,
хулоса ва 15
5
та фойдаланилган адабиётлар рўйхатидан иборат.
Миннатдорчилик
.
Муаллиф
диссертация ишнинг бажарилишида ўз
маслаҳатлари билан яқиндан ёрдам берган к.ф.д., профессор Д.Н.Далимовга
,
б.ф.д.
З.Тилябаевга
ҳамда к.ф.д. Б.Н.Бобоевга ўзининг самимий
миннатдорчилигини билдиради.
ИШНИНГ АСОСИЙ МАЗМУНИ
Диссертациянинг
кириш қисмида ишнинг мақсади, вазифалари ва
олинган натижаларнинг илмий янгилиги ҳамда амалий ахамияти
ҳақида
қисқа маълумот;
1-
бобда мавзу бўйича адабиётларда келтирилган маълумот
-
ларнинг таҳлили
; 2-
бобда
тажриба қисмида тадқиқот объекти ва усуллари;
3-
бобда тадқиқот асосида олинган натижалар ва уларнинг таҳлили; хулоса
қисмида олинган натижалар асосида чиқарилган хулоса ва таклифлар
,
сўнгра
фойдаланилган адабиётлар рўйхати келтирилган.
Тадқиқотлар давомида
маккажўхори парвонаси ва олма қуртининг
лаборатория ва табиий популяцияларининг
эстераза ферментлари тухум,
қурт (ҳар хил ривожланиш босқичларида), ғумбак олди ва ғумбак ҳамда
капалак фазаларида ўрганилди.
Ҳашаротлар тўқималаридан тайёрланган го
-
могенатлардаги мавжуд оқсилнинг миқдори Лоури усули асосида аниқланди.
7
Ҳашаротлар тўқималаридаги ХЭ ферменти хоссаларини Перм Вакцина
ва зардоб ИТИда ишлаб чиқарилган
БуХЭ (от қони
зардоби ферменти
,
фаол
-
лик кўрсаткичи 6,1 Е/мг га) ва АХЭ (одам қони
эритроцити ферменти
фаоллик кўрсаткичи 2,1 Е/мг га) билан таққосланди. АХЭ ва БуХЭнинг
дистилланган сувда 1 мг препарат, 1 мл сув миқдоридаги концентрацияда
эритмалари тайёрланиб, керакли кўрсаткичдаги концентрациягача
суюлтирилди
.
Ҳашаротларнинг КБЭ фаоллиги чўчқа жигари
карбоксилэстеразаси
фаоллиги
(
260 Е/мг
)
билан солиштирилди.
ХЭларнинг каталитик фаоллиги гомогенатларнинг
карбон кислота
-
лари тиохолинли (ацетилтиохолин
-
АТХ, бутирилтиохолин
-
БТХ, пропионил
-
тиохолин
-
ПТХ) эфирларини гидролизлаш хусусиятига кўра аниқланди
.
Карбон кислоталарнинг тиохолинли эфирлари “
Chemepol
”
(Чехия)
фирмаси препаратларидир.
ХЭ
фаоллигини тиохолинли субстратлар ёрдамида аниқлашда Буюк
Британиянинг «Kochlight
lab» фирмасининг препарати бўлган 5,5
-
дитиобис
-
2-
нитробензой кислотадан хромоген сифатида фойдаланилди
.
КБЭнинг
субстрати сифатида Биоорганик кимё институтининг
ФФМНОС
лабораториясида к.ф.д. Б.Н.Бобоев томонидан синтез қилинган
мой кислотасининг этилтиоэфири
(KS-14)
ҳамда паранитрофенилацетатдан
(
п
-
НФА
)
фойдаланилди
.
Ферментларнинг ингибитори сифатида
эзерин, прозерин, диизопропил
-
фторфосфат ҳамда ЎзР ФАнинг Биоорганик кимё институтида синтез қилин
-
ган
О,О
-
диалкил
-
S(пиперидинобутин
-2-
ил)тиофосфат, О
-
пентил
-S-
[N-
-
этилгетрил]фенилтиофосфонат, О
-
циклогексил
-S-[N-
-
этилгетрил]фенилтио
-
фосфонат, О,О
-
диалкил
-S-
лупинантиофосфат, О,О
-
диалкил
-S-
эпилупинан
-
тиофосфат, О
-
алкил
-S-
пропилфенилтиофосфонат, О
-
алкил
-S-
аллилфенил
-
тиофосфонат,
О,О
-
диалкил
-S-
пропаргилтиофосфат каби қатор фосфор
-
органик бирикмалардан
фойдаланилди
.
Бунда ферментларнинг қайтмас
бимолекуляр ингибирланиш кўрсаткич
даражаси
(k
2
)
k
2
=
2,3
t
.
[I]
lg
V
o
V
t
.
формула асосида аниқланди. Тадқиқотлар давомида ҳашаротларнинг эсте
-
раза ферментлари фаоллиги Эллман колориметрик усули
асосида
ўрганилди
.
Ҳашаротларнинг эстераза ферментларини ўрганишда пластинкали
электрофорездан фойдаланилди
(
Диксон М.Э. Уэбб, 1982
, Laemmli U.K.,
1970
)
.
Бунда ферментлар Карновский усули
билан аниқланди.
Моддалар токсикологияси ҳашаротлар қуртининг қорин
қисмига
микрошприцлар орқали юбориш ва устки қисмига пуркаш
асосида
аниқланди
.
Ферментлар ингибиторларининг синергетик самараси
О.Ю.Ерменова
ва С.А.Рословцеваларнинг услубий кўрсатмаси
бўйича
аниқланди. Олинган
натижалар Р.Х.Мюллер усули асосида статистик таҳлил қилинди.
8
Ҳашаротларнинг онтогенетик ривожланиши босқичида эстераза
ферментлари фаоллиги динамикаси
Маккажўхори парвонасининг лаборатория шароитида изоляцияланган
ва табиий муҳитда мослашиб ривожланган популяцияларида ХЭ ва КБЭ
бутун онтогенетик ривожланиш цикли давомида ўрганилди. Ҳашаротларнинг
2-3, 4-5
ўсиш фазаларидаги
қуртлари бош ва кўкрак қисми гомогенатида
cубстратларнинг (тиохолинли ва KS
-
14) гидролизланиши кузатилди. Бу
ҳашарот организмида КБЭ мавжуд эканлигидан далолат беради
.
Ҳашаротнинг лаборатория шароитида ўстирилган популяциясини
онтогенетик ривожланишининг барча босқичларида КБЭ фаоллиги жуда суст
бўлгани сабабли уни
аниқлаш имкони бўлмади. Субстратларнинг турли
тезликда гидролизланиши асосида ҳашаротларнинг ўсиши ва ривожланиши
билан ферментлар фаоллиги ҳам
динамик ҳолда ўсиб бориши кузатилди
.
Олма
қурти
капалагининг
бош
ва
кўкрак
қисмидан
тайёрланган
гомогенатларида
қурт
фазасидагидан
фарқ
қилиб
,
АТХнинг
гидролизланиши
бош
ва
кўкрак
қисмида
бир
хил
кўрсатгични
намоён
қилди. АТХнинг
гидролизланиши ҳар икки ҳолатда БТХнинг гидролизланишидан юқори
,
яъни бош қисмида БТХнинг гидролизланишидан 3,5 баробар, кўкрак қисми
-
да эса 1,3 баробар юқори кўрсаткични намоён қилди. БТХнинг гидролиз
-
ланишини эса бош қисмида жуда суст, кўкрак қисмида эса АТХга нисбатан
1,3 марта
суст гидролизланишидан шундай хулосага келиш мумкинки,
ҳашарот капалагининг
барча тўқималарида АХЭ мавжуд бўлиб, БуХЭ бош
қисмида жуда кам миқдорда ва асосан, бу фермент ҳашаротнинг кўкрак
қисмида мавжуд экан. Ҳашаротларнинг бутун онтогенетик ривожланиш
циклида КБЭнинг мавжудлиги п
-
НФА ва KS
-
14 асосида аниқланди. Ҳар
иккала субстратнинг гидролизланиш кўрсаткичи ҳашарот қуртининг
ривож
-
ланиш
фазасига
боғлиқ тарзда ортиб
борди, лекин капалак фазасида кескин
пасайиши кузатилди. Бу ҳолат шундай хулосага сабаб бўлдики
,
КБЭ асосан
ҳашаротнинг қурт фазасида юқори фаолликни намоён қилар
экан
.
Яна шуни
қайд
этиш керакки
,
КБЭ
капалакнинг
бош
қисмида
кўкрак
қисмига
нисбатан
4-5
марта
кам
миқдорда
мавжуд
экан
.
Маккажўхори парвонасининг лабораторияда ўстирилган популяцияси
қурт ва капалак фазасида КБЭнинг фаоллиги кузатилмади
.
Олма қуртида
КБЭ фаоллиги унинг бутун онтогенетик ривожланиш
цикли давомида ўрганилди. Бу фермент ҳашаротнинг бош қисмида ХЭларга
нисбатан 4
-
5 марта кам, кўкрак қисмида эса АХЭга нисбатан
1-
1,5 марта
юқори
фаолликка эга бўлиши аниқланди
.
Ҳашаротларнинг онтогенетик ривожланиши босқичларида эстераза
ферментлари фаоллигининг кинетик параметрлари
Ҳашаротлар онтогенетик ривожланиши жараёнида
бир фазадан иккин
-
чи фазага ўтганда ферментларнинг фаоллик даражаси ҳам ортиб
(1-
жадвал),
бунда ҳашаротнинг сезгирлик даражаси ҳам ортиб боради.
9
1-
жадвал
Ҳашаротларнинг ХЭ ва КБЭ таъсирида субстратларнинг
гидролизланиши
кинетик параметрлари (
Km×10
-3
M.; V
max
×10
-6
M.мг.мин)
Субст
рат
Ҳашаротлар
ўсиш фазалари
Кине
-
тик
Параме
трлар
Маккажўхори парвонаси
Олма қурти
ҳашароти
ҳашароти
Бош
қисми
Кўкрак
қисми
Бош
қисми
Кўкрак
қисми
АТХ
2-3
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
2,5
0,13
0,7
0,2
1,0
0,2
0,3
0,02
13,9
0,4
4,2
0,23
4,2
0,22
2,0
0,11
4-5
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
2,5
0,03
1,2
0,05
1,6
0,02
0,5
0,02
14,0
0,4
10,2
0,2
5,6
0,2
4,0
0,52
Капалаги
K
m
V
max
5,6
0,2
3,2
0,1
4,3
0,3
2,2
0,1
6,0
0,21
18,1
0,43
6,3
0,1
10,8
0,3
ПТХ
2-3
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
2,3
0,3
0,6
0,01
1,0
0,2
0,3
0,1
4,6
0,04
3,8
0,06
3,8
0,05
1,8
0,06
4-5
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
2,9
0,2
0,9
0,013
1,4
0,04
0,4
0,01
12,7
0,03
9,8
0,2
5,0
0,1
3,6
0,07
Капалаги
K
m
V
max
3,6
0,22
2,9
0,1
3,6
0,2
2,0
0,04
6,0
0,04
18,1
0,5
5,9
0,2
9,8
0,3
БТХ
2-3
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
1,1
0,021
0,3
0,01
2,9
0,02
0,9
0,01
3,9
0,3
1,8
0,1
2,7
0,04
4,4
0,02
4-5
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
1,5
0,012
0,4
0,011
5,3
0,1
1,6
0,03
2,7
0,05
3,8
0,04
7,2
0,3
10,6
0,5
Капалаги
K
m
V
max
3,6
0,03
1,2
0,011
4,0
0,1
2,4
0,02
1,7
0,1
5,1
0,2
5,2
0,3
8,1
0,2
К
S 14
2-3
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
0,5
0,012
0,1
0,02
1,2
0,02
0,3
0,01
0,4
0,02
0,1
0,02
3,0
0,08
3,1
0,07
4-5
ўсиш фаза
-
ларидаги
қурти
K
m
V
max
0,8
0,02
0,2
0,01
2,9
0,03
0,9
0,01
1,4
0,3
0,7
0,2
4,3
0,2
7,8
0,1
Капалаги
K
m
V
max
0,2
0,01
0,1
0,01
0,5
0,01
0,2
0,02
0
0
0
0
АТХ ва ПТХнинг гидролизланиш тезлиги (V
max
) даражаси кўрсаткич
-
лари орасида фарқ бу субстратларни битта фермент таъсирида гидролизлан
-
ган бўлиши мумкинлигидан далолат беради.
Ҳашаротларнинг бош қисмида АТХ юқори тезликда
гидролизлангани
учун АХЭ, кўкрак қисмида БТХ юқори кўрсаткичда гидролизлангани учун
БуХЭ мавжуд, деган хулосага келинди.
Субстратнинг гидролизланиш даражаси ва кинетик параметрларига
кўра ҳашарот
тўқималарида
КБЭ мавжуд бўлиб, бош қисмига нисбатан
кўкрак қисмида юқорироқ экан. Ушбу ферментнинг фаоллиги ХЭлар каби
ҳашарот қуртининг ривожланиши билан бирга ортиб бориши аниқланди.
Лекин
ҳашаротларнинг капалак фазасида тескари ҳолатнинг
гувоҳи бўлдик.
Маккажўхори зараркунандасининг капалак фазасида КБЭнинг фаоллик дара
-
10
жаси кескин пасайиши кузатилган бўлса, олма қурти
зараркунандасининг
капалак фазасида эса КБЭнинг фаоллиги аниқланмади.
Ҳашаротлар тўқималаридаги эстераза ферментларининг
электрофоретик таҳлили
Ҳашаротлар тўқималарида эстеразалар мавжудлиги ҳақида тўлиқроқ
хулоса чиқариш учун
гомогенатлар электрофоретик таҳлил
қилинди. Бунда
эстеразаларнинг субстрати сифатида α
-
нафтилацетатдан фойдаланилди.
Электрофорез
пластинкалари α
-
нафтилацетат ва диазон тузи эритмаси
-
га солинганда пластинка устунларида чизиқлар ҳосил бўлди, яъни макка
-
жўхори капалагининг изоляцияланган муҳитда ўстирилган намуналарининг
қурти (
1
) ва капалаги
(2
) тўқималари гомогенатлари электрофарез
пластинка
-
си
устунларида 8 та чизиқ ҳосил қилди
.
М
3 4 2 1 3 4 2 1
М
3 4 2 1 3 4 2 1
1-
расм. Маккажўхори капалагининг лаборатория шароитида изоляцияланган муҳитда
ўстирилган 4
-5-
ўсиш фазадаги қурти (1) ва капалаги (2), табиий муҳитдан олинган 4
-5-
ўсиш фазадаги қурти (3) ва капалаги (4) тўқималари гомогенатларининг электрофоретик
анализлари. Электрофорез геллари А –
фақат α
-
НФА, Б
-
α
-
НФА ва прозерин (1
.
10
-6
М)
таъсир эттирилган ҳолатда
М
-
маркёр оқсиллари: қорамол зардоби
авальбумини
(67кДа),
овальбумин (45кДа), химотрипсиноген
-
А (25кДа)
Табиий шароитда ингибиторларга мослашган популяцияси намуналари
қурти тўқималари гомогенатларида (
3
) 12 та, капалаги
тўқималарида (
4) 10
та
жигарранг чизиқ
ҳосил бўлди
(1-
расм)
.
Бу жигарранг чизиқлар α
-
нафтил
-
ацетатни
ферментлар
таъсирида гидролизланишидан ажралган α
-
нафтолнинг
диазон тузи бирикмасидир.
Кейинги электрофорез пластинкалари солинган муҳитда ХЭнинг
субстратлари α
-
нафтилацетат
ўрнига
АТХ, БТХ, ПТХ эритмалари қўшилган
-
да пластинкалар устунларида 5
-
6 тадан чизиқлар йўқолиб
, 1
ва
2
да 3
та,
3
да
5
та,
4
да
5
та чизиқлар қолди холос.
Электрофоретик жараён ўтказилган гел
пластинкалари солинган муҳитга ХЭнинг субстратлари АТХ, БТХ, ПТХ
45
кДа
25
кДа
67
кДа
25
кДа
45
кДа
Б
А
67
кДа
11
эритмаларидан қўшилганда барча гомогенатлар солинган пластинканинг
чизиқларида специфик ранглар ҳосил бўлишидан, ХЭлар мавжудлиги хақида
хулоса чиқариш мумкин.
Электрофарез пластинкалари
солинган муҳитга КБЭнинг специфик
субстрати КS
-
14 ни таъсир эттирилганда
1
ва
2
да 6
-
чи чизиқ
, 3
да 6
-10-
чизиқлар,
4
да 7,9,
10
–чизиқлар ҳосил бўлди(2
-
расм).
Демак, бу чизиқларда
КБЭ мавжуд бўлиб, бу фермент изоляцияланган муҳитда ўстирилган макка
-
жўхори парвонасида 1 та изошакл,
табиий муҳитда ингибиторларга мослаш
-
ган популяциясининг қурт фазасида
5 хил изошакл
,
капалагида 3 хил изо
-
шакл
ҳосил бўлиб, капалак
фазасида
КБЭнинг изошакллари
ҳосил бўлмаган.
3 4 2 1 3 4 2 1
А
Б .
А
Б
2-
расм. Маккажўхори капалагининг табиий (А) ва изоляцияланган лаборатория шароити
-
даги(Б) популяциялари тўқималари гомогенатининг электрофорез қилинган гелларига
КБЭнинг специфик субстрати (KS
-
14) таъсир эттирилгандаги натижалари. 3
- 3-4-
ўсиш
фазадаги қурти, 4
-
капалаги. Изоляцияланган муҳитдаги популяцияси: 1
-3-4-
ўсиш фазада
-
ги қурти ва 2–капалаги
М
-
маркёр оқсиллари: қорамол зардоби авальбумини
(67кДа)
,
химотрипсиноген
-
А (25кДа)
Шундай қилиб, ўтказилган тажрибалар асосида шуни айтиш мумкинки,
ҳашаротлар организми тўқималарида эстераза ферментларининг фаоллиги
бутун онтогенетик ривожланиши давомида динамик равишда ўзгариб
бориши билан бирга уларнинг ҳосил бўлиши таъсир этувчи омилларга ҳам
боғлиқ экан.
О
-
пентил
-S-
алкилфенилтиофосфонатларнинг
ҳашаротлар
холинэстераза ферментлари фаоллигига таъсири
Ҳашаротларнинг ХЭлар фаол марказини ўрганиш билан боғлиқ бўлган
кўпгина тадқиқотлардан маълумки
,
фермент фаол
марказининг ингибирлани
-
ши эстераза ва анион пунктлари орасидаги масофа ҳамда анион пунктига
67
кДа
25
кДа
12
функционал гуруҳлар мос тушишига боғлиқ. Шунинг учун ушбу тадқиқотлар
давомида биз ФОБлар орасидан ҳашаротларнинг ХЭ ферментлари фаол
марказига комплементар тарзда мос тушувчи бирикмаларини танлаб олиш
мақсадида О
-
пентил
-S-
пропилфенилтиофосфонат, О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этил
-
пиперидил
]
фенилтиофосфонат,
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофос
-
фонат
ва О
-
пентил
-S-
лупинилфенилтиофосфонат қатор бирикмаларининг
таъсири ўрганилди
(2-
жадвал).
О
-
пентил
-S-
алкилфенилтиофосфонатларнинг олма қурти
ва макка
-
жўхори парвонаси ҳамда иссиқ қонли ҳайвонлар ХЭларига таъсиридан
маълум бўлдики, 2,
3,
4 бирикмалар 1
-
бирикмага нисбатан ҳашаротларнинг
ХЭлар фаоллигини юқори кўрсатгичда ингибирлайди. О
-
пентил
-S-
пропилфенилтиофосфонатнинг О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этилпиперидил
]
фенилтио
-
фосфонат,
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофосфонат
ва О
-
пентил
-S-
лупинанфенилтиофосфонатларга алмашиниши билан ферментлар фаол
-
лигини кескин сусайишини кўриш мумкин
(2-
жадвал).
2-
жадвал
Ҳашаротлар ХЭ ферментларининг О
-
пентилфенилтиофосфон кислотаси
ҳосилаларига нисбатан таъсирчанлиги(
k
2
×10
4
М
-1
мин
-1
)
P
S R
O
C
5
H
11
O
№
R
Олма қурти
Маккажўхори
парвонаси
Сут
эмизувчилар
А ХЭ
БуХЭ
АХЭ
БуХЭ
АХЭ
БуХЭ
1
-
С
3
Н
7
0,23
0,01
0,19
0,03
0,31
0,01
0,21
0,01
0,32
0,75
2
N
-CH
2
CH
2
3,12
0,02
7,8
0,2
8,1
0,2
17,0
0,1
0,44
3,6
3
N
N
CH
2
CH
2
-
9,8
0,01
13,5
0,3
8,8
0,4
23,3
0,5
0,49
58,5
4
-CH
2
N
11,1
0,2
17,2
0,3
18,2
0,2
20,0
0,3
4,71
492,0
Юқоридаги барча ҳолларда АХЭга нисбатан БуХЭнинг ингибир
-
ланиши даражаси ўсиб боради. Лекин олма қурти
ҳашаротида О
-
пентил
-S-
[N-
β
-
этилпиперидил
]
фенилтиофосфонатни
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]-
фенилтиофосфонатга алмашиниши билан АХЭнинг ингибирланиши О
-
пентил
-S-
β
-
этилпиперидилфенилтиофосфонатдагига нисбатан деярли 2
баробар камаяди. БуХЭда эса аксинча деярли 2 баробар ортиши кузатилади.
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофосфонатни
О
-
пентил
-S-
β
-
лупинил
-
фенилтиофосфонатга алмашиниши билан эса АХЭнинг ингибирланиши
даражаси О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофосфонатга нисбатан 6
баробар, О
-
пентил
-S-
β
-
этилпиперидилфенилтиофосфонатга нисбатан эса 3,5
баробар ортиши кузатилса, БуХЭда О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенил
-
тиофосфонатга нисбатан 1,3 баробарга О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этилпиперидил
]-
фенилтиофосфонатга нисбатан эса 2,4 баробарга яқин ортишини кўриш мум
-
13
кин.
Худди шунга яқин ҳолатни маккажўхори парвонаси ҳашароти ва иссиқ
-
қонлиларнинг АХЭ ва БуХЭларида кўриш мумкин. Фақат бу ферментларни
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этилпиперидил
]
фенилтиофосфонат
ва
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофосфонатларда ингибирланиши деярли ўзгармайди.
Хулоса сифатида шуни қайд этиш мумкинки, О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этил
-
пиперидил
]
фенилтиофосфонат
,
О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофос
-
фонат
ва О
-
пентил
-S-[N-
β
-
этиланабазил
]
фенилтиофосфонат
қаторида АХЭга
нисбатан БуХЭнинг ингибирланиш даражаси ортиб боради
,
яъни, олма
қуртининг АХЭнинг
k
2
ингибирланиш кўрсаткичи
3,12, 9,8, 11,1
×10
4
М
-1
мин
-1
бўлса, БуХЭда
7,8
,
13,5, 17,2
×10
4
М
-1
мин
-1
ни, маккажўхори парвонаси
АХЭнинг ингибирланишида 8,1, 8,8, 18,2 БуХЭда 17,0, 23,3, 20,0
×10
4
М
-1
мин
-1
кўрсаткични ташкил этди.
О
-
циклогексил
-S-
аминоалкилфенилтиофосфонат қатор
бирикмаларнинг
ҳашаротлар ХЭ ферментлари фаоллигига таъсири
О
-
циклогексил
-S-[N-
-
этилморфолинил]фенилтиофосфонат
,
О
-
цикло
-
гексил
-S-[N-
-
этилпиперидил]фенилтиофосфонат
ва О
-
циклогексил
-S-
эпи
-
лупинилфенилтиофосфонатларга
ўзгариб бориши билан юқоридагига ўхшаш
ҳолатни кўриш мумкин (
3-
жадвал).
Лекин бунда О
-
циклогексил
-S-[N-
-
этилморфолинил]фенилтиофосфонат
АХЭга нисбатан комплементарликни
юзага келтирмайди. Морфолин молекуласида кислород атомининг бўлиши
бу модданинг комплементарлигини
камайишига олиб келади.
3-
жадвал
Олма қурти
ва маккажўхори парвонаси ҳашаротлари ХЭ ферментлари
-
нинг
О
-
циклогексил
-S-
аминоалкилфенилтиофосфонатларга нисбатан
таъсирчанлиги (k
2
,×10
4
М
-1
мин
-1
)
P
S R
O
O
№
R
Олма қурти
Маккажўхори
парвонаси
Сут
эмизувчилар
АХЭ
БуХЭ
АХЭ
БуХЭ
АХЭ
БуХЭ
1
N
O
_
CH
2
_
CH
2
_
0
0,5
0,02 0
0,82
0,02
0
1,4
2
N
_
CH
2
_
CH
2
_
0,77
0,1 1,47
0,1 0,2
0,02 1,15
0,01
5,01
17,4
3
-CH
2
N
5,7
0,4
13,57
0,
5
28,5
0,3 34,4
0,43
17,0
127,0
O,О
-
диалкил
-S-
эпилупинантиофосфатларнинг ҳашаротлар
холинэстераза ферментлари фаоллигига таъсири
О,О
-
диалкил
-S-
эпилупинантиофосфатларнинг таъсир этиш кўрсаткич
-
ларидаги ҳолат олма қурти
ҳашаротининг бутун онтогенетик ривожланиш
фазаларида кузатилди (
3-
расм). Бунда О,О
-
диалкил
-S-
эпилупинантиофос
-
фатнинг R радикалидаги углерод
атомлар сони (n) иккитадан тўрттагача
ортиб
бориши билан ҳашарот қуртининг 2
-
3 ва 4
-5
ўсиш фазасида ортиб
бориб, n=6 да 4 углеродга эга бўлган радикалли бирикмага нисбатан
14
ривожланиш фазаларида АХЭда 2,3; 2,5; 2,8 БуХЭда 1,9; 1,5; 1,2 марта
камайган
(3-
расм А; В).
3
3,5
4
4,5
5
5,5
6
6,5
7
C2
C3
iC4
C4
C6
I
II
lgk2
n
3
3,5
4
4,5
5
5,5
6
6,5
7
C2
C3
i-C4
C4
C6
II
I
n
3-
расм. О,О
-
диалкил
-S-
эпилупинантиофосфатларнинг олма қурти
ҳашаротининг АХЭ(I)
ва БуХЭ(II) ферментлари фаоллигини ингибирлаш кўрсаткичлари. А
-
ҳашаротнинг қурти,
B-
ҳашаротнинг капалаги.
(n-
R радикалидаги углерод атомлар сони
, lgk
2
-
антихолинэстераза фаоллиги кўрсаткичлари)
Ҳашаротларнинг КБЭ ферменти фаоллигига О
-
алкил
-S-
пропилфенилтиофосфонатларнинг таъсири
Тадқиқотлар давомида О
-
алкил
-S-
пропилфенилтиофосфонатлар қатори
таркибида тиопропил функционал гуруҳи доимий бўлиб, алкил радикалининг
ўзгариб бориши асосида бирикмаларни ҳашаротларнинг КБЭ фаоллигига
таъсири ўрганилди. Олинган натижалар эса ҳашаротлар ва иссиқ қонли
ҳайвонлар КБЭсига қиёсий тавсиф беришга муҳим асос бўлди
4 -
жадвал
О
-
Алкил
-S-
пропилфенилтиофосфонатларнинг карбоксилэстераза ферменти
фаоллигига қарши таъсир кўрсатгичи
(k
2
×10
4
М
-1
мин
-1
)
P
S C
3
H
7
O
O
R
№
R
Карбоксилэстераза
Олма қурти
Маккажўхори
парвонаси
Кузги
тунлам
Кичик қуруқлик
тунлами
Чўчқа
жигари
1 -
С
5
Н
11
1,02
0,3
3,22
0,22
3,79
57,3
3,36
2 i-
С
5
Н
11
0,7
0,2
1,8
0,32
2,06
5,7
0,31
3 -
С
6
Н
13
0,82
0,2
7,85
0,31
5,75
69,2
1,22
О
-
пентил
-S-
пропилфенилтиофосфонат
О
-
гексил
-S-
пропилфенилтио
-
фосфонатга
алмаштирилиши
билан маккажўхори парвонаси кузги ва кичик
қуруқлик тунлами КБЭнинг ингибирланиш кўрсаткичи ортиб боради
(4-
жадвал)
.
Олма қурти
ва чўчқа жигари ферментини ингибирланиш кўрсат
-
кичининг
эса камайиши
,
яъни олма қуртида 1,25 марта, чўчқа жигарида эса
2,75 марта пасайиш ҳолати кузатилди. О
-
пентил
-S-
пропилфенилтиофосфо
-
натда k
2
нинг кўрсаткичи маккажўхори парвонаси, кузги тунлам ва чўчқа
жигари КБЭларида бир
-
бирига деярли яқин, лекин О
-
гексил
-S-
пропилфенил
-
тиофосфонатда эса улар орасидаги кескин фарқларни кузатиш мумкин. Бу
кўрсаткич О
-
пентил
-S-
пропилфенилтиофосфонат
учун олма қурти
ферменти
-
да маккажўхори ферментига нисбатан камроқ, кузги тунламга нисбатан 3,6
мартага яқин, кичик қуруқлик тўпламида 5,6 марта, чўчқа жигари ферменти
-
га нисбатан эса
3,3 мартагача паст эканлигини кўриш мумкин.
Ҳар тўртала
А
В
15
ҳашарот ва чўчқа жигари КБЭни О
-
изопентил
-S-
пропилфенилтиофосфонатда
О
-
пентил
-S-
пропилфенилтиофосфонат
ва О
-
гексил
-S-
пропилфенилтио
-
фосфонатларга
нисбатан паст ингибирланиши кузатилди.
Ҳашаротларнинг КБЭ
ферменти тўйинган ва тўйинмаган гуруҳга эга
бўлган
О
-
алкилфенилтиофосфонатлар билан ўзаро таъсири
Таркибида тўйинган ва тўйинмаган боғлар бўлган
О–алкилфенил
-
тиофосфонатларни ҳашаротларнинг КБЭ
билан ўзаро таъсири қиёсий таҳлил
қилинганда, қўшбоғ тутган ФОБ КБЭни ўзига хос тарзда ингибирлаш
хусусиятларини намоён этди (5
-
жадвал). Жадвалда келтирилган
барча
ҳашаротларда КБЭнинг қайтмас ингибирланиш кўрсаткичи чўчқа жигари
ферментининг ингибирланишидан паст эканлиги кузатилди, яъни биринчи
бирикманинг кичик қуруқлик тунлам КБЭсига
қарши фаоллиги чўчқа жигари
КБЭдагидан 3,8 марта, кузги тунлам КБЭси учун 8,33 марта, маккажўхори
парвонаси КБЭ учун 4,7 марта, олма қурти
КБЭси учун
эса 17 марта кам
эканлиги кузатилди.
Жадвалда ифода этилган 1,
3,
5 ва
6
бирикмаларда R радикал (С
5
Н
11
)
ўзгармаган ҳолда такрорланиб, R
I
радикал ўзгариб боради ва бунда функцио
-
нал гуруҳ ўзгариб бориши билан антикарбоксилэстераза кўрсатгичлари
ўзгариши кузатилади
.
Яъни, биринчи бирикмадаги –СН
2
-
СН=СН
2
учинчи
бирикмада
–СН
2
-
С
СН га алмашиниши билан антикарбоксилэстераза
фаоллиги кўрсаткичи
олма қуртида 1,72 марта, маккажўхори парвонасида
1,33 марта, кузги тунламида 14,67 марта, кичик қуруқлик тунламида 2,1
марта, чўчқа жигарида 21,12 марта ортади.
R
I
радикал ўрнида
-
СН(СН
3
)
2
(5-
бирикма),
-
СН
2
-
СН(СН
3
)
2
(6-
бирикма) киритилиши билан бирикмаларининг
антикарбоксилэстераза фаоллиги кескин пасайди.
Худди шундай ҳолатни 2,
4,
6 ва 8 бирикмаларда ҳам кузатиш мумкин;
яъни иккинчи бирикмада R
I
радикалда
-
СН
2
-
СН=СН
2
тўртинчи бирикмада
СН
2
-
С СН билан алмашиниши билан антикарбоксилэстераза фаоллиги
кўрсаткичи
олма қуртида 2,82 марта, маккажўхори парвонасида 1,72 марта,
кузги тунламда 23 марта, кичик қуруқлик тунламида 4,17 марта, чўчқа
жигарида 2,47 марта ортади.
R
I
радикали
тўйинмаган углеводород ўрнида
юқорида қайд
этилган бирикмалар қаторидаги сингари
-
СН(СН
3
)
2
(6-
бирикма) ва
-
СН
2
-
СН(СН
3
)
2
(8-
бирикма) ортиш билан бирикмаларнинг
антикарбоксилэстераза фаоллиги кескин камайди. Яъни
6-
бирикмада бу
антикарбоксилэстераза фаоллиги тўртинчи бирикмадагидан олма қуртида
50,9 марта, маккажўхори парвонасида 11,73 марта, кузги тунламда 448,3
марта, кичик қуруқлик тунламида 11,72 марта, чўчқа жигарида 2,95 марта
камайган бўлса,
8-
бирикмада яна ҳам камайиши
кузатилди.
Бирикмаларни антикарбоксилэстераза фаоллиги таҳлили асосида яна
шуни ҳам қайд
этиш керакки
,
ФОБдаги R радикали
-
С
5
Н
11
дан
(1, 3,
5 ва 7),
С
6
Н
13
(2, 4,
6 ва 8) га алмашинишида ҳам 1 ва 2 ҳолда 3 ва 4 бирикмалар
ўртасида ҳам антикарбоксилэстераза фаоллигини ортишини кузатиш мумкин.
Бу олинган натижалардан иссиққонли ва ҳашаротларнинг КБЭ фаол
маркази
16
атрофи 6 углерод атомлари
узунлиги ва 1 углерод атоми кенглигидаги
гидрофоб майдонга эга
деган хулосага келиш мумкин
.
5-
жадвал
О
-
алкил
-S-R
1
-
фенилтиофосфонатларнинг карбоксилэстераза ферменти
фаоллигига таъсир кўрсатгичлари
(k
2
,×10
5
М
-1
мин
-1
)
P
S R'
O
O
R
№
R
R
1
Карбоксилэстераза
Олма қурти
Макка
-
жўхори
парвонаси
Кузги
тўнлам
Кичик қуруқ
тўнлам
Чўчқа
жигар
и
1 -
С
5
Н
11
-
СН
2
-
СН
СН
2
7,32
0,3
26,65
0,5
15,0
33,0
125,0
2 -C
6
Н
13
-
СН
2
-
СН
СН
2
10,11
0,4
30,63
0,5
16,9
18,0
158,0
3 -
С
5
Н
11
-
СН
2
-
С СН
12,6
0,2
35,5
0,6
220,0
68,00
2640,0
4 -C
6
Н
13
-
СН
2
-
С СН
28,5
0,4
52,78
0,2
390,0
75,0
390,0
5 -
С
5
Н
11
-
СН(СН
3
)
2
0,68
0,02
4,44
0,1
1,80
6,8
137,0
6 -C
6
Н
13
-
СН(СН
3
)
2
0,56
0,021
4,5
0,1
0,87
6,4
132,0
7 -
С
5
Н
11
-
СН
2
-
СН(СН
3
)
2
0,56
0,011
4,2
0,02
3,1
7,3
277,0
8 -C
6
Н
13
-
СН
2
-
СН(СН
3
)
2
0,3
0,01
2,4
0,04
0,61
10,9
201,0
О,О
-
диалкил
-S-
пропаргилтиофосфат қатори
бирикмаларида R радикал
-
С
2
Н
5
дан
-
С
6
Н
13
гача ортиб бориши билан бирикмаларнинг ҳашаротлар
КБЭси
ингибирлаш
фаоллиги ортиб боради, лекин чўчқа жигарида бирикма
-
ларнинг таъсири
-
С
2
Н
5
дан то
-
С
5
Н
11
гача ортиб бориб,
-
С
6
Н
13
га ўтиши билан
бу фаоллик сусаяди (
6-
жадвал)
.
Бу олинган натижалар иссиққонли ҳайвон
-
ларнинг КБЭ
фаол маркази атрофи ҳашаротларникига нисбатан тор эканли
-
гини кўрсатади.
6-
жадвал
О,О
-
диалкил S
-
пропаргилтиофосфатларнинг КБЭни ингибирланиш
кўрсаткичлари
(k
2
×10
5
М
-1
мин
-1
)
P
S-CH
2
O
R
_
O
R
_
O
C
CH
№
R
Карбоксилэстераза
Олма
қурти
Маккажўхори
парвонаси
Кузги
тўплам
Кичик
қуруқлик
тунлами
Чўчқа
жигари
1
-
С
2
Н
5
2,72
0,1
12,1
0,4
17,0
11,0
0,65
2
-
С
3
Н
7
4,45
0,2
17,21
0,3
28,0
14,0
3,9
3
-
С
4
Н
9
5,3
0,1
37,8
0,8
40,0
18,0
40
4 -
С
5
Н
11
8,2
0,2
71,2
0,7
88,0
69,0
100,0
5 -
С
6
Н
13
10,33
0,1
80,88
0,5
101,3
98,5
73,0
О
,
О
-
диалкил
-S-
лупинантиофосфат ва О
,
О
-
диалкил
-S-
эпилупинан
-
тиофосфатларни ҳашаротлар КБЭ
фаоллигига таъсири
О,О
-
диалкил
-
S-
лупинантиофосфатларнинг (
I
) ва О,О
-
диалкил
-
S-
эпилупинантиофосфат (II) хосилалари ҳар иккала ҳашаротнинг КБЭ
фаоллигининг қайтмас тарзда ингибирловчи бирикмалар эканлиги аниқлан
-
17
ди. 7
-
жадвалда келтирилган маълумотлардан кўринадики, О,О
-
диалкил
-S-
лупинантиофосфатлар (I) қаторида бирикмаларнинг ҳар иккала ҳашарот
КБЭлари фаоллигига қарши таъсири алкил радикали
-
С
2
Н
5
дан
-
С
5
Н
11
гача
ортганда 100 мартадан юқори кўрсаткичгача ортиб боради. О,О
-
диалкил
-S-
эпилупинантиофосфатларда ҳам алкил радикалнинг
-
С
2
Н
5
дан
-
С
4
Н
9
гача
ўзгарганда
сезиларли даражада ортиб (10 мартадан юқорироқ кўрсаткич),
алкил радикалнинг дигексилга ўзгариши билан k
2
биомолекуляр кўрсаткич
-
нинг пасайиши кузатилди. Ушбу маълумотлар асосида шундай хулосага
келиш мумкинки, олма қурти
ва маккажўхори парвонаси ҳашарот
-
ларининг
КБЭлари билан О,О
-
диалкилтиофосфатларининг ўзаро таъсири улардаги
гидрофоб тузилишнинг мавжудлиги билан тавсифланади. О,О
-
диалкилтиофосфатларнинг самарадорлик даражаси бирикмалар таркибидаги
лупинин ва эпилупин қолдиқларини конформацион тузилишига
боғлиқ
бўлиши мумкин.
О,О
-
диалкил
-S-
эпилупинантиофосфатлар ҳашаротларнинг КБЭ
фаол
-
лигини юқори кўрсаткичда ингибирлаш даражасини намоён қила олди.
Уларнинг бу кўрсаткичлари радикалдаги углерод атомларининг сони ортиб
бориши билан ортиб борди.
7-
жадвал
О,О
-
диалкил
-S-
лупинантиофосфат(
I
) ва О,О
-
диалкил
-S-
эпилунинан
-
тиофосфатларни(II) ҳашаротларнинг КБЭ фаоллигини қайтмас ингибирлаши
кўрсаткичлари (k
2
×10
6
М
-1
мин
-1
)
P
S-CH
2
O
R
_
O
R
_
O
N
(I)
N
P
S-CH
2
O
R
_
O
R
_
O
(II)
R
I
II
Олма қурти
Маккажўхори
парвонаси
4-
5 ёшли олма
қурти
4-
5 ёшли Маккажўхори
павонаси қурти
-
С
2
Н
5
0,023
0,4
0,08
0,15
0,012
0,28
0,066
0,18
-
С
3
Н
7
0,07,8
0,22
1,2
0,36
0,02
0,4
0,18
0,2
-
С
4
Н
9
1,8
0,42
6,9
0,4
0,8
0,2
0,7
0,23
-
С
5
Н
11
7,3
0,33
8,9
0,21
-
-
-
С
6
Н
13
-
-
0,05
0,33
0,2
0,11
Инсектицидларнинг
токсикологик
хусусиятларини
ўрганиш
Инсектицидлар
метаболизмида кимёвий тузилишига кўра ҳар хил
ферментлар системаси иштирок этиши мумкин. Бундай
инсектицидлар
кўп
ҳолларда
мураккаб
эфир
тузилишига
эга
бўлиши
туфайли
уларнинг
метаболитик
парчаланишида
КБЭ
,
арилэстераза
ва
шу
каби
бошқа
специфик
ферментлар
иштирок
этади
.
Бундай
мураккаб
эфир
тузилишига
эга
бўлган
инсектицидларга
қишлоқ
хўжалигида
кенг
ишлатиладиган
карбофос
,
малаоксон
,
фосдрин
ва
бир
қатор
пиретроидларни
киритиш
мумкин
.
Шунинг
учун
ҳашаротларни
улар
организмидаги
метаболитик
ферментлар
фаоллиги
асосида
мослашиб
қолишини
олдини
олиш
учун
бу
ферментларнинг
специи
-
фик
ингибиторларини
аниқлаш
ва
улардан
фойдаланиш
мақсадга
мувофиқ
.
18
Шунга асосан бундан олдинги ишларда мураккаб эфир тузилишига эга
бўлган пиретероидни
парчаловчи КБЭнинг ингибиторидан фойдаланиб
,
инсектицидлик фаоллигини тиклашга ва оширишга эришилган.
Олиб
борилган кузатишлар асосида БД
-
54нинг 0,0004 ва 0,0005%ли эритмалари ва
малатионнинг
0,005%ли
эритмаларидан
тайёрланган
синергетик
аралашмалари
таъсирида ҳашарот қуртларининг нобуд бўлиши
энг
юқори
8-
жадвал
Малатион, БД
-
54 ҳамда улар аралашмаларининг олма қурти
ҳашаротига
таъсир кўрсаткичлари
Малатион, БД
-
54 ва
уларнинг аралашмаси
Моддаларнинг
концентрацияси %
Ҳашаротларнинг нобуд бўлиши, %
(5 кун давомида)
Малатион
0,001
0,005
0,02
0,05
10
25
50
70
Малатион+БД
-54
0,001+0,0001
0,001+0,0002
0,001+0,0004
0,001+0,0005
40
50
70
90
Малатион+БД
-54
0,005+0,0001
0,005+0,0002
0,005+0,0004
0,005+0,0005
50
70
100
100
(100%)
кўрсаткичда кузатилди. Бир неча марта ўтказилган тажрибалар
натижасида ҳам анашундай кўрсаткичлар такрорланди. Демак, БД
-54
ни
зараркунанда ҳашаротлар, жумладан, олма қуртининг қўлланиладиган
инсектицидларга мослашишини олдини олишда синергист сифатида муҳим
аҳамиятга эга бўлган препарат дейиш мумкин. БД
-
54нинг 0,0004 ва
0,0005%ли эритмасининг
ушбу аниқланилган концентрациясидан
қўлланиладиган инсектицидлар учун
синергист сифатида ишлатилишни
тавсия қилиш мумкин.
Бу қўланиладиган инсектицидлар миқдорини камай
-
тиришга ва ҳашаротларнинг мослашишини олдиги олиш имконини беради.
Хулосалар
1. Маккажўхори парвонаси ва олма қурти
ҳашаротларининг лабора
-
торияда ўстирилган ва табиий популяцияларининг бутун онтогенетик ривож
-
ланиш босқичларида эстераза ферментлари хоссалари ўрганилди. Бунда
ҳашаротларнинг тўқималарида ХЭлар мавжудлиги аниқланди. КБЭ ҳашарот
-
ларнинг фақат табиий популяцияларида мавжудлиги, лаборатория популя
-
циялари тўқималарида эса бу ферментнинг фаоллиги
йўқ эканлиги аниқлади.
2.
Маккажўхори ва олма қурти
ҳашаротларининг бош ва кўкрак
қисмларида АХЭ ва БуХЭ мавжудлиги аниқланилиб: АХЭ маккажўхори
парвонасининг бош қисмида АТХни ўртача 1,7х10
-6
, кўкрак қисмида 1х10
-6
,
олма қуртида 10,8х10
-6
ва 5,6х10
-6
М.мг.мин кўрсаткичда; БуХЭ БТХни
маккажўхори парвонасида 0,6х10
-6
ва 1,5х10
-6
М.мг.мин, олма қуртида
19
3,6х10
-6
ва 7,7х10
-6
М.мг.мин кўрсаткичда гидролизлаш фаоллигига эга бўлган
миқдорий кўрсаткичда мавжуд эканлиги аниқланди
.
3. КБЭ
KS-14
ни маккажўхори парвонаси ва олма қуртининг кўкрак
қисмида асосан қурт фазаларида ўртача 0,6х10
-6
ва 5,4х10
-6
М.мг.мин
кўрсаткичда гидролизлаш фаоллигига эга бўлган кўрсаткичда эканлиги
ҳамда ҳашаротларнинг бош қисмида ўртача 0,1х10
-6
ва 0,4х10
-6
М.мг.мин кўр
-
саткичда гидролизлаш фаоллигидаги миқдорда мавжудлиги, олма қуртининг
капалак фазасида эса КБЭнинг умуман фаоллиги йўқлиги аниқланди.
4
. Ҳашаротлар тўқималарида мавжуд эстераза ферментларини
субстрат
-
ингибитор ва электрофоретик усуллар
асосида таҳлил қилиш
натижасида КБЭнинг
50,
53 ва 55 кДа молекуляр оғирликдаги
3 хил
изошакллари аниқланди
.
5. Ҳашаротлар ва иссиққонли ҳайвонлар КБЭ фаоллигига таркибида
С
n
H
2n+1
, C
n
H
2n-1
ва
C
n
H
2n-3
ҳамда азотли гетрохалқали радикаллар
тутган ФОБ
таъсирини таҳлил қилиш асосида ҳашаротларнинг КБЭ фаол маркази
атрофида 6 углерод атомлари
узунлиги ва 1 углерод атоми кенглигидаги
гидрофоб майдонга эга
деган хулосага келинди
.
6. Ҳашаротларнинг холинэстераза ва карбоксилэстераза ферментлари
-
нинг самарали ингибиторларидан О,О
-
диэтил
-S-
пиперидинобутин
-2-
илтио
-
фосфатнинг
олма қурти
ҳашаротида ўтказилган тажрибаларда малатион
билан
0,0004:0,005%
нисбатда юқори синергетик хусусиятини
намоён қилганлиги
аниқланди.
Диссертация ишининг мазмуни қуйидаги нашрларда ёритилган:
1.
Б.К.Холмурадов, Х.Х.Кушиев Изучение свойств ферментов
метаболизма насекомых и регуляции их активности //ГулДУ Ахборотномаси
.
-2001.-
№2.
-
С
. 77-78.
2.
H.H.Kushiev,
B.Kholmur
а
dov,
Z.Abdukulov,
B.Ummatov,
A.Eshkuvvatov, R.Kashkarov Comparative study on the properties and regulation
of the activity of cholinesterases and carboxylesterases of the some vermin insects
/ 4
th
International symposium on the chemistry of natural compounds (scnc-2001).
-Egirdir (Isparta), Turkey.6-8 june 2001. -
Р.2
1.
3.
Х.Х.Кушиев, Б.К
.
Холмурадов, Б.Т.Умматов, Р.А.Кашкаров
Идентификация и изучение субстратной специфичности эстераз яблонной
плодожорки
Laspersia pomonella
//
Ўзбекистон аграр фани хабарномаси
.
-2001.-
№3(5).
-
С
.33-35.
4
. Б.К.Холмурадов,
Х.Х.Кушиев
Сравнительная характеристика
холинэстераз и карбоксилэстераз кукурузной совки
(
Pyrausta nubilalis Hb.
)
//ГулДУ Ахборотномаси.
-2002. -
№ 3.
-
С
.33-37.
5. H.H.Kushiev, B. Kholmur
а
dov, Sh. Kholjigitov, O. Abduganiev
Investigation properties of cholinesterases and carboxyesterases of laspersia
pomonella L. //5
th
International symposium on the chemistry of natural
compounds. -T
а
shkent.May 20-23, 2003. -
Р.258
20
6.
Б
.
Холмурадов
,
Х
.
Х
.
Кушиев
Изучение активных
центров
ферментов
метаболизма
насекомых
/
/Биологик фаол полимерлар синтези, хусусиятлари
ва қўлланиши
.
22 май 2003 йил. Тошкент,
-
С
.58.
7. B.Kholmurа
dov, Kh.Kh.Kushiev, L.Allaeva Comparative study and
regulation of the activity of cholinesterases and carboxylesterases of the pest
insects //5
th
International symposium on the chemistry of natural compounds.
Toshkent.May 20-23, 2003. -
Р.257
8. B.Kholmur
а
dov, Kh.Kh.Kushiev A Study of The Resistance Mechanisms
of Pests to Insecticides //
Международная конференция “Перспективы
развития
биологических
технологий
и
безопасность”
Ташкент
-2003. 14-
17 октябрь.
-
С.108.
9
. Б.Холмурадов.,
А.Абдурахимов, Ҳ.Ҳ.Қўшиев Айрим зараркунанда
ҳашаротларнинг метаболитик ферментлари хоссаларини ўрганиш //ГулДУ
ахборотномаси. –
2003. -
№ 4. –Б.115
-116.
10.
Б.Холмурадов Изучение резистентности кукурузной совки
Pyrausta
nubilalis Hb
. //
Кимёнинг долзарб муаммолари ва уни ўқитиш услибиёти
. 2005
Республика илмий амалий анжумани. Гулистон
, -
С
.48-49.
11. B.Kholmur
а
dov, Kh.Kh.Kushiev, Z.Tilyabaev, D.N.Dolimov Specifics
of cholinesterases and carboxyesterases of L
aspersia pomonella L
. //O
’
zbekiston
biologiya jurnali. 2008. -
№ 3.
-
Р
.6-10.
12
. Б.Холмурадов, Х.Х.Кушиев, З.Тилябаев, Д.Н.Далимов
Изучение
холинэстераз и карбоксилэстераз кукурузной совки
Pyrausta nubilalis Hb.
//ДАН РУз. 2009.
-
№2.
-
С.67
-70
13.
Б.Қ.Холмурадов, Д.А.Мураткулова
Маккажўхори парвонаси
(
Pyrausta
nubilalis
Hb.
)
ва олма қурти (
Laspeyresia
pomonella
)
ҳашаротларининг эстераза ферментлари хоссаларини ўрганиш
//
ГулДУ
ахборотномаси. –
2011. -
№
1.
–Б.
27-34.
14.
Б.Қ.Холмурадов, Ҳ.Ҳ.Қўшиев, Д.А.Мураткулова
Фосфорорганик
ингибиторларнинг токсикологик хусусиятларини ўрганиш
.
//
ГулДУ
ахборотномаси. –
2011. -
№
2.
–Б.
24-27.
15.
Х.Х.Кушиев
,
Д.Н.Далимов
,
З.Тилябаев, Б.Н.Бабаев, Б.Холмурадов
.
О,О
-
диэтил–
S(
пиперидинобутин
-2-
илтиофосфат
,
обладающий
способ
-
ностью потенцировать токсичность малатиона. Патент №
IAP 20110374.
24.08.2011.
21
Биология фанлари номзоди илмий даражасига талабгор Холмурадов
Бахтиёр
Қаршибоевичнинг 02.00.10 –
Биоорганик кимё ихтисослиги
бўйича “Олма қурти
(
Laspeyresia pomonella L.
) ва маккажўхори парвона
-
си (
Pyrausta Nubilalis Hb.
)
нинг эстераза ферментлари ингибиторлари ва
уларнинг синергетик хусусиятлари”
мавзусидаги диссертациясининг
РЕЗЮМЕСИ
Таянч
сўзлар:
холинэстераза, карбоксилэстераза,
Laspeyresia
pomonella, Pyrausta Nubilalis Hb., фосфорорганик бирикмалар, синергист
.
Тадқиқот объекти:
олма қурти
(
Laspeyresia pomonella L.
) ва
маккажўхори парвонаси (
Pyrausta Nubilalis Hb.
) зараркунанда ҳашаротлари.
Ишнинг мақсади:
олма қурти
ва маккажўхори парвонаси ҳашарот
-
ларининг холинэстераза ва карбоксилэстераза ферментлари хоссаларини
субстрат
-
ингибитор усули асосида ўрганиш
,
улар фаоллигига таъсир этувчи
фосфорорганик ингибиторларнинг синергетик хусусиятларини аниқлаш
.
Тадқиқот усуллари
:
тадқиқот жараёнда ҳашаротлар тўқималаридан
гомогенатлар тайёрлаш, ферментларни
субстрат
-
ингибитор, электрофаретик,
колориметрик ва Карновский ҳамда ингибиторларни токсикологик ва
синергетик тадқиқ қилиш усулларидан фойдаланилди.
Олинган натижалар ва уларнинг янгилиги:
тадқиқотлар учун
танланган маккажўхори парвонаси
(Pyrausta nubilalis Hb.)
ва олма қурти
(Laspeyresia pomonella L.)
зараркунанда ҳашаротларининг кимёвий препарат
-
лар таъсирига кўниккан ва сезувчан
популяцияси вакиллари организмлари
тўқималарида ҳосил бўладиган ХЭ ва КБЭ
ҳамда
уларни
ҳашаротларнинг
бутун онтогенетик ривожланиш босқичларидаги фаоллик динамикаси илк
маротаба ўрганилди. КБЭ ферменти фаоллиги асосан ҳашаротларнинг уларга
қарши қўлланувчи препаратларга нисбатан мослашган популяцияларида
аниқландики, бунда КБЭ ҳашаротлар организми
учун ёт модда ҳисобланган
инсектицидлар фаоллигига қарама
-
қарши тарзда ҳосил бўлар экан.
Шунингдек, тадқиқотлар учун танланган ҳашаротлар танасидаги ХЭ ва КБЭ
ферментлари фаоллиги ва уларнинг фарқланиш даражаси
аниқланди.
Амалий
аҳамияти:
ўтказилган
тадқиқотлар
зараркунанда
ҳашаротларга қарши танлаб таъсир этувчи физиологик фаол моддаларни
яратиш ва метаболитик ферментлар фаоллигини бошқариш учун илмий
асосланган ишланмалар яратишда асос бўлиб хизмат қилади
.
Татбиқ этиш даражаси:
тадқиқотлар учун танланган ҳашаротларнинг
КБЭ
фаоллигига қарши юқори даражада таъсир этиш хусусияти аниқланил
-
ган ингибиторлардан уларга қарши ишлатилаётган инсектицидлар
синергисти
сифатида фойдаланиш мумкин. Шунингдек, диссертация иш
натижаларидан
олий ўқув юртларида биокимё, ўсимликларни ҳимоя қилиш
ва энтомология фанлари ҳамда энзимология махсус курсларини ўқитишда
фойдаланиш мумкин.
Қўлланиш соҳаси:
биоорганик кимё, экология, энтомология
ва
қишлоқ хўжалиги.
22
РЕЗЮМЕ
диссертации Холмурадова Бахтиёра
Каршибоевича
на тему:
“Ингибиторы эстераз яблонной плодожорки
(Laspeyresia Pomonella L.)
и
кукурузной совки
(Pyrausta Nubilalis Hb.)
и изучение их синергетических
свойств”
на
соискание учёной степени
кандидата биологических наук по
специальности
02.00.10 -
Биоорганическая
химия
Ключевые слова:
холинэстераза, карбоксилэстераза, Laspeyresia
pomonella L.
, Pyrausta Nubilalis Hb., фосфорорганические соединения
,
синергист
.
Объект
исследования:
яблонная плодожорка, кукурузная
совка
.
Цели исследования:
изучение
свойств ферментов холинэстеразы и
карбоксилэстеразы насекомых яблонной
плодожорки
и кукурузной совки на
основе субстрат
-
ингибиторных методов, а также изучение синергетических
особенностей влияющих на активность фосфорорганических ингибиторов.
Методы исследования:
в процессе исследования были использованы
методы изготовления гомогенатов из ячеек насекомых, субстратно
-
ингибиторные, электрофоретические, колориметрические методы, метод
Корновского при изучении активности ферментов и их свойств, а также
методы синергетического и токсикологического исследования ингибиторов
.
Полученные результаты и их новизна:
впервые изучены
ферменты
холинэстеразы
и
карбоксилэстеразы
образуемые в клетках
организмов
представителей популяций, приспособленных к естественным условиям и
инсектицидам выбранных для исследования насекомых вредителей
яблонной
плодожорки
и кукурузной совки
и динамика их активности на КБЭ выявлена
на
онтогенетических
этапах
разития
насекомых
относительно
приспособленных
к применяемым против них препаратам, из чего выяснено,
что КБЭ продуцируется в организме в процесе противодействия активности
инсектицидов. Кроме этого, в
организме
насекомых изучены особенности и
активность ферментов
ХЭ
и
КБЭ. На
основе анализа сведений литературы и
изучения активности ферментов выявлено наличие этих ферментов в клетках
насекомых и их
активности
.
Практическая значимость:
выполненные исследования служат
основанием
для создания
физиологически активных
вешеств и при регуляции
активности
метаболических ферментов
насекомых
-
вредителей
.
Степень внедрения
и экономическая
эффективность
:
ингибиторы, у
которых выявлены особенности высокого влияния в противодействии
активности ферментов КБЭ у выбранных для исследования
насекомых, могут
быть использованы в качестве синергиста для
пестицидов,
применяемых в
сельском хозяйстве
.
Кроме того, полученные
результаты могут использо
-
ваться на
занятиях
по биохимии, энтомологии
и энзимологии
,
а также для
защиты
растений
.
Область применения
:
биоорганическая
химия, экология, энтомология
и сельское хозяйство.
23
RESUME
Thesis of. Kholmurodov Bahtiyar Karshibaevich on the scientific degree of
completion of the doctor of philosophi on biology science, specialty 02.00.10
–
Bioorganic chemistry, on the subject:
“
Study the synergetic properties and
influence of inhibitors of esterase of insects of Laspeyresia Pomonella L. and
Pyrausta Nubilalis Hb.
”
Key words:
cholinesterase, carboxylesterase, Laspeyresia pomonella L.,
Pyrausta Nubilalis Hb., phosphororganic combinations, synergist.
Object
of the research:
pest insects of Laspeyresia pomonella L. and
Pyrausta Nubilalis Hb.
The purpose of work:
study of cholinesterase and carboxylesterase
ferments of the pest insects of Laspeyresia pomonella L. and Pyrausta Nubilalis
Hb. on the basis of subtract
–
inhibitors methods as well as synergist properties
influencing on their phosphororganic inhibitors.
Methods of research:
in the process of research, preparation of
homogenates from cells of insects, substrate-inhibitors in studying of the
activeness and properties of ferments, electrophoreses, calorimetric and Karnovsky
methods as well as toxicological and synergetic methods in studying of inhibitors
were used.
The obtained results and their novelty:
for the first time it has been
researched cholinesterase and carboxylesterase ferments of the pest insects of
Laspeyresia pomonella L. and Pyrausta Nubilalis Hb. adapted to natural and
pesticides and the activeness dynamics in their ontogeny development. It was
established that the activeness of the best adapted populations of carboxylesterase
ferments to the pesticides, carboxylesterase is produced against the activeness of
the used pesticides in the organisms of insects. Moreover, on the basis of studying
their properties and analyzing information of the used literature, it was established
that the activeness of cholinesterase and carboxylesterase ferments in the
organisms of the selected insects, these ferments exist in the cells of their bodies
and their activeness degree variables according to the types of insects and plants,
and the conditions where their organs meet.
The practical value:
the carried out researches serve as a basis for working
out scientifically proved aids on creation physiological active matters against
selected insects and ruling metabolic activeness of ferments.
Degree of embed and economic efficiency:
the given pesticides can be
used as synergist against established inhibitors influencing highly on the activeness
of carboxylesterase ferments of selected insects. Moreover, the achieved results of
the dissertation can be used as a teaching material on biochemistry, nature defense
and entomology as well as on special courses of enzymology in higher education
institutions.
Field of application:
bioorganic chemistry, ecology, entomology and
agriculture.
24
Босишга рухсат этилди 22.09. 2011. Ҳажми 1,43 босма табоқ.
Бичими 60х84 1/16. Адади 100 нусха.
Буюртма 84. Гулистон давлат университети
босмахонасида чоп этилган.
